Государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
«Воронежская государственная медицинская академия имени Н.Н. Бурденко»
Министерства здравоохранения Российской Федерации
Кафедра химии
Методические указания
К лабораторным работам
СОДЕРЖАНИЕ
| Общие правила работы в лаборатории | |
| ОБЩАЯ ХИМИЯ | |
| ТЕМА 1. РАСТВОРЫ | |
| Работа 1. Приготовление рабочего 0,1N раствора HCl | |
| Работа 2. Определение нормальности рабочего раствора HCl по 0,1N раствору NaOH | |
| Работа 3. Древовидные образования | |
| Работа 4. Рост искусственной «клетки» Траубе | |
| ТЕМА 2. ГЕТЕРОГЕННЫЕ РАВНОВЕСИЯ И ПРОЦЕССЫ | |
| Работа 5. Определение хлоридов мочи по Мору | |
| ТЕМА 3. КОМПЛЕКСОНОМЕТРИЯ | |
| Работа 6. Определение общей жесткости воды трилонометрическим методом | |
| ТЕМА 4. ПРОТОЛИТИЧЕСКИЕ РАВНОВЕСИЯ И ПРОЦЕССЫ | |
| Работа 7. Приготовление буферных растворов | |
| Работа 8. Влияние разбавления на рН буферного раствора | |
| Работа 9. Влияние кислоты и щелочи на рН буферного раствора | |
| ТЕМА 5. ЭЛЕКТРОХИМИЯ | |
| Работа 10. Потенциометрический метод определения рН растворов при помощи стеклянного электрода | |
| ТЕМА 6. ПОВЕРХНОСТНЫЕ ЯВЛЕНИЯ. ХРОМАТОГРАФИЯ | |
| Работа 11. Разделение минеральных солей на колонках с твердым адсорбентом | |
| Работа 12. Радиальная распределительная хроматография | |
| ТЕМА 7. ДИСПЕРСНЫЕ СИСТЕМЫ | |
| Работа 13. Метод замены растворителя | |
| Работа 14. Получение золя гидроксида железа (III) | |
| Работа 15. Получение золя гексацианоферрата (II) меди | |
| Работа 16. Изучение процесса коагуляции коллоидных растворов | |
| ТЕМА 8. РАСТВОРЫ ВМС | |
| Работа 17. Изучение процесса денатурации белков | |
| Работа 18. Изучение процесса высаливания белков | |
| БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ | |
| ТЕМА 1. СПИРТЫ, ФЕНОЛЫ | |
| Работа 1. Растворимость в воде спиртов и фенолов | |
| Работа 2. Взаимодействие многоатомных спиртов с гидроксидом меди (II) | |
| Работа 3. Цветные реакции на фенольную группу | |
| Работа 4. Взаимодействие адреналина с хлоридом железа (III) | |
| ТЕМА 2. ТИОЛЫ, АМИНЫ | |
| Работа 5. Восстановление нитробензола в анилин | |
| Работа 6. Окисление анилина | |
| Работа 7. Образование солей анилина | |
| ТЕМА 3. АЛЬДЕГИДЫ И КЕТОНЫ | |
| Работа 8. Восстанавливающие свойства альдегидов | |
| Работа 9. Качественная реакция на ацетон (проба Либена) | |
| ТЕМА 4. КАРБОНОВЫЕ КИСЛОТЫ | |
| Работа 10. Получение муравьиной кислоты (щелочной гидролиз хлороформа) | |
| Работа 11. Открытие щавелевой кислоты в виде кальциевой соли | |
| Работа 12. Выделение жирных кислот из мыла и получение кальциевых солей | |
| Работа 13. Получение эфира жирной кислоты (этилацетата) | |
| Работа 14. Непредельные кислоты. Свойства олеиновой кислоты | |
| Работа 15. Качественная реакция на молочную кислоту (реакция Уфельмана) | |
| Работа 16. Обнаружение фенольного гидроксила в карбоновых кислотах | |
| ТЕМА 5. АМИНОКИСЛОТЫ. БЕЛКИ | |
| Работа 17. Биуретовая реакция Пиотровского (на пептидную связь) | |
| Работа 18. Ксантопротеиновая реакция на ароматические аминокислоты | |
| Работа 19. Реакция Фоля на серосодержащие аминокислоты | |
| Работа 20. Нингидриновая реакция на α-аминокислоты | |
| Работа 21. Реакция Адамкевича на наличие триптофана в белке | |
| ТЕМА 6. ЛИПИДЫ | |
| Работа 22 . Омыление жиров | |
| Работа 23 . Открытие глицерина в жире | |
