Реферат Курсовая Конспект
Принятые сокращения и условные обозначения - раздел Образование, Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Професси...
|
государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Тюменская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской федерации
( ГБОУ ВПО ТюмГМА Минздрава России)
Кафедра микробиологии
УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС
ПО «МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ» ДЛЯ СТУДЕНТОВ ЛЕЧЕБНОГО И ПЕДИАТРИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТОВ
Дисциплинарный модуль 1
(Общий курс)
Студента (ки)________________________________________________________
Группа №__________________________________________________________
Преподаватель______________________________________________________
ЗАНЯТИЕ 1.1.1
Теоретическая справка
Теоретическая справка
Подпись преподавателя_________________________________________________________
Самостоятельная работа во внеурочное время
Изучить теоретическую справку «Типы микроскопов и принципы микроскопии; правила работы с микроскопом при использовании иммерсионной системы». Ответить на следующие работы:
Подпись преподавателя_________________________________________________________
К работе № 2 Теоретическая справка
Структурные компоненты бактериальной клетки, их функции методы выявления:
Постоянные компоненты и их природа | Функции | Метод выявления |
Клеточная стенка Гр + (пептидогликан, тейхоевые кислоты) Гр – (пептидогликан, фосфолипиды, белки, ЛПС) | 1) Скелетная 2) Защитная 3) Рецепторная 4) Антигенная 5) Адгезивная 6) Транспортная 7) Нарушение синтеза клеточной стенки ведет к образованию L-форм | Световая микроскопия, окраска по Граму |
ЦПМ (цитоплазматическая мембрана) Двойной слой фосфолипидов с внедрёнными белками | 1) Основной осмотический барьер 2) Участвует в регуляции роста и синтезе компонентов клеточной стенки 3) Транспорт питательных веществ в клетку и метаболитов из нее 4) Инвагинации участков ЦПМ - мезосомы - содержат ферменты, обеспечивающие биологическое окисление | Электронная микроскопия |
Мезосомы Производные ЦПМ | 1) Аналог митохондрий, обеспечивают синтез АТФ и процессы дыхания 2) Участвуют в делении клетки 3) Участвуют в спорообразовании | Электронная микроскопия |
Цитоплазма Сложная коллоидная система, состоит из воды, растворимых белков, РНК | Обеспечивает функционирование всех органелл | Электронная микроскопия |
Рибосомы 70S | Отвечают за биосинтез белка | Электронная микроскопия |
Нуклеоид Двунитевая молекула ДНК, замкнута в кольцо, плотно уложена в виде клубка | Расположен в центральной зоне бактерий (одна хромосома) – носитель генетической информации | Электронная микроскопия |
Непостоянные компоненты и их природа | Функции | Метод выявления |
Капсула Слизистая структура, прочно связана с клеточной стенкой (полисахариды или полипептиды) | 1) Защитная 2) Антигенная 3) Адгезивная | Световая микроскопия, окраска по Бурри, Бурри-Гинсу |
Жгутики Состоят из белка-флагеллина, являющимся Н-антигеном Пили Состоят из белка | Обеспечивают движение бактерий Пили 1-го порядка обеспечивают адгезию на поражаемой микробной клетке. Пили 2го порядка – конъюгационные, обеспечивают перенос части генетического материала от донора к реципиенту | В мазках «висячая капля», «раздавленная капля», при фазово-контрастной микроскопии Электронная микроскопия |
Плазмиды Дополнительные факторы наследственности в виде замкнутых колец ДНК с небольшой молекулярной массой | 1) Регуляторная – компенсация нарушений метаболизма ДНК клетки хозяина 2) Кодирующая – внесение в бактериальную клетку новой генетической информации | Электронная микроскопия |
Включения Гликоген, полисахариды, бета-оксимасляная кислота, полифосфаты (волютин) | Запас питательных веществ | Световая микроскопия. Волютин окрашивают по Леффлеру или Нейссеру |
Спора Образуют Гр+ бактерии, из одной клетки образуется спора. Плотная многослойная оболочка, с большим содержанием кальция и липидов, низким содержанием воды | Сохранение генетической информации, при неблагоприятных условиях. Расположена: - субтерминально - терминально - центрально | Световая микроскопия, окраска по Ожешко. |
Техника приготовления препаратов-мазков, их фиксация и окраска
Для количественного учета, изучения морфологии, выявления спор, капсул, органоидов, включений препарат-мазок необходимо зафиксировать и окрасить.
1 этап.Обезжирить стекло, протерев рабочую поверхность стекла мылом, которое затем удаляют салфеткой.
2 этап. Если микроорганизмы выращены на плотной питательной среде, то на обезжиренное стекло наносят каплю физиологического раствора и в нее вносят петлей небольшое количество материала, который распределяют тонким слоем на поверхности около 2 см2.
3 этап. Мазок высушивают на воздухе и фиксируют. В процессе фиксации микробные клетки погибают, этим достигается безопасность работы с ними. Убитые микроорганизмы лучше воспринимают красители, чем живые. В фиксированном мазке клетки прикрепляются к стеклу и не смываются при последующей обработке.
Методы фиксации
Физический метод | Химический метод |
Фиксация мазка над пламенем спиртовки в течение нескольких секунд мазком вверх | Мазок погружают в фиксатор на определенное время. В качестве фиксатора используют: этанол – 10-15 мин; ацетон – 5 мин; смесь Никифорова (этанол +эфир – 1:1) – 10-15 мин и др. |
Методы окраски
Простые методы (ориентировочные) | Сложные методы (дифференцирующие) |
1. Применяют для изучения морфологии микроорганизмов. 2. Окрашивают одним красителем анилино-вого ряда (основным или кислым): кислый фуксин, метиленовый синий, эозин, генциановый фиолетовый. | 1. Применяют для изучения структуры клеток, дифференциации микроорганизмов. 2. Используют несколько красителей. Окраска по методу: Грама, Циля-Нильсена, Ожешко, Романовского-Гимза, Нейссера Гинса-Бурри и др. |
Преимущественно для окраски микроорганизмов используют основные красители, в которых красящий ион - катион.
Краситель наливают на поверхность мазка на определенное время, затем мазок промывают до тех пор, пока струи воды не станут бесцветными, осторожно высушивают фильтровальной бумагой. Если мазок правильно окрашен и промыт, то поле зрения абсолютно прозрачно, а клетки микробов интенсивно окрашены.
Окраска по Граму. Сущность метода
Метод основан на способности микроорганизмов удерживать образующийся при окраске комплекс генцианового фиолетового и йода. Это связано с особенностями строения и химического состава грамположительных и грамотрицательных бактерий. У грамположительных бактерий на поверхности клеток есть магниевые соли рибонуклеиновой кислоты, которые прочно связывают комплекс генцианового фиолетового с йодом и препятствуют его вымыванию спиртом. Кроме того, грамположительные бактерии имеют более выраженный пептидогликановый слой, в котором после обработки спиртом сужаются поры, что также делает невозможным вымывание красителя. В результате грамположительные бактерии окрашиваются в фиолетовый цвет.
У грамотрицательных бактерий отсутствуют магниевые соли рибонуклеиновой кислоты, пептидогликановый слой значительно тоньше, а размеры пор шире. Поэтому при обработке спиртом краситель легко вымывается, бактерии обесцвечиваются и при использовании дополнительного красного красителя грамотрицательные бактерии окрашиваются в красный цвет.
Методика окраски по Граму
1. На фиксированный мазок наносят карболово-спиртовой раствор генцианового фиолетового на 1-2 минуты, затем краситель сливают.
2. Наносят раствор Люголя на 1 мин.
3. Обесцвечивают препарат этиловым спиртом в течение 30-60 секунд до прекращения отхождения фиолетовых струек красителя.
4. Препарат промывают водой.
5. Мазок докрашивают водным раствором фуксина в течение 1-2 минут, промывают водой и высушивают фильтровальной бумагой.
Этапы окраски по Граму представлены на стенде.
КЛАССИФИКАЦИЯ ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ
Теоретическая справка
К Работе № 1
T. pallidum (трепонема)
Результат:______________________
_______________________________
_______________________________
_______________________________
B. recurrentis (боррелия)
Результат:______________________
_______________________________
_______________________________
_______________________________
Теоретическая справка
К Работе № 2
Теоретическая справка
К Работе № 3
Теоретическая справка
К Работе № 4
Теоретическая справка
К Работе № 5
Подпись преподавателя______________________________________________________
Теоретическая справка
Работа № 4
Техника посева на жидкие и плотные питательные среды
Методы, основанные на механическом разобщении микробов
Работа № 5. Биохимическая активность аэробов (дифференциально-диагностические признаки)
Цель:изучить ферментативную активность микроорганизмов (см. теоретическую справку)
Самостоятельная работа: определить сахаролитическую и протеолитическую активность предложенной культуры и идентифицировать микроорганизм.
Подпись преподавателя______________________________________________________________
Самостоятельная работа во внеурочное время:
Ответьте на следующие вопросы:
1) Что изображено на схеме?
1-
2-
3-
4-
Работа№1. Схема бактериологического метода диагностики анаэробных инфекций
Цель: выявить особенности бактериологического метода диагностики для анаэробных инфекций
Самостоятельная работа:разобрать схему выделения и идентификации микроорганизмов с анаэробным типом дыхания
Схема бактериологического метода диагностики анаэробных инфекций
II
III
IV
| |||||
V
Г)
Б)
В)
I. Забор исследуемого материала
II. Накопление культуры (среды обогащения: сахарный бульон, тиогликолевая среда, железо-сульфидная среда)
III. Получения изолированных колоний на плотных питательных средах (культивирование в анаэробных условиях)
IV. Накопление чистой культуры на тиогликолевой среде
V. Идентификация выделенной чистой культуры
а) изучение морфологических и тинкториальных свойств
б) изучение культуральных свойств
в) изучение биохимических свойств возбудителя по результатам посева на среды Гисса
г) Реакция нейтрализации токсина на лабораторных животных, реакция флоккуляции
Вывод: ____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Теоретическая справка
К работе №2
Подписьпреподавателя___________________________________________________
– Конец работы –
Используемые теги: нятые, сокращения, Условные, обозначения0.072
Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ: Принятые сокращения и условные обозначения
Если этот материал оказался полезным для Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:
Твитнуть |
Новости и инфо для студентов