Дифференциально-диагностические среды. - раздел Биология, УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС ПО «МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ» 1. Пс Для Культивирования И Изучения Биохимических Свойств....
1. ПС для культивирования и изучения биохимических свойств.
1.1. Среды Эндо,Левина, Плоскирева. Используют как дифференциально-диагностические элективные среды для культивирования бактерий кишечной группы (содержит лактозу). Микроорганизмы, ферментирующие находящийся в этих средах молочный сахар (лактозу) образуют окрашенные колонии- лактозоположительные (колонии красного цвета с металлическим блеском или без блеска). Колонии микробов, не ферментирующие лактозу, бесцветные - лактозонегативные – нежно-розовые, прозрачные, пропускающие свет.
К 100 мл МПА (рН 7,6) при температуре 70°С стерильно добавляют 5 мл 20% раствора лактозы и смесь 0,5 мл насыщенного раствора основного фуксина с 1,25 мл свежеприготовленного раствора сульфата натрия.
1.2.Среды с крахмаломопределяют микроорганизмы, образующие амилазу. Об этом узнают, прибавив к культуре несколько капель раствора Люголя, - цвет среды не изменяется. Нерасщепленный крахмал дает с этим раствором синее окрашивание.
1.3.Молоко.При росте микроорганизмов, сбраживающих лактозу, свертывается.
2. Коммерческие наборы – для изучения биохимических свойств (определение набора ферментов микроорганизмов для их идентификации).
2.1. Микротесты - системы (МТС). Они представляют собой полистироловые пластины с лунками, в которых содержатся стерильные дифференциально-диагностические среды.
2.2.Системы индикаторные бумажные (СИБ) -дифференциально-диагностические среды на фильтровальной бумаге.
3. Для культивирования и дифференциации анаэробных микроорганизмов: среда Вильсон-Блера. Готовят из мясо-пептонного агара, к которому добавляют глюкозу, Na2S03, хлорид железо FeCl2. На этой среде возбудитель газовой гангрены образует почернение и разрыв агара. Рост происходит в глубине агара. При этом осуществляется восстановление Na2S03 в Na2S (сульфит натрия), который соединяясь с хлоридом железа, образует сульфат железа черного цвета. Разрыв питательной среды связан с газообразованием.
4. ПС для изучения сахаролитических свойств:
Среды Гисса с углеводами (глюкоза, лактоза, сахароза, арабиноза и другие) в которых выявляют ферментативную активности микроорганизмов. Под действием образующейся при расщеплении углевода кислоты индикатор изменяет окраску среды. Соломенно-желтого цвета среда при положительной реакции меняет цвет на красный или интенсивно розовый, поэтому эти среды названы «пестрый ряд». Микробы, не ферментирующие данный углевод, растут на среде, не изменяя ее цвета. Наличие газа устанавливают по образованию пузырьков в средах с агаром или по скоплению его в «поплавке» на жидких средах.
Пептон - 10 г, хлорид натрия - 5 г, углевод - 10 г, реактив Андреде (фуксин)- 10 мл, вода дистиллированная до 1000 мл, рН после стерилизации 7,2-7,4.
5. ПС для изучения протеолитических свойств:
Среды с желатином. В некоторых бактериях (холерный вибрион, стафилококк, сибиреязвенная палочка и т. д.) протеолитические ферменты выявляются путем разжижения желатины.
Среды с молоком. Микроорганизмы, расщепляющие казеин (молочный белок), вызывают пептонизацию молока - оно приобретает вид молочной сыворотки.
Среды с пептоном. При расщеплении пептонов могут выделяться индол, сероводород, аммиак. Их образования определяют с помощью индикаторных бумажек. Фильтровальную бумагу заранее пропитывают определенными растворами, высушивают, нарезают полосками и, после посева культуры на МПБ, помещают под пробку между нею и стенкой пробирки. После инкубации в термостате учитывают результат. Аммиак вызывает посинение лакмусовой бумажки; при выделении сероводорода на бумажке, пропитанной раствором, содержащим ацетат свинца, бикарбонат натрия, происходит образование сульфата свинца - бумажка чернеет; индол вызывает покраснение бумажки, пропитанной горячим насыщенным раствором щавелевой кислоты.
