Р а б о т а №1
Цель: Освоить серологический метод диагностики бруцеллеза (реакция Хадделсона и Райта).
Задача. Ветфельдшер обратился к врачу с жалобами на потливость, волнообразную лихорадку, головную боль, боли в мышцах и суставах. Врач предположил, что у больного бруцеллез. Было проведено комплексное аллергологическое исследование. Реакция Бюрне на 2-ой неделе заболевания оказалась сомнительной. На исследование взята сыворотка крови для постановки реакции Хеддлсона с бруцеллезным диагностикумом на стекле. Провести реакцию Хедделсона. Сделать вывод.
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Берут обезжиренное предметное стекло размером 9´12 см, расчерчивают на 5 квадратов. В первом квадрате записывают номер сыворотки; в последующие квадраты с помощью пипетки вносят ингредиенты как указано в таблице.
Содержимое квадратов перемешивают, аккуратно покачивая стекло. Затем стекло равномерно подогревают над пламенем спиртовки до 37°С около 2 мин. Стекло необходимо держать высоко над пламенем, чтобы капли не высыхали. В случае положительной реакции в первые же минуты появляются хлопья голубого или фиолетового цвета, т.к. бруцеллезный диагностикум окрашен метиленовой синькой или генцианвиолетом. Степень выраженности реакции должна быть не менее ++. Максимальный срок наблюдения 8 мин. В Ксыв. и КAg. должна отсутствовать спонтанная агглютинация.
Если агглютинация отсутствует со всеми дозами сыворотки – результат отрицательный;
Если агглютинация положительна с дозой сыворотки 0,04 мл – результат сомнительный;
Если агглютинация положительна с дозами сыворотки 0,02-0,01 мл – результат положительный;
Если агглютинация положительна на 4 креста со всеми дозами сыворотки – результат резко положительный.
Для диагностики бруцеллеза имеет значение только положительный и резко положительный результаты. В этом случае реакция агглютинации ставится в развернутом ряду – реакция Райта.
Реакция Райта ставится с разведениями сыворотки обследуемого и бруцеллезным диагностикумом, разведенным 1:10. Пробирки термостатируют при 37°С в течение 24 ч. Диагностический титр реакции равен 1:200. При отрицательном или сомнительном результатах рекомендуется через 7-10 дней повторить реакцию. Реакция Райта может быть положительной не только у больных, но у вакцинированных и переболевших, поэтому для определения инфекционной природы антител проводится исследование парных сывороток. Нарастание титра антител в 2 и более раз является достоверным серологическим подтверждением заболевания бруцеллезом.
ПРОТОКОЛ
Цель:
Реакция Хадделсона
| № п/п | Ингредиент, мл | Квадрат | ||||
| Ксыв. | КAg | |||||
| Физ. раствор | - | - | - | 0,03 | 0,03 | |
| Сыворотка | 0,04 | 0,02 | 0,01 | 0,02 | - | |
| Диагностикум | 0,03 | 0,03 | 0,03 | - | 0,03 | |
| Результат |
«+» – агглютинация; «–» – отсутствие агглютинации
Вывод:
Реакция Райта
| Разведения сыворотки | 1 : 50 | 1 : 100 | 1 : 200 | 1 : 400 | 1 : 800 | Ксыв. | КAg |
| Агглютинация |
«+» – агглютинация; «–» – отсутствие агглютинации. Диагностический титр 1 : 200
Вывод:
Заключение:(Ответить на вопросы: 1. Можно ли на основании проведенных исследований подтвердить клинический диагноз бруцеллеза? 2. Какой из методов диагностики необходимо использовать для подтверждения диагноза бруцеллеза и почему? 2. Чем можно объяснить сомнительный результат аллергической пробы у обследуемого? 3. У каких групп лиц может быть положительная реакция Бюрне?)
Р а б о т а №2
Цель: Освоить бактериологический метод диагностики сибирской язвы.
Задача. Работник животноводческой фермы М., 37 лет обратился к врачу с жалобами на лихорадку, озноб, головную боль, карбункул на наружной поверхности предплечья левой руки и сильный отек всего предплечья. Провести бактериологическое исследование отделяемого карбункула по дням, пользуясь готовыми демонстрациями. Оформить протокол. Сделать заключение.
ПРОТОКОЛ
Цель: