Виділення грамнегативних неспороутворюючих облігатно анаеробних бактерій
Виділення грамнегативних неспороутворюючих облігатно анаеробних бактерій - раздел Философия, На тему: ВПЛИВ НІПАЗОЛУ НА ФІЗІОЛОГО-БІОХІМІЧНІ ПОКАЗНИКИ МІКРОБОЦЕНОЗУ КИШЕЧНИКА ЩУРІВ Виділення Анаеробних Бактерій Вимагає Застосування Ряду Селективних Середовищ...
Виділення анаеробних бактерій вимагає застосування ряду селективних середовищ. Середовища готували extempore або у випадку, якщо вони були приготовані напередодні, зберігали їх в анаеробних умовах.
Грамнегативні неспороутворюючі облігатно анаеробні бактерії виділяли на Колумбія агарі (основа) з додаванням 100 мг/л канаміцину, 7,5 мг/мл ванкоміцину, 1,5 мг/л вітаміну К3 (менадіон), а також 5% еритроцитів барана. Ці середовища дозволяють культивувати бактерії, що відносяться до родів Bacteroides, Prevotella.
Бактерії роду Fusobacterium ізолювали на середовищі Колумбія агар (основа), в яке у якості селективних компонентів вносили 3,2 мг/л кристалічного фіолетового, 5 мг/л еритроміцину та 5% еритроцитів барана. При обліку результатів проводили макроскопічне та мікроскопічне вивчення ізольованих колоній, їх підрахунок і пересів кожної типової колонії на дві чашки з Колумбія агаром без антибіотиків, але з додаванням вітаміну К3 з метою виділення чистої культури бактерій, а також пересів на тіогліколеве середовище для анаеробів з індикатором анаеробних умов – резазурином. Одну із чашок з пересіяними на нього клітинами із окремої колонії і пробірку з рідким середовищем, у яку також паралельно пересівали клітини із цієї колонії, інкубували в анаеробних умовах при 37 °С протягом 48 годин. Другу чашку, з пересіяним на нього матеріалом із колонії, інкубували в аеробних умовах з метою встановлення приналежності мікроорганізмів до строгих чи факультативних анаеробів. Пересів у рідке середовище проводили з метою вивчення культуральних властивостей бактерій, а також для збереження чистої культури виділених штамів, так як деякі види можуть не рости при повторному пересіві на тверді середовища. Після інкубування добові культури мікроскопували з метою підтвердження їх чистоти, в іншому випадку проводили повторний посів на тверді поживні середовища для одержання ізольованих колоній. Після одержання чистої культури бактерій і підтвердження приналежності до облігатних анаеробів проводили їх ідентифікацію.
Ідентифікацію строго анаеробних грамнегативних бактерій проводили за наступними характеристиками: ріст у присутності жовчі (5 мг), брильянтового зеленого (100 мкг), канаміцину (1000 мкг), зброджування глюкози, наявності чорного пігменту.
Бактерії роду Bacteroides зброджували глюкозу і росли у присутності жовчі і канаміцину, але інгібувалися брильянтовим зеленим.
Бактерії роду Prevotella не росли у присутності жовчі і брильянтового зеленого, але були резистентні до канаміцину. Так само, як і бактерії роду Bacteroides, вони володіли високою сахаролітичною активністю. Деякі види утворювали чорний пігмент на кров’яних середовищах через 5–7 днів інкубації.
Бактерії роду Fusobacterium інгібувалися жовчю і канаміцином, але були стійкі до брильянтового зеленого. Ще одним диференціальним критерієм для ідентифікації бактерій даного роду від бактерій роду Bacteroides була відсутність росту на середовищі з фосфоміцином (300 мкг/мл) [29, 37].
Подальшу ідентифікацію проводили за допомогою тест-систем API 20A, Франція.
Актуальність теми.