| Работа 24. Гидролиз лецитинов и открытие составных частей | |
| Работа 25 . Определение непредельности жира | |
| ТЕМА 7. УГЛЕВОДЫ | |
| Работа 26. Общая реакция на углеводы (реакция Подобедова - Молиша) | |
| Работа 27. Доказательство наличия гидроксильных групп в глюкозе | |
| Работа 28. Реакция окисления глюкозы гидроксидом меди (II) (реакция Троммера) | |
| Работа 29. Реакция окисления глюкозы реактивом Фелинга (реакция Фелинга) | |
| Работа 30. Реакция окисления глюкозы реактивом Гайнеса (реакция Гайнеса) | |
| Работа 31. Реакция окисления глюкозы реактивом Бенедикта (реакция Бенедикта) | |
| Работа 32. Реакция окисления глюкозы гидроксидом висмута (III) (реакция Ниландера) | |
| Работа 33. Реакция Селиванова на фруктозу | |
| Работа 34. Реакция Биаля на пентозы (с орцином) | |
| Работа 35. Реакция Фелинга с лактозой и сахарозой | |
| Работа 36. Кислотный гидролиз сахарозы | |
| Работа 37. Реакция Селиванова с сахарозой и лактозой | |
| Работа 38. Качественная реакция на крахмал и гликоген | |
| ТЕМА 8. НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ | |
| Работа 39. Гидролиз фракции, содержащей нуклеопротеины | |
| Работа 40. Качественные реакции на открытие составных частей нуклеопротеинов | |
| ЛИТЕРАТУРА |
ОБЩИЕ ПРАВИЛА РАБОТЫ В ЛАБОРАТОРИИ
Для успешного выполнения лабораторных работ каждый работающий в лаборатории обязан содержать свое место в чистоте и порядке; работать в лаборатории можно только в халатах. Приступая к работе, необходимо ознакомиться с устройством приборов и аппаратов, их принципом действия. Знать свойства применяемых веществ и методы безопасной работы с ними. Пользоваться можно только реактивами, имеющими этикетки и стоящими на полке рабочего стола. Если реактива нет, необходимо обратиться к лаборанту. Излишек взятого реактива не возвращать в посуду, из которой он был взят, а перенести в специальную емкость.
ПОРЯДОК ОФОРМЛЕНИЯ РАБОТ
В процессе выполнения лабораторной работы студент должен наблюдать за ходом эксперимента, отмечая все его особенности: изменение цвета, тепловые эффекты, показания приборов и т.д. Результаты наблюдений записываются в лабораторный журнал в определенной последовательности:
1) название лабораторной работы, дата выполнения;
2) цель работы;
3) ход работы, начертить рисунок прибора или схему установки с кратким описанием важных узлов;
4) результаты эксперимента должны быть внесены в таблицы;
5) расчетная часть (таблицы, формулы, графики);
6) выводы.
Записи в лабораторном журнале, рисунки приборов, схемы установок производят чернилами. Графики выполняют карандашом на миллиметровой бумаге. Все расчеты необходимо проводить в лабораторном журнале.
Значения символов и коэффициентов, входящих в формулу, должны быть приведены непосредственно под формулой в той последовательности, в какой они приведены в формуле.
ОБЩАЯ ХИМИЯ
ТЕМА 1. РАСТВОРЫ
В этом разделе представлены работы, касающиеся приготовления растворов заданной концентрации и определения их свойств. Данный раздел является достаточно важным для будущих врачей, т.к. все важнейшие биологические системы (цитоплазма, кровь, лимфа, слюна, моча и т.д.) являются водными растворами солей, белков, углеводов, липидов, а также многие лекарственные средства представляют собой растворы. Работы, представленные в данном разделе, позволяют приобрести навыки приготовления растворов и их анализа.
