Вирусный гепатит В

Гепатит В — это форма гепатита наиболее опасная по своим последствиям среди всех известных форм вирусных гепатитов.

Его возбудителем является вирус гепатита В (HBV).Впервые антиген вируса гепатита В был обнаружен Б. Блюмбергом в 1964 г. в сыворотке крови австралийского аборигена, а сам возбудитель был обнаружен в 1970г Д. Дейном с соавторами и получил название частиц Дейна.

Вирус гепатита В принадлежит к семейству Hepadnoviridae — гепатотропных ДНК-содержащих вирусов, имеет сферическую форму и диаметр 40-45 нм.

Под электронным микроскопом в вирионах отчетливо видны сердцевина (кор) — нуклеокапсид вируса и наружная липопротеиновая оболочка — суперкапсид, в составе которого различают 3 белка: главный (основной) S-белок (92%), большой (длинный) L-белок (1%) и средний М-белок (4%).

В составе вириона есть три основных антигена. Для них в 1974 г. были введены следующие обозначения:

· HBsAg — поверхностный (superficial) антиген.

· HBcAg — сердцевинный антиген (соr-антиген).

· HBeAg — антиген присутствует в составе вириона и циркулирует в крови в свободном виде или в виде комплекса с антителом анти-HBe. Он выделяется в кровь из гепатоцитов при активной репликации HBV.

Поверхностный антиген — HBsAg — существует в виде трех морфологически различных вариантов: представляет суперкапсид цельного вириона; в большом количестве в плазме крови встречается в виде частиц диаметром 20 нм, имеющих сферическую форму; там же в виде нитей длиной 230 нм. Химически они идентичны.

Геном представлен двунитевой кольцевидной ДНК, однако ее «плюс-нить» на 20-50% короче «минус» - нити. В ходе проникновения в клетку происходит удлинение (достраивание) короткой («плюс») цепи ДНК. В сердцевине вириона находится кроме геномной ДНК вирусная ДНК-зависимая ДНК-полимераза.

«Минус»-нить ДНК HBV содержит всего четыре гена (S, С, Р и X), но они организованы очень компактно.

Белки, кодируемые S-геном (HBsAg), обладают высокой иммуногенностью, поэтому антитела против этих антигенов играют важную роль в формировании иммунитета против гепатита В.

Ген С кодирует синтез капсидных белков (HBcAg и HBeAg). HBeAg — важный для репликации вируса и для диагностики антиген. Он не входит в состав вириона, а сразу после трансляции выводится из клетки, выделяется в кровь, где его содержание коррелирует с активностью вирусной репликации. Ген Р — самый большой, кодирует ферменты, необходимые для репликации вируса. Ген Х кодирует белки, регулирующие экспрессию (выражение) всех вирусных генов, в частности белок с молекулярной массой 17 кД, который является трансактиватором транскрипции генов. С этим белком связывают трансформирующее действие вируса на гепатоциты.

В составе вируса гепатита В нет онкогена, однако установлено, что, внедряясь в клеточную хромосому, вирусная ДНК может индуцировать в них различные генетические перестройки — деления, транслокации, амплификации, которые и могут стать причиной развития рака печени — одного из самых тяжких последствий вирусного гепатита В.

Репродукция гепаднавирусов происходит несколько необычным образом. В частности, репликация геномной ДНК происходит через промежуточное звено — РНК, т. е. с механизмом обратной транскрипции.

Вирус обнаруживается в различных секретах и экскретах инфицированного:

· в слюне, носоглоточных выделениях,

· испражнениях,

· слезной жидкости,

· в сперме,

· менструальной крови и прочих.

Заражение вирусом гепатита В практически возможно разными способами.Этому способствуют следующие факторы:

· присутствие вируса в значимых концентрациях практически во всех биологических жидкостях;

· высокая устойчивость вируса во внешней среде;

· высокая чувствительность человека к вирусу. Для возникновения инфекции достаточно попадания 0,0001 мл позитивной плазмы;

· высокая концентрация инфекционного вируса в крови инфицированного.

Патогенез и клиника

Вирус гематогенным путем заносится непосредственно в печень. В патогенезе гепатита важную роль играют аутоиммунные гуморальные и клеточные реакции. Развивающийся хронический гепатит и цирроз печени можно рассматривать как аутоиммунное заболевание.

Инкубационный период длится от 45 до 180 дней, в среднем составляет 60-90 дней.

Приблизительно 10-15% инфицированных с типичной желтушной инфекцией дают острый гепатит. Летальность при острых формах гепатита составляет 0,1-1%.

HBV-перситенция у 70-90% людей протекает как бессимптомное носительство, в редких случаях завершающееся развитием гепатомы.

У детей гепатит В протекает в более легкой форме и часто без развития желтухи, у детей младшего возраста — преимущественно бессимптомно.

Постинфекционный иммунитет длительный, обусловлен вируснейтрализующими антителами (анти-HBsAg) при отсутствии в крови поверхностного антигена.

