Пригодны общепринятые плотные и жидкие питательные среды, однако при выделении из патологического материала следует применять среды, обогащенные кровью, сывороткой крови, дрожжевым экстрактом.
Идентификация Р. multocida сероварианта А с использованием гиалуронидазы стафилококка.
Метод основан на способности гиалуронидазы, выделяемой стафилококком, деполимеризовать капсулу Р. multocida сероварианта А, состоящую из гиалуроновой кислоты.
На поверхность агара Хоттингера в чашке Петри штрихом высевают суточную бульонную культуру Р. multocida. После этого перпендикулярно линиям посева по всему диаметру чашки петлей высевают суточную бульонную культуру Staphylococcus aureus. Чашки с посевами инкубируют при 37°С с периодическим просмотром в течение 24 ч. Деполимеризующее действие гиалуронидазы проявляется уменьшением размера колоний пастерелл и примыкающих к линии роста стафилококков. При просмотре чашек в косопроходящем свете колонии Р. multocida сероварианта А, находящиеся в непосредственной близости от линии роста стафилококка, тусклые, серого или голубого цвета, в то время как остальные колонии — яркие, флюоресцирующие. У колоний, образуемых другими серовариантами (В, D, Е), изменений в размерах и окраске не наблюдается.
Идентификация Р. multocida сероварианта D с использованием акрифлавина.
Испытуемую культуру высевают на агар Хоттингера с 10% крови быка или барана и инкубируют при 37°С 24 ч, затем пересевают в пробирки, содержащие 3 мл бульона Хоттингера. Инкубируют при 37°С 18-24 ч. Бульонные культуры переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют в режиме, обеспечивающем осаждение бактериальных клеток. После центрифугирования 2,5 мл надосадочной жидкости сливают, а в оставшейся ресуспендируют осевшие клетки и добавляют 0,5 мл свежеприготовленного водного раствора (1:1000 - 1:500) нейтрального акрифлавина (синий трипафлавин, флавакридин, флавин). Перемешивают и оставляют при комнатной температуре.
Если испытуемая культура относится к сероварианту D, то в течение 10-20 минут образуется крупнохлопчатый осадок. Штаммы других серовариантов (А, В, Е) в осадок не выпадают и сохраняют стабильность суспензии в течение длительного времени (от нескольких часов до суток и более).