Таблица 1.1
Работа 2. Определение нормальности рабочего раствора HCl
Работа 3. Древовидные образования
Задача работы:ознакомление с понятием осмоса и осмотического давления. Изучить сущность явления гемолиза.
Оборудование, реактивы: штатив с пробирками, раствор силикатного клея, Кристаллы солей: железа, меди, марганца, никеля, кобальта и др. (хлориды, бромиды, нитраты).
Выполнение работы:
1. Ряд пробирок наполняют раствором силикатного клея и опускают в пробирки кристаллики солей. Через некоторое время из кристаллов вырастают древовидные образования.
2. Дают объяснение наблюдаемому явлению.
ТЕМА 2. ГЕТЕРОГЕННЫЕ РАВНОВЕСИЯ И ПРОЦЕССЫ
В этом разделе представлена работа, в основе которой лежит теория гетерогенных равновесий в растворах электролитов. Методы осаждения, в частности аргентометрия, применяются в клинических лабораториях для количественного определения хлоридов в крови, желудочном соке и моче; в санитарно-гигиенических лабораториях – для анализа воды. Методы осаждения широко применяются также для анализа фармацевтических препаратов.
ТЕМА 3. КОМПЛЕКСОНОМЕТРИЯ
В этом разделе представлена работа, в основе которой лежит метод комплексонометрического титрования, в частности трилонометрия. Данный метод широко применяют в биохимическом и фармацевтическом анализе для количественного определения солей кальция – хлорида кальция, глюконата кальция, лактата кальция, препаратов цинка – оксида цинка и сульфата цинка; сульфата магния и основного нитрата висмута. Комплексонометрия применяется также в санитарно-гигиеническом анализе для определения общей жесткости воды.
ТЕМА 4. ПРОТОЛИТИЧЕСКИЕ РАВНОВЕСИЯ И ПРОЦЕССЫ
В этом разделе представлены работы, касающиеся приготовления буферных растворов с заданным значением рН, концентрации и определения их свойств. Данный раздел является достаточно важным для будущих врачей, т.к. большинство биожидкостей организма являются буферными растворами. Знание химического состава, свойств и механизма действия буферных систем позволяет понять, чем обусловлено постоянство рН внутренней среды организма (изогидрия). В поддержании кислотно-основного состояния организма участвуют несколько буферных систем: бикарбонатная, фосфатная, белковая, гемоглобиновая.
ТЕМА 5. ЭЛЕКТРОХИМИЯ
В этом разделе представлена работа, в которой используется электрохимический метод анализа растворов электролитов – потенциометрия. Одной из ее разновидностей является рН – метрия, в которой определяют рН растворов – одной из самых важных характеристик сред организма и жидких лекарственных средств.
ТЕМА 6. ПОВЕРХНОСТНЫЕ ЯВЛЕНИЯ. ХРОМАТОГРАФИЯ
В этом разделе представлены работы, по изучению поверхностных явлений, т.к. большинство процессов, как производственных, так и происходящих в живой природе и человеческом организме, являются гетерогенными и начинаются как поверхностные процессы.
Работа 11. Разделение минеральных солей на колонках с твердым адсорбентом
Задача работы:познакомиться с принципом адсорбционной хроматографии.
Оборудование, материалы, реактивы:адсорбционная колонка с Al2O3, разделяемая смесь веществ (FeCl2, CuCl2, CoCl2), элюент - K3[Fe(CN)6].
Выполнение работы:
1. Смесь хлоридов железа, меди и кобальта в объеме 2-3 мл наливают небольшими порциями в колонку, наполненную оксидом алюминия.
2. После того как весь раствор пройдет через колонку, «проявляют» хроматограмму минеральных солей, адсорбированных на оксиде алюминия. Для этого через колонку пропускают разбавленный раствор гексацианоферрата (III) калия K3[Fe(CN)6].
Многозарядные ионы вступают в химическое взаимодействие с K3[Fe(CN)6] с образованием различно окрашенных соединений: слой, содержащий Fe2+, окрашивается в интенсивно синий цвет (турнбулева синь), слой, содержащий Cu2+ - в коричневый, а слой, содержащий Co2+ - в зеленый.
| Cu2+ |
| Co2+ |
| Fe2+ |
3. Зарисовать хроматограмму.