Нередко наблюдается скрытая иммунизация вследствие повторного контакта с HBV, которая является причиной широкого распространения иммунитета к вирусу среди населения.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования: кровь, биоптаты печени.

1. Выявление антигенов вируса гепатита В

Выявление HBsAg указывает на инфицированность ВГВ. В большинстве случаев HBsAg исчезает в течении 3-5недель от начала заболевания. В 5-10% случаев HBsAg определяется в течение более 6 месяцев (хроническая инфекция, носительство).

Наличие HBeAg указывает:

· на репликацию вируса,

· образование дочерних вирионов,

· присутствие в крови зрелого инфекционного вируса (частиц Дэйна),

· на высокую инфекциозность крови и эпидопасность пациентов на этой стадии инфекции.

HBeAg появляется позднее HBsAg, исчезает раньше HBsAg. HBeAg выявляют при ОГВ в течение 6-8 недель. Более длительная его персистенция указывает на хронизацию инфекции.

HBcAg определяется в гепатоцитах методом РИФ с антисывороткой к нему. HBcAg не выявляется в сыворотке крови.

2. Определение антител к антигенам вируса гепатита В: а-НВс, а-НВе, a-HBs.

В начале появляются а-НВс, затем а-НВе и, наконец, a-HBs. А-НВс класса М могут быть единственным маркером. Детекция а-НВс (М) в период желтухи, повышения уровня ферментов (АлАТ, АсАТ), билирубина и других нарушений функции печени позволяет ставить лабораторный диагноз ОГВ. A-HBc класса G обнаруживаются у больных ОГВ на поздних стадиях, у хронических больных, у носителей HBsAg, у реконвалесцентов. Этот маркер сохраняется пожизненно и используется для отбора доноров крови в некоторых странах с низким уровнем носительства HBsAg среди населения.

Анти-НВе антитела.

Антитела к HBe обнаруживаются после появления анти-НВс и исчезают в течение года у 50% пациентов.

Aнти-HBs антитела.

Aнти-HBs антитела появляются через 3-4 месяца после начала заболевания, сохраняются в течение 10 лет и более. Поскольку эти антитела являются вируснейтрализующими, их исчезновение через 10 лет у части пациентов, перенесших инфекцию, означает, что постинфекционный иммунитет при гепатитах типа В не всегда является пожизненным. Не исключена возможность развития повторных случаев В-инфекции у одного и того же человека.

Определение ДНК вируса в ПЦР. ДНК вируса выявляется в последние недели инкубационного периода и в течение от 3 недель до 3 месяцев острой стадии инфекции. Наличие вирусной ДНК в крови указывает на репликацию вируса.

Детекция вирионов (частиц Дэйна), трубчатых и сферических форм HBsAg в крови с помощью метода электронной микроскопии (негативного контрастирования) используется в научных исследованиях.

Специфическая профилактика

По рекомендации ВОЗ прививки против гепатита В являются обязательными и должны проводиться на первом году жизни. Для вакцинации используются генно-инженерные вакцины «Энжерикс В», «Рекомбивакс В». Продолжительность поствакцинального иммунитета не менее 5-6 лет. Полный курс прививки состоит из 3 инъекций: 1 доза — сразу после рождения; II доза — в 1 мес.; III доза — в 5 мес.

Гамма-глобулин, содержащий антитела против HBV, применяют для экстренной пассивной иммунопрофилактики лицам, имевшим контакт с больным гепатитом В.

Дельта-гепатит (гепатит D)

В 1977 г. М.Ризетто с сотрудниками обнаружили еще один инфекционный агент, названный ими дельта-антигеном, способный вызывать развитие тяжелой формы гепатита. Дельта-вирус (HDV) был обнаружен с помощью метода иммунофлуоресценции в ядрах гепатоцитов людей, страдающих хроническим гепатитом.

Это единственный известный вирус, у которого геном представлен кольцевидной РНК. По структуре генома (кольцевидная молекула РНК) вирус дельта-гепатита напоминает вироиды. В настоящее время классификации не поддается.

Вирус дефектный (дельта-агент), мелкий сферический (36-42 нм). В составе HDV имеется два белка.

Дельта-вирус является дефектным вирусом, неспособным к самостоятельному размножению, вирус-помощник для него — HBV,суперкапсид HDV образован HBsAg HBV.

HDV оказывает цитопатическое прямое действие на гепатоцит. Его передача происходит парентерально (с кровью или ее препаратами) и от матери к плоду. Заболеваемость гепатитом D коррелирует с заболеваемостью гепатитом В.

Лабораторная диагностика

Антиген вируса определяется в сыворотке крови при его демаскировке после обработки детергентами, солюбилизирующей HBsAg на поверхности HDV.

Определение антител к HDV— а-HDV (М) и а-HDV (G).

Определение РНК HDV в ПЦР: положительный результат исследования крови указывает на наличие инфекции.

Специфическая профилактика

Вакцинация против гепатита В является средством профилактики дельта-гепатита.