Морфология прокариот. Методы выявления: окраска, микроскопия

ЗАНЯТИЕ 1.1.2 Дата______________

Морфология прокариот. Методы выявления: окраска, микроскопия

  изучить морфологию прокариот; особенности ультраструктуры бактерий, функции…  

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ

о механизмах окраски структурных компонентов бактерий: клеточной стенки кислотоустойчивых бактерий, спор, капсул, жгутиков, включений.

Работа № 1. Морфология прокариот

Цель:сравнить формы и размеры микроорганизмов на примере кишечной палочки, стафилококка и гриба кандиды (см. теоретическую справку). Самостоятельная работа: микроскопируйте готовые препараты-мазки, оцените…  

Работа № 2. Изучение строения бактериальной клетки и структуры клеточной стенки

Цель:изучить строение бактериальной клетки и структуру клеточной стенки бактерий; освоить технику приготовления фиксированных препаратов.

Самостоятельная работа:приготовить мазок из смеси культур стафилококка и кишечной палочки и окрасить по Граму (см. теоретическую справку). Оценить морфологические и тинкториальные свойства.

Результат:

Вывод:

Работа № 3. Техника приготовления нативных (живых) препаратов. Изучение подвижности микроорганизмов

Самостоятельная работа:по характеру подвижности микроорганизмов определить расположение жгутиков

Результат

 

 

 

Препараты

(схема): «висячая» капля «раздавленная» капля

Вывод:

Теоретическая справка

К Работе № 1

Морфология прокариот

Бактерии  

Теоретическая справка

К работе № 2

Техника приготовления препаратов-мазков, их фиксация и окраска

  1 этап. Обезжирить стекло, протерев рабочую поверхность стекла мылом, которое… 2 этап. Если микроорганизмы выращены на плотной питательной среде, то на обезжиренное стекло наносят каплю…

Методы фиксации

 

Физический метод	Химический метод
Фиксация мазка над пламенем спиртовки в течение нескольких секунд мазком вверх	Мазок погружают в фиксатор на определенное время. В качестве фиксатора используют: этанол – 10-15 мин; ацетон – 5 мин; смесь Никифорова (этанол +эфир – 1:1) – 10-15 мин и др.

 

Методы окраски

Преимущественно для окраски микроорганизмов используют основные красители, в которых красящий ион - катион. Краситель наливают на поверхность мазка на определенное время, затем мазок…  

Окраска по методу Грама. Сущность метода

Метод основан на способности микроорганизмов удерживать образующийся при окраске комплекс генцианового фиолетового и йода. Это связано с… У грамотрицательных бактерий отсутствуют магниевые соли рибонуклеиновой… Методика окраски по Граму

Окраска по Цилю-Нильсену

Методика окраски по Цилю-Нильсену: 1. На фиксированный препарат – мазок нанести карболовый раствор фуксина через… 2. Снять бумагу, промыть мазок водой.

Окраска по Ожешко

Методика окраски по Ожешко: 1. На нефиксированный мазок нанести 0,5 % раствор соляной кислотой и… 2. Кислоту слить, препарат промыть водой, просушить и фиксировать над пламенем. Затем окрасить по Цилю-Нильсену.…

Окраска по Романовского-Гимза

Краска Романовского-Гимза состоит из метиленового синего, эозина и азура. 1. На мазок наносят рабочий раствор красителя (2 капли красителя на 1 мл… 2. Препарат промывают водой и высушивают на воздухе.

К работе № 4

Техника приготовления препаратов «висячая» и «раздавленная» капли

1 этап. Обезжирить стекло, протерев рабочую поверхность стекла мылом, которое затем удаляют салфеткой.

Этап.

Препарат «раздавленная» капля

Препарат «висячая» капля

Если микроорганизмы выращены на плотной питательной среде, то на обезжиренное стекло наносят каплю физиологического раствора и в нее вносят петлей небольшое количество материала для исследования. Затем на каплю накладывают покровное стекло таким образом, чтобы между ним и предметным стеклом не было пузырьков воздуха. Если культура выращена на жидкой питательной среде, то для приготовления препарата используют пастеровскую пипетку, с помощью которой каплю культуры наносят на предметное стекло.

Препарат готовят аналогичным образом, но каплю культуры наносят на покровное стекло, которое затем накладывают на предметное стекло с лункой, края которой смазаны вазелином. Стекла склеиваются и получается герметически закрытая камера, в которой капля долго не высыхает.

Подпись преподавателя_________________________________________________________

Самостоятельная работа во внеурочное время

а) морфологические свойства - __________________________________________________ … …

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

8. Заполните таблицу

 

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЭУКАРИОТИЧЕСКОЙ И ПРОКАРИОТИЧЕСКОЙ КЛЕТКИ

Признак	Эукариоты	Прокариоты
1. Хранение генетической информации
2. Набор хромосом
3. Наличие органелл (аппарат Гольджи, ЭПС, лизосомы)
4. Белоксинтезирующая система
5. Места синтеза АТФ
6. Наличие в клеточной стенке: а) пепдидогликана б) тейхоевых кислот в) ЛПС г) хитина или целлюлозы
7. Репродуктивные особенности

9. Заполните таблицу

 

ОСНОВНЫЕ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ

Формы бактерий	Рисунок	Морфологические и тикториальные свойства
Стрептококк
Пневмококк
Стафилококк
Менингококк, гонококк
Кишечная палочка
Бациллы
Клостридии