4. Сделать вывод об адсорбционной способности ионов, в зависимости от расположения на хроматограмме.
ТЕМА 7. ДИСПЕРСНЫЕ СИСТЕМЫ
В этом разделе представлены работы по получению и изучению свойств дисперсных систем, которые знакомят с классическими методами определения некоторых характеристик таких систем и могут быть полезны будущим медикам.
Работа 15. Получение золя гексацианоферрата (II) меди
Задача работы:познакомиться с конденсационным методом получения дисперсных систем – реакцией двойного обмена.
Оборудование, материалы, реактивы:0,01%-ный раствор K4[Fe(CN)6], 1%-ный раствор CuSO4, пипетка на 10 мл, пробирки.
Выполнение работы:
1. К 10 мл 0,01%-ного раствора желтой кровяной соли K4[Fe(CN)6] прибавляют 2-3 капли раствора сульфата меди (II). Получается коричнево-красный золь гексацианоферрата (II) меди.
2. Изобразить схему мицеллы золя гексацианоферрата (II) меди.
ТЕМА 8. РАСТВОРЫ ВМС
В этом разделе представлены работы по изучению свойств растворов ВМС, в частности белков. Рассмотрены общие и клинические реакции осаждения и высаливания белков.
Проба используется в клинике для обнаружения белка.
БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ
Рассмотрены лабораторные работы, касающиеся теоретических основ строения и реакционной способности различных классов органических соединений. Приобретенные теоретические знания, практические навыки и умения составят базу для дальнейшего изучения биохимии. Они будут востребованы также при изучении фармакологии, гигиены и других дисциплин.
ТЕМА 2. ТИОЛЫ, АМИНЫ
В этом разделе представлены работы по изучению свойств аминов. Анилин находит широкое применение для получения различных лекарственных веществ, в частности сульфаниламидных препаратов и многих других соединений.
Задача работ: познакомиттся с методом получения и изучить химические свойства анилина.
Оборудование, материалы:нитробензол, металлический цинк, дистиллированная вода, хромовая смесь, анилин, концентрированная соляная и серная кислоты, пробирки, пипетки.
Работа 6. Окисление анилина
Выполнение работы: В пробирку наливают 1 мл раствора солянокислого анилина (гидрохлорида анилина) и 4-5 капель хромовой смеси. Содержимое пробирки окрашивается в темно-зеленый цвет, переходящий в синий, а затем в черный. «Черный анилин» является продуктом сложного строения и применяется как краситель.
Работа 7. Образование солей анилина
Выполнение работы: В две пробирки наливают по 1 мл дистиллированной воды, по 2 капли анилина и встряхивают. В обеих пробирках получается эмульсия анилина вследствие его плохой растворимости в воде. В первую пробирку прибавляют 0,5 мл соляной кислоты, во вторую – серной.
После встряхивания содержимого в первой пробирке образуется прозрачный раствор хлорида фениламмония (анилинийхлорид), во второй – выпадает осадок гидросульфата фениламмония (анилинийгидросульфат).
С6Н5 - NH2 + HCl → [C6H5 - NH3]+ Cl-
анилин хлорид фениламмония
С6Н5 - NH2 + H2SO4 → [C6H5 - NH3]+ HSO4-
анилин гидросульфат фениламмония
ТЕМА 3. АЛЬДЕГИДЫ И КЕТОНЫ
В этом разделе представлены работы по изучению свойств альдегидов и кетонов. Простейшими представителями альдегидов являются: муравьиный альдегид (формальдегид) и уксусный альдегид (ацетальдегид), простейшим представителем кетонов – ацетон. Альдегиды встречаются в организме человека как продукты обмена веществ. Альдегиды и их производные находят широкое применение в медицинской практике (формальдегид, гексаметилентетрамин (уротропин), хлоральгидрат, цитраль, витамины В6 и А и др.).
Задача работы: изучить химические свойства альдегидов и кетонов. Познакомиться с качественными реакциями на альдегиды и ацетон.
Оборудование, материалы:раствор ацетальдегида, аммиачный раствор оксида серебра, 10%-ный раствор гидроксила натрия, 5%-ный раствор сульфата меди, раствор Люголя, пробирки, пипетки, спиртовка.
