рефераты конспекты курсовые дипломные лекции шпоры

Реферат Курсовая Конспект

Для культивирования клеток необходимы питательные среды, которые по своему назначению делятся на ростовые и поддерживающие.

Для культивирования клеток необходимы питательные среды, которые по своему назначению делятся на ростовые и поддерживающие. - раздел Философия, Основы общей вирусологии В Составе Ростовых Питательных Сред Должно Содержатьс...

В составе ростовых питательных сред должно содержаться большое количество питательных веществ, чтобы обеспечить активное размножение клеток для формирования монослоя.

Поддерживающие среды должны обеспечивать лишь переживание клеток в уже сформированном монослое при размножении в клетке вирусов.

Они могут быть:

1) природными (сыворотка крови крупного рогатого скота, жидкости из серозных полостей, продукты гидролиза молока, различные гидролизаты – гемогидролизат, гидролизат лактальбумина, экстракты тканей)

2) синтетическими (среда 199 для культивирования первично-трипсинизированных и перевиваемых культур, среда Игла – содержит минимальный набор аминокислот и витаминов и используется для культивирования различнах линий клеток, среда Игла МЕМ – культивирование особо требовательных линий клеток).

Независимо от назначения все питательные среды для культур клеток конструируются на основе сбалансированного солевого раствора. Чаще всего им является раствор Хенкса.

Техника получения первично-трипсинизированных культур клеток из куриного эмбриона:

1. Обрабатывают скорлупу спиртом, йодом и снова спиртом.

2. Срезают скорлупу с тупого конца на границе воздушного мешка, удаляют подскорлупную оболочку, извлекают тело эмбриона (голову отделяют – не используется).

3. Тело эмбриона измельчают до кусочков 1-2 мм, поместив в раствор Хэнкса.

4. Переносят пастеровской пипеткой кусочки ткани в пробирки.

5. В пробирку наливают 2 мл раствора Хэнкса, дают жидкости отстояться, отсасывают (повторяют 2-3 раза для отмывания крови).

6. К отмытым кусочкам ткани добавляют 1-2 мл раствора трипсина, пипетируют (насасывание и выдувание на стенку пробирки) в течение 5 мин. Отстаивают жидкость в центифужной пробирке, наливают 3 мл гидролизата лактальбумина. К оставшимся кусочкам добавляют 1 мл раствора трипсина – повторяют операции.

7. Центрифугирование – 10 мин при 100 Об/мин.

8. Надосадочную жидкость отсасывают, осадок ресуспендируют в 5 мл лактальбумина.

9. Фильтруют через марлю.

10. Подсчет клеток в камере Горяева (считая всю камеру).

11. Суспензию клеток разводят раствором лактальбумина с сывороткой до содержания 400000 клеток в 1 мл и разливают по 1 мл в пробирки, закрывают стерильными пробками.

12. Инкубирование в термостате при 37ºС, в практически горизонтальном положении (угол 5º).

 

– Конец работы –

Эта тема принадлежит разделу:

Основы общей вирусологии

Вирусы имеют кардинальные отличия от других прокариотических микроорганизмов... Вирусы не имеют клеточного строенияи проявляющая свойства живого только... Вирусы имеют субмикроскопические размеры варьирующие у вирусов человека от нм до и более нм...

Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ: Для культивирования клеток необходимы питательные среды, которые по своему назначению делятся на ростовые и поддерживающие.

Что будем делать с полученным материалом:

Если этот материал оказался полезным ля Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:

Все темы данного раздела:

Основы общей вирусологии
Вирусология - наука, изучающая морфологию, физиологию, генетику, экологию и эволюцию вирусов Слово «вирус» означало яд. Этот термин применил ещё Л. Пастер для обозн

Морфология и ультраструктура вирусов.
Вирусы существуют в трех качественно различных формах: - внеклеточной – вирион; - внутриклеточной – вирус. - интегрированный с ДНК хозяина вирус (провирус)

Взаимодействие вируса с клеткой. Репродукция (размножение) вирусов.
Вирусы - облигатные внутриклеточные паразиты, способные размножаться только в живой клетке. В отличие от прокариотических и эукариотических микроорганизмов вирусы не размножают

I. Культуры клеток.
В зависимости от техники приготовления культуры клеток классифицируют на: - однослойные – клетки способны прикрепляться и размножаться на поверхности химически нейтрал

Выделение вирусов в культурах клеток и методы их индикации.
При выделении вирусов из различных инфекционных материалов от больного (кровь, моча, фекалии, слизистые отделяемые, смывы из органов) применяют культуры клеток, обладающие наибольшей чувствительнос

II. Выделение вирусов в куриных эмбрионах.
Для вирусологических исследований используют куриные эмбрионы 7-12-дневного возраста (чаще всего 9-12 дневные, иногда 5-12 дневные). Перед заражением определяют жизнеспособность эмб

Хотите получать на электронную почту самые свежие новости?
Education Insider Sample
Подпишитесь на Нашу рассылку
Наша политика приватности обеспечивает 100% безопасность и анонимность Ваших E-Mail
Реклама
Соответствующий теме материал
  • Похожее
  • Популярное
  • Облако тегов
  • Здесь
  • Временно
  • Пусто
Теги