Холера — острая антропонозная инфекционная болезнь, протекающая с развитием дегидратации и деминерализации в результате рвоты и водянистой диареи.
Таксономия и классификация
Царство: Procaryotae; Отдел: Gracilicutes; Семейство: Vibrionaceae; Роды: Vibrio, Aeromonos, Plesiomonos, Photobacterium.
Типовой род Vibrio, включает около 30 видов, из них 11 патогенных.
Патогенные виды вызывают холеру (вид: Vibrio cholerae,биовары cholerae и eltor); их относят к О1 серогруппе (О139) и нехолерные вибрионы (не О1 серогруппа) вызывают острые кишечные заболевания с явлениями гастроэнтерита, иногда заболевания с некишечной локализацией.
Морфология и тинкториальные свойства
Слегка изогнутые или прямые палочки, размером 1,5-3х0,5-0,8 мкм. Спор и капсул не образуют. Обладают активной подвижностью — монотрихи. В раздавленных каплях совершают «полет ласточки», в окрашенных мазках располагаются в виде «паутинки» или «стаек рыб». Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями, грамотрицательны.
Биологические свойства
Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы. Метаболизм бродильный и окислительный, лучше размножаются в аэробных условиях.
Растут на щелочных средах с оптимальным pH 7,8-8,6 (алкалифилы).
Среды для культивирования: голодные, простые, элективные, дифференциально-элективные и транспортировочные (все щелочной реакции).
1. Элективные — 1% щелочная вода — нежная голубая пленка; щелочной МПА — прозрачные уплощенные, мелкие голубоватые колонии, напоминающие капельки росы.
2. Дифференциально-элективные:
1) TCBS (тиосульфит-цитрат бромтимоловый сахарозный агар) — уплощенные, крупные желтые колонии;
2)TTGA (таурохолат-теллурит- желатиновый агар) — полупрозрачные сероватые колонии;
3) Среда Аронсона (прототип среды Эндо, но с сахарозой вместо лактозы) — блестящие с красным центром и бледно-розовым ободком колонии.
3. Транспортные среды:
1) 1% щелочная ПВ с теллуритом калия.
Ферментативная активность
Оксидазоположительны, каталазоположительны. Ферментируют углеводы короткого пестрого ряда до кислоты. Большинство штаммов не ферментирует лактозу. Разжижают желатин, восстанавливают нитраты в нитриты, образуют индол, расщепляют крахмал, H2S-отрицательны.
Антигены
Выделяют общий термолабильный Н- и термостабильный О-антигены. По стуктуре О-антигена вибрионы подразделяются на 139 серогрупп (число их увеличивается).
Оба биовара холерных вибрионов — классический и Эль-Тор — относятся к О1 серогруппе. О-антиген О1-серогруппы неоднороден, состоит из трех фракций: A, B, C. Сочетание этих фракций образует серовары: Огава (АВ), Инаба (АС), Гикошима (АВС).
Для серотипирования используют О-сыворотки, OR-сыворотки и сыворотки — АВ (Огава) и АС (Инаба). Выделенный в 1993 г. холерный вибрион по антигенной структуре отнесен к О139-серогруппе, не агглютинируется О1-сывороткой.
Вибрионы, не агглютинирующиеся О1-сывороткой, обозначаются как неагглютинабельные — НАГи. Сопоставление V. cholerae и холероподобных (НАГ) вибрионов более чем по 70 признакам выявило их сходство на 90%, а степень гомологии ДНК составляет 70-100%.
В связи с этим холероподобные вибрионы объединены в один вид с холерным вибрионом и отличаются от него лишь по антигенной структуре; их обозначают как вибрионы не О1-серогруппы вида V. cholerae.
Факторы патогенности:
· подвижность;
· хемотаксис;
· факторы адгезии и колонизации;
· ферменты агрессивности (нейраминидаза, гиалуронидаза, лецитиназа, муциназа и др.);
· токсичность — эндотоксин;
· токсигенность — экзотоксин-холероген и энтеротоксины типов LT, ST, стимулирующие аденилат- или гуанилатциклазные системы.