Проба Либена используется в клинических лабораториях для открытия ацетона в моче (при сахарном диабете, голодании).
Работа 11. Открытие щавелевой кислоты в виде кальциевой соли
Выполнение работы: в пробирку наливают 1 мл 1,5%-ного раствора оксалата натрия, прибавляют несколько капель 2%-ного раствора хлорида кальция. Выпадает белый кристаллический осадок оксалата кальция. Содержимое пробирки разливают на две части: к одной прибавляют 1 мл 5%-ного раствора уксусной кислоты - осадок не растворяется, к другой -1 мл 5%-ного раствора соляной кислоты - осадок растворяется.
O
COONa C - O
+ CaCI2 → Ca + 2 NaCI
COONa C – O
O
оксалат натрия оксалат кальция
COOH
(COO)2Ca + 2 HCI → + CaCI2
COOH
щавелевая кислота
Работа 12. Выделение жирных кислот из мыла и получение кальциевых солей.
Выполнение работы:В две пробирки наливают по 5 мл раствора мыла в воде. В первую пробирку добавляют 2 мл разбавленной серной кислоты. Происходит обменная реакция и выделяется жирная кислота, которая в воде не растворяется. Поэтому раствор становится мутным. Нагрейте полученную смесь, а затем охладите. При нагревании жирные кислоты всплывают наверх, а при охлаждении они затвердевают.
Во вторую пробирку прибавляют 2 мл раствора хлористого кальция. Энергично взболтайте. Образуется осадок кальциевых солей высших жирных кислот. Эти соли не растворяются в воде.
Работа 13. Получение эфира карбоновой кислоты (этилацетата).
Выполнение работы:внесите в пробирку 2 мл этилового спирта, 2 мл ледяной уксусной кислоты и 1 мл концентрированной серной кислоты. Смесь хорошо перемешайте стеклянной палочкой и нагревайте 2 минуты на водяной бане. В результате реакции этерификации образуется уксусноэтиловый эфир, обладающий приятным запахом.
Работа 14. Непредельные кислоты. Свойства олеиновой кислоты.
Выполнение работы:
а) Получение соли олеиновой кислоты.
Налейте в пробирку 1 мл олеиновой кислоты и добавьте 2 мл воды. Обратите внимание на растворимость олеиновой кислоты в воде. Добавьте 2 мл концентрированной щелочи (NaOH); встряхните смесь.
б) Окисление олеиновой кислоты.
К 1 мл олеиновой кислоты прибавьте 2 мл раствора перманганата калия. Энергично перемешайте содержимое пробирки. Олеиновая кислота окисляется до диоксистеариновой кислоты, а перманганат калий восстанавливается с выделением оксида марганца (IV).
Работа 15. Качественная реакция на молочную кислоту
(реакция Уфельмана)
Выполнение работы: в пробирку наливают 2 мл 1%-ного раствора фенола и по каплям прибавляют 1%-ный раствор хлорида железа (III), развивается аметистовое окрашивание (реактив Уфельмана). К полученному реактиву добавляют по каплям 0,1%-ный раствор молочной кислоты; содержимое пробирки приобретает зеленовато-желтый цвет.
Реакция используется в клинических лабораториях для открытия молочной кислоты в желудочном соке при некоторых патологических состояниях.
Работа 16. Обнаружение фенольного гидроксила в карбоновых кислотах
Выполнение работы:взять две пробирки, в одну поместить несколько кристаллов салициловой кислоты, а в другую – аспирина. Прибавить для растворения 3-4 капли воды и затем 1 каплю 1%-ного раствора хлорного железа (III). При наличии свободного фенольного гидроксила в молекуле исследуемого вещества немедленно появляется темно-фиолетовое окрашивание. Напишите формулы салициловой кислоты и аспирина.
Работа 17. Биуретовая реакция Пиотровского (на пептидную связь).
Выполнение работы:в первую пробирку наливают 5 капель 1% раствора яичного белка, во вторую 5 капель 1% раствора желатина. Во все пробирки приливают 5 капель 10% раствора гидроксида натрия и по 1 капле 1% раствора сульфата меди и перемешивают. Во всех пробирках раствор приобретает устойчивую красно-фиолетовую (сине-фиолетовую) окраску.
