Генная инженерия в медицинской микробиологии

Продукты, получаемые генно-инженерным способом с помощью рекомбинантных штаммов бактерий:

· вакцины;

· гормоны;

· интерфероны;

· цитокины.

Генетические методы, применяемые в микробиологической диагностике:

· процентное содержание Г+Ц бактериальном геноме;

· метод молекулярной гибридизации;

· полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Полимеразная цепная реакция. Цели:

· обнаружение в патологическом материале конкретного вида микроорганизма без выделения чистой культуры;

· идентификация микроорганизмов;

· генотипирование микроорганизмов.

Этапы проведения ПЦР:

· выделение ДНК из патологического материала;

· добавление праймеров (участки ДНК, комплементарные 3’-концам искомого гена), добавление ДНК-полимеразы и нуклеотидов;

· нагревание;

· расплетение ДНК на две нити;

· охлаждение;

· связывание праймеров с комплементарными участками искомого гена;

· нуклеотиды присоединяются к 3’-концам праймеров, ДНК-полимераза достраивает вторые цепочки ДНК;

· повторение циклов (30-50) – накопление (амплификация) искомого гена;

· резкое нарастание (двукратное после каждого цикла) количества искомого гена;

· определение продуктов ПЦР с помощью электрофореза.