Работа № 2. Характер роста бактерий на питательных средах
(культуральные свойства)
Цель: изучить характер роста бактерий на плотной питательной среде - МПА.
Самостоятельная работа:описать культуральные свойства колоний,выросших на МПА, результаты внести в таблицу
ГБОУ ВПО ТюмГМА Минздрава России... Кафедра микробиологии... УЧЕБНО МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС...
Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ:
Дифференциально-диагностические среды.
Что будем делать с полученным материалом:
Если этот материал оказался полезным ля Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:
Принятые сокращения и условные обозначения
Аг - антиген
Ат - антитело
БАК - бактерицидная активность кожи
БАСК - бактерицидная активность сыворотки крови
БГКП - бактерии группы кишечная палочка
В
Структура бактериологической лаборатории
Работа на кафедре микробиологии и в бактериологической лаборатории требует соблюдения специальных правил, так как исследования проводятся с использованием культур патогенных микроорганизмов и зараз
Оборудование рабочего места бактериолога
На рабочем столе должно быть все необходимое для работы:
· микроскоп
· иммерсионное масло
· бактериологические петли
· спиртовка
· набо
Морфология грибов и методы их изучения
I. Грибы – эукариоты. Они имеют хорошо оформленное ядро, митохондрии и вакуоли. Грибная клетка содержит одно или несколько ядер. Клеточная стенка грибов состоит на 80-90% из полисахаридов (45% прих
Методы изучения
1.Микроскопический – изучение морфологических и тинкториальных свойств.
Препараты:
а) Нативные. Для приготовления препаратов
Окраска по Цилю-Нильсену.
Применяют для дифференциации кислотоустойчивых и некислотоустойчивых микроорганизмов. Кислотоустойчивость бактерий обусловлена повышенным содержанием в клеточной стенке и цитоплазме липидов,
Окраска по Ожешко
Метод основан на принципе окраски кислотоустойчивых бактерий. Отличие заключается в предварительной обработке микроорганизмов 0,5 % раствором соляной кислотой, что облегчает окраску спор карболовым
Самостоятельная работа во внеурочное время
1. Дайте определение:
а) морфологические свойства - __________________________________________________
____________________________________________________________________________
Работа№1. Актиномицеты. Методы выявления
Цель:изучить морфологию актиномицет (см. теоретическую справку)
Самостоятельная работа: зарисуйте и опишите строение актиномицетов. Объясн
Методы выявления актиномицет
По химическому составу оболочка актиномицетов близка к оболочке бактерий, поэтому они окрашиваются анилиновыми красителями. Обычно их окрашивают простыми методами или по Граму. Актиномицеты являютс
Работа№2. Спирохеты. Методы выявления
Цель:изучить морфологию спирохет: боррелий, лептоспир и трепонем (см. теоретическую справку).
Самостоятельная работа: зарисуйте и опишите строение спирохе
Методы выявления спирохет (трепонем, боррелий, лептоспир)
Оболочка спирохет тонкая, эластичная, содержит большое количество липопротеидов до 70 - 80% и тонкий фрагментированный слой пептидогликана. Обычными методами трепонемы не окрашиваются, так как при
Работа №3. Микоплазмы. Методы выявления
Цель:изучить морфологию микоплазм (см. теоретическую справку)
Самостоятельная работа: зарисуйте и опишите строение микоплазм. Какие методы применяются для
Методы выявления микоплазм
Микоплазмы –это прокариоты малых размеров, имеют только цитоплазматическую мембрану и не способны синтезировать пептидогликан. Это полиморфные микроорганизмы, по форме представляют
Хламидии (морфология, жизненный цикл хламидий).