Эта реакция является универсальной для всех белков, так как она открывает наличие не менее двух пептидных связей, с помощью которых соединяются между собой аминокислоты, входящие в белки, и формируют его первичную структуру. Раствор белка (нативного) дает сине-фиолетовое окрашивание, а продукты его гидролиза (пептиды) - красно-фиолетовый цвет.
Работа 21. Реакция Адамкевича на наличие триптофана в белке
Выполнение работы:в первую пробирку наливают 5 капель 1% раствора яичного белка, во вторую – 5 капель 1% раствора желатина. В обе пробирки добавляют по 5 капель концентрированной уксусной кислоты, слегка нагревают, затем охлаждают и по стенке пробирки (осторожно), чтобы жидкости не смешивались, приливают 10 капель концентрированной серной кислоты. В первой пробирке на границе двух слоев наблюдается красно-фиолетовое окрашивание в виде кольца, постепенно распространяющееся на всю жидкость. В пробирке с раствором желатина реакция отрицательна, так как в желатине нет триптофана.
Работа 22 . Омыление жиров.
Выполнение работы:В небольшую фарфоровую чашку поместите 0,5 мл растительного масла и 4 капли 35 %-ного раствора NaOH. Стеклянной палочкой размешайте щелочь с маслом до получения однородной эмульсии. Затем поставьте чашку на электрическую плитку и при незначительном нагревании продолжайте помешивать, пока не получится однородная прозрачная слегка желтоватая жидкость. Затем добавьте 2 мл дистиллированной воды и вновь нагрейте, тщательно перемешивая до полного упаривания воды. Снимите чашку с электрической плитки. Получится кусочек твердого белого мыла.
Работа 23 . Открытие глицерина в жире
Выполнение работы:В пробирку наливают 2 - 3 капли жира, добавляют несколько кристалликов гидросульфата калия. Содержимое нагревают, образуется акролеин, который легко узнается по резкому удушливому запаху.
| акролеин |
Работа 25 . Определение непредельности жира
Выполнение работы:В пробирку наливают по 0,5 мл подсолнечного масла и прибавляют 1 мл 1% -ного раствора перманганата калия и 10%- ного раствора карбоната натрия. Содержимое пробирки встряхивают. Через некоторое время окраска раствора перманганата калия исчезает.
Работа 30. Реакция окисления глюкозы реактивом Гайнеса
(реакция Гайнеса)
Выполнение работы:в пробирку наливают 1 мл реактива Гайнеса и такой же объем 1%-ного раствора глюкозы. Верхний слой смеси нагревают до начала кипения. Он окрашивается сначала в желтый цвет (осадок Cu(OH)), а затем в красно – оранжевый, так как образуется осадок Cu2O.
Реакцию Гайнеса используют для доказательства наличия глюкозы в биологических жидкостях. Преимущество реакции - высокая чувствительность и исключение возможности образования черного осадка оксида меди (II).
Реакция Ниландера самая чувствительная на глюкозу в моче.
Работа 33. Реакция Селиванова на фруктозу
Выполнение работы:в пробирку наливают 0,5 мл 1 %-ного раствора фруктозы и 0,5 мл реактива Селиванова, содержащего соляную кислоту и резорцин. Содержимое пробирки кипятят 1 -2 минуты, жидкость окрашивается в вишнево-красный цвет.
СH2OH HC CH
С = O t 0, HCl O
НО-С-Н C C C – H + 3 H2O
Н-С-ОН
Н-С-ОН HOCH2 O
СН2ОН
фруктоза оксиметилфурфурол
HC CH OH
O HCl вишневое
C C C – H + окрашивание
OH
HOCH2 O
резорцин
Реакция используется для открытия фруктозы в моче детей при врожденном заболевании, называемом фруктозурией.
Работа 34. Реакция Биаля на пентозы (с орцином)
Выполнение работы:в пробирку наливают 1 мл реактива Биаля, содержащего орцин, соляную кислоту, FeCl3, и нагревают до кипения, затем добавляют 5-6 капель 1% -ного раствора арабинозы или другой пентозы. Через 2-3 минуты проявляется зеленое окрашивание (гексозы дают коричневое окрашивание).
