Визначення рiвня CD. CD4 ,CD5 ,CD8 ЛIМФОЦИТIВ У ПЕРИФЕРИЧНIЙ КРОВI. 1.Кров брали стерильно з лiктьовоi вени вранцi, до вжи- вання iжi. Лiмфоцити видiляли з гепаринiзованоi кровi цен- трифугуванням на градiснтi Фiкол-Вiрографiну густина 1,077 г мл . 2.1-0,1 млн. лiмфоцитiв в об смi 50 мкл. вносили в цен- трифужнi пробiрки i до клiтин додавали 5 мкл. моноклонально- го антитiла CD8 i iнкубували 30-45 хв. при 4 С. 3.Додавали 150 мкл. розчину Хенкса i центрифугували 5 хв. при g 200. 4.Вилучали супернатант.
Потiм вносили 50 мкл. розчину Хенкса, клiтини суспендували, додавали 150 мкл. розчину Хен- кса i центрифугували 5 хв. при g 200. 5.Вилучали супернатант.
До осаду вiдмитих клiтин дода- вали 50 мкл. F ab 2-Фрагментiв овечих антитiл до Ig мишi, помiчених ФIТЦ i розбавлиних 1 100. Для розведення викорис- товували фiзрозчин, забуферений фосфатом РВS , що мiстиь 0,5 желатину i 0,5 азиду натрiю.
Клiтини суспензували i iнкубували 30 хв. при 4 С. 6.Клiтини 2 рази вiдмивали як указано в п.п.3-4. 7.Пiсля остаточного видалення супернатанту клiтини ви- носили на предметне скельце i помiщали в пари формалiну для фiксацii на 10-1 хв. Мiченi клiтини аналiзували з допомогою мiкроскопу з люмiнiсцентною насадкою ЛН-30МС. Статистичну обробку матерiалiв проводили звикористанням методики Андрю- щенко. 2.6