Визначення рівня мітотичної активності мерістематичної тканини

Ознайомлення з фазами клітинного поділу проводиться на постійних препаратах корінців цибулі. Перед проведенням підрахунків потрібно навчитись розрізняти клітини, які знаходяться на різних фазах мітозу, від клітин, які не діляться, клітини зони поділу, від клітин інших зон за формою та розмірами.:

Препарат спочатку розглядають при малому збільшенні мікроскопу (об‘єктив 10).

На кінчику кореня добре помітний чохлик, який захищає конус наростання від ушкодження під час росту в ґрунті. Алі знаходиться конус наростання, або зона поділу клітин (приблизно 2 мм). Меристема складається з декількох шарів клітин прямокутної форми. За конусом наростання знаходиться зона розтягу, де клітини витягуються у довжину. А потім зона всасування з кореневими волосками.

Мітоз вивчають на меристематичних клітинах конусу наростання кореня. Після ознайомлення з коренем при малому збільшенні, препарат розглядають під об‘єктивом 40. Підрахунок клітин на різних фазах мітотичного циклу проводять у декількох полях зору таким чином, щоб загальна кількість досліджуваних клітин становила не менше 500 штук.

 

Клітини на різних стадіях мітотичного циклу характеризують наступним чином:

1) клітини у стадії інтерфази. Це клітини, які не діляться та мають чотирьохкутну форму і оточені темними, добре помітними оболонками. Вони містять округлі або овальні ядра з одним або двома ядерцями і забарвлені зерна хроматину;

2) клітини у стадії профази – в ранній профазі – в ядрі з'являються нитчасті структури, які скатані у вигляді щільного клубка; потім структури спіралізуються, коротшають і відособляються. У кінці профази оболонка ядра і ядерця зникають; помітні окремі хромосоми, що лежать в цитоплазмі;

3) клітини у стадії метафази – хромосоми розташовуються по екватору і мають вид товстих зігнутих паличок. В деяких клітинах хромосоми виглядають подвійними, тобто вони виглядають у вигляді пар хроматид;

4) клітини у стадії анафази – сестринські хромосоми розходяться до різних полюсів, завдяки скороченню ниток веретен, що тягнуть. На кожному полюсі буде стільки ж хромосом, скільки мала материнська клітина. На зрізі знайти пізні і ранні анафази, які відрізняються різною відстанню хромосом від екватора клітини;

5) клітини у стадії телофази – зникнення чіткого контуру хромосом і утворення яскраво забарвленого рихлого клубка. В клітинах з більш пізньою телофазою можна знайти нові ядра і перегородку, яка розділяє клітину на дві частини.

Оримані дані занести у таблицю 1.1:

 

Таблиця 1.1

 

Номер поля зору під мікроскопом	Кількість клітин в стані:
Профази (П)	Метафази (М)	Анафази (А)	Тілофази (Т)	Інтерфази (І)	Разом

І. Визначити мітотичний індекс за формулою:

 

(‰)

 

ІІ. Визначити відносну тривалість кожної фази мітозу (%) за формулами:

1) тривалість профази:

 

 

2) тривалість метафази:

3) тривалість анафази:

4) тривалість телофази:

5) тривалість інтерфази: