Определение активности аминотрансфераз в сыворотке крови имеет важное значение для диагностики болезней печени. Для острого гепатита характерно раннее повышение активности аланинаминотрансферазы (АлАТ). При инфаркте миокарда в 95 % случаев в сыворотке крови повышается активность аспартатаминотрансферазы (АсАТ). В сыворотке крови здоровых людей активность АсАТ колеблется в пределах 0,028-0,139 мкмоль/л×сек, активность АлАТ – 0,028-0,196 мкмоль/л×сек.
Принцип метода.В результате переаминирования при участии АсАТ и АлАТ образуются, соответственно, щавелевоуксусная (ЩУК, оксалоацетат) и пировиноградная (ПВК) кислоты.
СООН СООН СООН СООН
| | | |
СН–NH2 + C=O C=O + СН–NH2
| | ←→ | |
CH2 (CH2)2 АсАТ CH2 (CH2)2
| | | |
COOH COOH COOH COOH
аспартат α-кетоглутарат оксалоацетат глутамат
СООН СООН СООН СООН
| | | |
СН–NH2 + C=O C=O + СН–NH2
| | ←→ | |
CH3 (CH2)2 АлАТ CH3 (CH2)2
| |
COOH COOH
аланин α-кетоглутарат пируват глутамат
Оксалоацетат при декарбоксилировании превращается в пируват. При добавлении кислого 2,4-динитрофенилгидразина ферментативный процесс останавливается и образуется гидразон пировиноградной кислоты. Последний в щелочной среде дает окрашивание, интенсивность которого пропорциональна количеству образовавшейся пировиноградной кислоты.