· В ответ на введение антигена ( бактерии , вирусы , эритроциты и др. ) органимизм продуцирует с помощью В – лимфоцитов специфические антитела , которые представляют собой белки , называемые иммуноглобулинами ,обуславивающие защитные реакции организма по механизму гуморального иммунитета ; однако любое чужеродное тело , попадающее в организм , представляет собой смесь разных антигенов которые возбуждают продукцию разных антител ( для практических потребностей – диагностики и лечения ряда болезней - необходимы моноспецифические сыворотки , содержащие антитела только одного типа – моноклониальные антитела , поражающие определённые антигены )
· Антителообразующие клетки ( В – лимфоциты ) не могут расти и размножаться вне организма на питательной среде ; в то же время существуют злокачественные ( раковые ) опухоли костного мозга – миеломы , клетки которых с огромной скоростью размножаются на питательных средах в течение длительного времени ; задача заключается в создании гибридных клеток , совмещающих особенности В-лимфоцитов к образованию специфических антител и раковых клеток – быстро размножающихся в искусственных питательных средах
· Созданием искусственных гибридов антител занимается новая ветвь биотехнологии – иммунобиотехнология
Технология получения моноклониальных антител
1. Иммунизация мышей или крыс , т. е. заражение их желаемым антигеном ( обычно за 5 дней до гибридизации ) , приводящая к началу продукции лимфоцитами специфических антител одного вида ( моноклониальных )
2. Получение гибридных клеток в результате слияния раковых клеток миеломы с антителообразующими лимфоцитами мышей ( полученный гибрид этих клеток называется гибридома ), способных , как и все опухолевые клетки , бесконечно долго размножаться на искусственных питательных средах, давая многочисленную популяцию гибридом - гибридомный клон ; клетки возникшего клона способны также продуцировать неограниченное количество антител одного типа ( моноклониальных )
· Клонирование позволяет вырастить из одной клетки гибридомы жизнеспособную популяцию , которая продуцирует антитела , заданной иммунизацией специфичности ( для сохранения клона его клетки хранят неограниченное время в жидком азоте при – 180о )
· Метод гибридомной технологии широко используется в биологии и медицине для диагностики и лечения ряда болезней , продукции ферментов , вакцин и лечебных сывороток ; в 1984 г . Келлеру и Мильштейну ( англ. ) была присуждена Нобелевская премия
· В1980 году получены человеческие гибридомы , продуцирующие моноклониальные антитела к антигенам вируса крови
· Возможно слияние трёх или четырёх клеток в единый гибрид с образованием триом или квадром , способных к продукции бифункциональных моноклониальных антител, т. е. к связыванию двух разных антигенов ; такие бифункциональные антитела используют для направленного транспорта : лекарственные препараты , гормоны , ингибиторы роста идут к определёному месту где требуется блокировать антиген