Эпидемиология, патогенез, клиника заболевания (особенности)
Холера — особо опасная, антропонозная, кишечная инфекция с фекально-оральным механизмом передачи, характеризующаяся явлениями гастроэнтерита, резким нарушением водно-солевого обмена и тяжелой интоксикацией.
Особенности заболевания:
1) крайне тяжелое течение: ООИ, карантинная инфекция;
2) охват заболеванием большого количества людей за короткий период, быстрое распространение на обширные территории — принимает характер пандемий;
3) высокий процент вибрионосительства в очаге инфекции.
Источник инфекции — вибрионоситель, больной человек, возможно абиотическая среда. Механизм передачи — фекально-оральный; пути — водный, пищевой, бытовой.
Циркуляция возбудителя: человек à водоемы à человек.
Патогенез (особенности): фекально-оральный путь поступления вибриона в организм (большие количества) à желудок (возможная гибель в кислой среде) à тонкий кишечник (размножение, адгезия, колонизация слизистых тонкой кишки) à продукция экзотоксина-холерогена à воздействие на аденилатциклазную систему à профузная диарея и рвота à обезвоживание à интоксикация.
Патогенетические стадии заболевания: энтерит à гастроэнтерит à холерный алгид (от греч. algos — холод). Характерным признаком холерного алгида является снижение температуры тела до 34°С. В 17% случаев холерный алгид заканчивается смертью больного.
Лабораторная диагностика
Исследуемый материал: испражнения, рвотные массы, желчь.
Классическое исследование:
1 этап.
1. Микроскопия мазков из патологического материала (окраска по Граму, фуксином, и препарата «раздавленная» капля).
2. Посев материала на среду обогащения — 1% пептонную воду.
3. Посев материала на щелочной МПА и дифференциально-элективные среды (TCBS, TTGA и др.).
2 этап (через 6 часов).
1. Учет характера роста на первой пептонной воде (нежная голубая пленка).
2. Микроскопия мазков из пленки, окраска по Граму, фуксином и на подвижность.
3. Пересев на вторую пептонную воду для дальнейшего обогащения.
4. Пересев из первой пептонной воды на щелочной агар и среду TCBS.
3 этап (через 12 часов).
1. Учет роста на второй пептонной воде (аналогично первой).
2. Изучение характера роста на пластинчатых питательных средах:
· микроскопия окрашенных по Граму и фуксином мазков из желтых колоний на среде TCBS и прозрачных на щелочном МПА;
· определение подвижности в препаратах «раздавленная» капля;
· постановка РА на стекле с О1, Инаба- , Огава- и RO-сыворотками.
3. Пересев агглютинабельных колоний на среду Клиглера.
На этом этапе может быть дан предварительный ответ.
4 этап (через 18 часов).
1. Учет изменения лактозо-сахарозной среды.
2. Идентификация выделенной культуры:
· развернутая реакция агглютинации с холерными сыворотками: О1, Инаба, Огава, RO;
· определение чувствительности к холерным диагностическим бактериофагам;
· определение принадлежности к биохимической группе Хейберга;
· определение биовара;
· определение спектра антибиотикорезистентности.
Выдача окончательного ответа.
Ускоренное исследование предусматривает обнаружение микроорганизма, холерогена или фрагмента хромосомы, несущего оперон холерогена непосредственно в патологическом материале или после подращивания его в пептонной воде методами ПЦР, РИФ, ИФА, РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом и др.
Серологическая диагностика.
Носит ретроспективный характер. РА, РНГА.
Иммунитет
Постинфекционный иммунитет длительный, антимикробный и антитоксический. Повторные заболевания наблюдаются редко.
Специфическая профилактика
Для создания искусственного иммунитета предложены следующие типы вакцин:
1. Копрускулярная убитая вакцина;
2. Холероген-анатоксин.
3. Бивалентная вакцина, состоящая из анатоксина и соматических антигенов, серотипов Инаба и Огава.
4. Живая пероральная вакцина.
В очагах холеры проводится экстренная профилактика тетрациклином.
Лечение
1. Восполнение потерь жидкости и электролитов.
2. Антибиотикотерапия: препараты тетрациклинового ряда, левомицетин.