Для бактериологического анализа обычно используют СМЖ, взятую при люмбальной пункции или при пункции боковых желудочков мозга. СМЖ берут как можно раньше, желательно до начала антибактериального лечения. Ликвор из шприца без иглы над спиртовкой вносят в стерильную центрифужную пробирку в количестве 1-2 мл. Ликвор для исследования немедленно доставляют в лабораторию, при отсутствии такой возможности материал сохраняют при 37°С в течение нескольких часов. Для пересылки материала используют изотермальные ящики, где поддерживается температура 37°С.
С целью выделения более широкого спектра возбудителей, производят посев ликвора на питательные среды в соответствии с приказом МЗ СССР № 535 от 22.04.85 г на сывороточный агар, 5%-ный КА, «шоколадный» агар и МПА.
Проводят посев 0,1 мл гнойного ликвора или 0,1 мл суспендированного в стерильной воде осадка из СМЖ на чашки Петри. Капли материала слегка растирают стерильным шпателем Дригальского по поверхности агара. После этого чашку с МПА помещают в термостат в обычной атмосфере при 37°С, а чашки с сывороточным и «шоколадным» агаром инкубируют при повышенной концентрации СО2. Для этого чашки помещают в эксикатор, в котором создается повышенное содержание СО2 за счет горящей свечи или СО2-инкубатор. Инкубация при повышенных концентрациях СО2 способствует выявлению патогенных нейссерий, пневмококков, листерий и др.
В пробирку, к оставшемуся от посева осадку, добавляют 5 мл стерильного 0,1%-ного полужидкого агара и помещают в термостат для накопления. На второй день просматривают сделанные накануне посевы СМЖ. При появлении роста на плотных питательных средах изучают характер роста и мазки из выросших колоний, окрашенные по Граму. Проводят отсевы на элективные среды для получения чистой культуры с последующей их идентификацией.
СМЖ является стерильной средой, поэтому выделение любого микроорганизма должно расцениваться как положительный результат. Редко нахождение условно-патогенных микроорганизмов и сапрофитов, которые ранее никогда не выявлялись, может вызвать сомнение и расцениваться как загрязнение или в момент взятия пробы, или при повторных высевах со среды обогащения. В таких случаях большое значение имеют клинические данные.
При отсутствии роста колоний на твердых средах, делают высев из среды накопления на чашки с сывороточным и кровяным агаром. Твердые среды с посевами ликвора при отсутствии роста на протяжении 24 ч инкубируют в течение 3-5 дней. При отрицательных результатах высевы повторяют через 5 дней.