Хламидии - мелкие, чувствительные к антибиотикам бактерии диаметром около 0,2-1,5 мкм, которые развиваются только внутри живых клеток («облигатные внутриклеточные паразиты») и вызывают широкий спек
Методы выявления хламидий
Хламидии обычно выявляются в клетках плоского, а не цилиндрического эпителия. Клетки с хламидиями располагаются группами по 4-6 штук; хроматин в них распределен причудливо, грубые его нагромождения
Работа№5. Морфология риккетсии и цикл развития
Цель:изучить морфологию риккетсий (см. теоретическую справку)
Самостоятельная работа:зарисовать и описать морфологию риккетсий. Какие мето
Методы выявления риккетсий
Риккетсии –грамотрицательные микроорганизмы малых размеров. Они занимают промежуточное положение между бактериями и вирусами. С бактериями они сходны по морфологии. Внутриклеточное
Работа №6. Вирусы. Методы выявления
Цель:изучить морфологические особенности вирусов.
Самостоятельная работа: Опишите строение вирусов. Перечислите основные морфологические с
Самостоятельная работа во внеурочное время
Используя лекционный материал, учебник, атлас и теоретическую справку охарактеризовать вирусы.
1. Заполните таблицу
ПРИНЦИПЫ КЛАССИФИКАЦИИ ВИРУСОВ
ЗАНЯТИЕ 1.1.4
Физиология микроорганизмов. Бактериологический метод диагностики
Цель занятий: изучить условия и методы культивирования микроорганизмов. Освоить бактериолог
Теоретическая справка
Работа № 1
Для культивирования бактерий применяют питательные среды. Они могут быть естественными (молоко, морковь, картофель), искусственными (готовят специально). Питател
Теоретическая справка
Работа № 2
Микроорганизмам как всему живому присущи три основные физиологические функции: питание, дыхание и размножение.
Питание необходимо для синтеза в клетке всех органических
Теоретическая справка
Работа № 3
Дыхание микроорганизмов – биологическое окисление субстрата с выделением необходимой для метаболизма энергии. По типу дыхания микроорганизмы делятся на 3 основны
Работа № 4. Техника посева на питательные среды
Цель:ознакомиться с техникой посева на жидкие и плотные питательные среды и указать значение метода (см. теоретическую справку).
Самостоятельная работа:ра
Метод Дригальского
Стерильной пипеткой материал помещают на поверхность МПА в чашку Петри
&
Б) Каталазная активность аэробов
Цель:изучить каталазную активность микроорганизмов; определить тип дыхания исследуемой культуры (см. теоретическую справку)
Самостоятельная работа:определ
Теоретическая справка
Работа № 5
Б) Каталазная активность. Каталаза - это фермент, катализирующий реакцию разложения перекиси водорода с образованием воды и кислорода. Ка
Теоретическая справка
Бактериологический метод является основным при диагностике инфекционных заболеваний. Его сущность заключается в определении вида возбудителя инфекции, следовательно, можно поставить
ЗАНЯТИЕ 1.1.5
Физиология микробов. Бактериологический метод диагностики (продолжение). Методы культивирования облигатных внутриклеточных паразитов.
Цель занятия:
изучить методы
Работа №2. Методы создания анаэробных условий
Цель: изучить методы создания анаэробных условий (см.теоретическую справку)
Самостоятельная работа: рассмотреть предложенные питательные среды и оборудова
Методы создания анаэробных условий
1) Физические методы. Методы основаны на выращивании микроорганизмов в среде без воздуха
•Посев в среды, содержащие редуцирующие и легко окисляемые вещества:
В качестве ред
К работе № 3
Культивирование вирусов
Для культивирования вирусов используют:
1) Куриные эмбрионы. Куриный эмбрион - удобная модель для культивирования вирусов с целью получени
Новости и инфо для студентов