Кислоты в биологических жидкостях энзиматическим колориметриче-ским методом без депротеинизации
Кислоты в биологических жидкостях энзиматическим колориметриче-ским методом без депротеинизации - раздел Химия, РАЗДЕЛ 5 БИОХИМИЯ БЕЛКОВ И НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ. БЕЛКИ-1. ПЕРЕВАРИВАНИЕ И ВСАСЫВАНИЕ БЕЛКОВ
Принцип Метода. Содержащаяся В Пробе Мочевая Кислота О...
Принцип метода. Содержащаяся в пробе мочевая кислота окисляется поддействием фермента уриказы с образованием эквимолярного количества пе-рекиси водорода. В присутствии пероксидазы перекись водорода окисляет хромогены с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации мочевой кислоты в пробе.
Ход работы. Осуществляется в соответствии с таблицей1. Таблица 1.
РЕАКТИВЫ
Опытная проба, мл
Калибровочная проба,
мл
Рабочий реагент
2,0
2,0
Калибратор
-
0,05
Сыворотка крови
0,05
-
Содержимое опытной пробы перемешивают и инкубируют в термостате при температуре 20-25C не менее 10 минут. Затем опытную пробу фотомет-рируют при длине волны 490 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 0,5 см против дистиллированной воды.
1 3,5-дихлоро-2-фенолсульфонат
2 4-аминоантипирин
Примечание:Окраска стабильна не менее40минут после окончания инкуба-ции.
Расчёт производят по формуле:
С = Епр / Екал • 357 (мкмоль/л) или
С = Епр / Екал • 6 мг/100 мл
где Епр – экстинкция опытной пробы,
Екал – экстинкция калибровочной пробы,
357 или 6 – концентрация мочевой кислоты в калибраторе в мкмоль/л
или мг/100мл
Норма: женщины–142-339мкмоль/л(2,4-5,7мг/100мл),
мужчины – 202-416 мкмоль/л (3,4-7,0 мг/100 мл.
Клинико-диагностическое значение.
Увеличение уровня мочевой кислоты в крови (гиперурикемия) отмечается при патологических состояниях, связанных с усилением распада клеток (в особенности содержащих ядра), нарушением выделения мочевой кислоты с мочой, изменением эндокринной регуляции обмена пуриновых оснований (вторичные гиперурикемии), а также при подагре – заболевании, обуслов-ленном первичным (вызванным врожденными ферментативными сдвигами метаболизма) нарушением обмена этого метаболита.
Гипоурикемия (уменьшение концентрации этого метаболита) наблюдается при гепатоцеребральной дистрофии (болезни Вильсона-Коновалова), некото-рых злокачественных новообразованиях (лимфогранулематозе, бронхоген-ном раке), у больных после приема пиперазина, атофана, салицилатов и кор-тикотропина (АКТГ).
Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагностическую оценку.
Нентов желудочного сока
а) Обнаружение молочной кислоты по реакции Уффельмана.
Принцип метода. При взаимодействии фенолята железа,
З а д а ч и
1. Через какие интермедиаты в ЦТК вступает тирозин?
а) оксалоацетат; б) малат; в) фумарат; г) α-кетоглутарат; д) ацетилкоэнзим А.
Ны в сыворотке крови и в моче диацетилмонооксимным методом
Принцип метода. Мочевина образует с диацетилмонооксимом в сильно-кислой среде в присутствии тиосемикарбазида и ионов трехвалентного желе-за комплекс красного цвета, интенсивн
З а д а ч и
1. При декарбоксилировании какой аминокислоты образуется β-аланин?
а) α-аланина; б) глутамина; в) метионина; г) фенилаланина; д) аспартата.
З а д а ч и
1. Для биологического кода характерны следующие свойства: а) каждый кодон соответствует одной АК; б) каждой АК соответствует только один кодон;
в) кодон мРН
З а д а ч и
1. Формирование вторичной структуры ДНК происходит за счет:
а) водородных связей; б) ионных связей; в) сложноэфирных связей; г) гид-рофобных взаимодействий;
Реакция окисления
Принцип метода. В щелочной среде тиамин окисляется феррицианидом калия в тиохром, обладающий при ультрафиолетовом облучении синей флюоресценцией. Реакц
Диазореакция
Принцип метода. В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует сложное комплексное соединение оранжевого цвета.
Ход работы.
Ду Сулковича
При гиперпаратиреозе, передозировке витамина D, опухолях костей и не-которых других заболеваниях наблюдается гиперкальциемия, которая ис-ключительно опасна для здоровья. В связи с э
Исходный уровень знаний и навыков
С т у д е н т д о л ж е н з н а т ь :
Строение и свойства основных классов гормонов (стероидные, пептид-
ные
Щитовидной железы
Принцип метода. При щелочном гидролизе тироксина образуется иодид калия, из которого иод вытесняется иодатом калия. Выделившийся свобод-ный йод дает с крахмалом синее
Исходный уровень знаний и навыков
С т у д е н т д о л ж е н з н а т ь : 1 Состав крови.
2 Строение и функции форменных элементов.
3 Основные физико-химические константы крови.
З а д а ч и
1. По какому признаку разделяют белки крови методом электрофореза?
а) по молекулярной массе; б) по растворимости в буферных растворах; в) по заряду.
З а д а ч и
1. Гемоглобин транспортирует по крови:
а) азот; б) углекислый газ; в) кислород; г) аммиак?
2. Какие функции гемоглобина нарушаются при серповиднокл
З а д а ч и
1. Содержание каких компонентов сыворотки крови характеризует нару-шение выделительной функции почек?
а) электролитов; б) мочевины; в) креатинина; г) гамма-
Новости и инфо для студентов