Образец препарата вносят в среду № 8 (1:10) и инкубируют 24-48 ч при температуре 30-35°С. После инкубирования пересевают на среды № 9 и № 10 в чашки Петри. При отсутствии роста на средах № 9 и № 10 после их инкубирования 24-48 ч делают заключение об отсутствии этих микроорганизмов в препарате.
При наличии на среде № 9 подозрительных на Pseudomonas aeruginosa колоний зеленоватых или серовато-зеленоватых, прозрачных, плоских, с изменением цвета среды в голубовато-зеленоватый и обладающих специфическим запахом, проводят микроскопирование. При обнаружении грамотрицательных палочек проверяют наличие цитохромокси- дазы.
Если в препарате обнаружены грамотрицательные неспорообразу- ющие палочки, дающие положительную реакцию на цитохромоксидазу и образующие сине-зеленый пигмент, значит в препарате присутствуют бактерии Pseudomonas aeruginosa и препарат к применению не пригоден.
При наличии на среде № 10 золотисто-желтых колоний, образованных грамположительными кокками и окруженных желтыми зонами, делают вывод о ферментации маннита. Чистую культуру стафилококка проверяют на наличие фермента плазмокоагулазы.
Если в препарате обнаружены грамположительные кокки, ферментирующие маннит и дающие положительную реакцию плазмокоагуляции, значит препарат контаминирован Staphylococcus aureus и к применению не пригоден.
Методы выявления антимикробной активности лекарственных препаратов
Определение антимикробной активности проводят однократно для всей номенклатуры препаратов, выпускаемых на конкретном производстве. Некоторые лекарственные препараты обладают выраженным антимикробным действием в связи с их целевым назначением (для лечения инфекционных заболеваний). К ним относят: антибиотики, препараты, в состав которых введены антибиотики и химиотерапевтические препараты: сульфаниламиды, нитрофурановые, производные 8-оксихинолина, соли тяжелых металлов, производные фторхинолона и некоторые другие. Кроме того существует ряд лекарственных средств, способных оказывать неспецифическое антимикробное действие: кислоты (например, ацетилсалициловая кислота), щелочи, спирты, окислители, препараты, содержащие серу, фитонциды, эфирные масла, витамины, анальгетики и др.
В основе метода определения антимикробного действия лежит сравнение интенсивности роста тест-микроорганизмов в присутствии и в отсутствие препарата. В качестве тест-микроорганизмов используют определенные штаммы Bacillus cereus, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans и Aspergillus niger. Заключение об отсутствии антимикробного действия делают при наблюдении одинаковой интенсивности роста всех культур в опытном и контрольном посевах.