Організм людини і його нормальна мікрофлора є єдиним взаємопов’язаним і взаємозалежним природним комплексом, стан якого у значній мірі визначає здоров’я людини. Нормальна мікрофлора є од
Сучасне уявлення про мікробоценоз кишечника людини
Загальна чисельність мікроорганізмів, що мешкають в різних біотопах людського організму, досягає величини порядку 1015. Відносини в цій спільноті мають філогенетичне давнє походження і ж
Загальна характеристика консервантів
Важливе значення при оцінці якості продукту має його мікробіологічний контроль. Потрапляння в продукт мікроорганізмів у процесі виробництва, зберігання чи використання може призвести до видимої втр
Механізми дії консервантів
Консерванти сповільнюють ріст і розвиток бактерій, плісеневих грибів і дріжджів, а також впливають на обмін речовин у них. Вони можуть мати фунгістатичну / бактеріостатичну дію, або фунгіцидну / ба
Спектр дії консервантів
Ефективність певних консервантів неоднакова щодо плісеневих грибів, дріжджів і бактерій, тобто вони не можуть бути ефективними проти всього спектру мікроорганізмів (табл. 1.2). Більшість консервант
Виникнення резистентності мікроорганізмів до консервантів
Відомо, що мікроорганізми можуть набувати стійкості до діючих на них речовин. Здатність мікроорганізмів зі збільшенням частоти впливів витримувати вищі концентрації антимікробних речовин називають
Ефіри n-оксибензойної кислоти (парабени) як консерванти
Складні ефіри парагідроксибензойної кислоти – парабени (ніпагін, ніпазол) знайшли широке застосування в харчовій, парфюмерній і фармацевтичній промисловості багатьох країн. Вони включені в фармакоп
Загальна характеристика консервантів
У роботі було використано антимікробний консервант – пропілпарагідроксибензоат (ніпазол), що застосовують у фармацевтичній та косметичній промисловості з метою попередження або інгібування росту мі
Поживні середовища, які використовували для дослідження
Для проведення досліджень використовували сухі поживні середовища
фірми "Меrck" та фірми "Scharlau", які є валідовані та не відрізняються за ростовими і селективними вл
Виділення факультативно анаеробних мікроорганізмів
Бактерії родини Enterobacteriaceae виділяли, використовуючи МакКонкі агар. Солі жовчних кислот і кристалвіолет, що входять до складу даного середовища, пригнічують ріст грампозитивної мікроф
РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДЖЕНЬ ТА ЇХНЄ ОБГОВОРЕННЯ
У процесі еволюції між організмом людини і оточуючими його видами мікроорганізмів виникли симбіотичні взаємовідносини, завдяки яким макроорганізм й бактерії, що його населяють, стали поєднаними між
Характеристика лабораторії
Експериментальна частина дипломної роботи виконувалась в лабораторії на кафедрі мікробіології Львівського національного університету імені Івана Франка.
Мікробіологічна лабораторія включає
Аналіз методів дослідження та характеристика обладнання
1. електроприлади: Автоклав
Принцип його роботи базується на збільшенні температури при підвищенні тиску. Використовують автоклав для стерилізації посуду і поживних середовищ для мікроорга
Організація робочого місця і роботи
Для всіх дослідників, що приступають до роботи в лабораторії, проводиться вступний інструктаж. Він полягає в детальному ознайомленні з устаткуванням, правильною організацією робочого місця, з безпе
Санітарно-гігієнічні вимоги до умов праці
Мікробіологічну лабораторію потрібно утримувати у чистоті. В ній не повинні знаходитись сторонні предмети. Слід регулярно проводити гігієнічні прибирання лабораторних приміщень. Забезпечити повну с
Протипожежні заходи у виробничих приміщеннях
Для попередження пожежі в лабораторії необхідно:
· не захаращувати робочі місця і проходи
· слідкувати за закриттям газових кранів
· при виявленні запаху газу не можна ко
Новости и инфо для студентов