H- С = O HC CH
H-С -OH t0 O
НО-С-Н HC C C – H + 3 H2O
HO-С-Н
СH2ОН O
L - арабиноза фурфурол
HC CH OH
O HCl зеленое
HC C C – H + FeCl3 окрашивание
H3C OH
O
орцин
(5-метилрезорцин)
Реакция используется для открытия пентоз в моче детей при наследственном заболевании пентозурией.
ДИСАХАРИДЫ. ПОЛИСАХАРИДЫ
Оборудование, материалы: 1%-ный раствор сахарозы, 1%-ный раствор лактозы, реактив Фелинга, реактив Селиванова, 10%-ный раствор серной кислоты, 10%-ный раствор гидроксида натрия, раствор Люголя, 1%-ный раствор крахмала, 1%-ный раствор гликогена, пробирки, пипетки, спиртовка.
Работа 36. Кислотный гидролиз сахарозы
Выполнение работы:впробирку наливают 1 мл 1%-ного раствора сахарозы и 1 мл 10%-ного раствора серной кислоты и осторожно кипятят 4-5 минут. Происходит расщепление сахарозы на α-глюкозу и β-фруктозу. Половину гидролизата отливают во вторую пробирку и добавляют к нему 1,5 мл 10%-ного раствора гидроксида натрия и 1 мл реактива Фелинга, нагревают. Выпадает осадок оксида меди (I) оранжево-красного цвета, так как глюкоза обладает восстанавливающими свойствами. Со второй половиной гидролизата проводят реакцию Селиванова на фруктозу; она должна быть положительной.
| фруктоза |
| глюкоза |
сахароза
Работа 37. Реакция Селиванова с сахарозой и лактозой
Выполнение работы:в одну пробирку наливают 1 мл 1%-ного раствора сахарозы, в другую — 1 мл 1%-ного раствора лактозы. В обе пробирки прибавляют по 1 мл реактива Селиванова и нагревают до начала кипения. В пробирке с сахарозой постепенно появляется вишневое окрашивание, а в пробирке с лактозой раствор остается неокрашенным.
Работа 39. Гидролиз фракции, содержащей нуклеопротеины
Выполнение работы:0,5 г пекарских дрожжей помещают в колбу на 100 мл, добавляют 10 мл 1 М раствора серной кислоты. Делают карандашом по стеклу отметку исходного объема смеси. Колбу закрывают пробкой с обратным холодильником и кипятят в течение 20 мин. После окончания гидролиза содержимое охлаждают до комнатной температуры, доводят водой до первоначального объема и фильтруют через бумажный фильтр. С полученным фильтратом проделывают качественные реакции на составлые части нуклеопротеинов.
Работа 40. Качественные реакции на открытие составных частей
Нуклеопротеинов
Схема полного гидролиза нуклеопротеинов
ЛИТЕРАТУРА
1. Бабков А.В., Попков В.А., Пузаков С.А. и др. Практикум по общей химии, биофизической химии, химии биогенных элементов. - М.: Высшая школа, 2006. - 239 с.
2. Жолнин А. В. Общая химия: учеб. / А. В. Жолнин; под ред. В.А.Попкова, А.В.Жолнина. - М. : ГЭОТАР- Медиа, 2012. - 400 с.
3. Слесарев В.И. Химия: Основа химии живого : Учебник для вузов. – 2-е изд., испр. и доп. – СПб: Химиздат, 2011. – 784 с.: ил.
4. Попков В.А., Пузаков С.А. Общая химия : Учебник. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. – 976 с.: ил.
5. Ершов Ю.А., Попков В.А., Берлянд А.С. и др. Общая химия. Биофизическая химия. Химия биогенных элементов : Учебн. для мед. спец. вузов – 8- е изд., - М: Высш.шк., 2010 г. – 560 с.
6. Тюкавкина Н.А., Бауков Ю.И. Биоорганическая химия; Учебник. – 4-е изд., стереотип. – М.; Дрофа, 2005. – 542, [2] с.: ил. – (Высшее образование: Современный учебник).
7. Биоорганическая химия. Руководство к практическим занятиям / Тюкавкина Н.А., Белобородов В.Л., Зурабян С.Э. – М.: Дрофа, 2010.