рефераты конспекты курсовые дипломные лекции шпоры

Реферат Курсовая Конспект

Дифференциальные признаки, отличающие C. diphtheriae от дифтероидов

Дифференциальные признаки, отличающие C. diphtheriae от дифтероидов - раздел Биология, КУРС ЛЕКЦИЙ Пособие может быть использовано для закрепления материала, изученного в курсе микробиологии, вирусологии, иммунологии Виды Корине- Бактерий Глю­Коза ...

Виды корине- бактерий глю­коза ферме маль­тоза нтация саха­роза крах­мал уреаза (проба Закса) цистиназа (проба Пизу) гемо­лиз токсино-образо­вание
C. diphtheriae К+ К+ - +/- - + +/- +/-
C. xerosis К+ К+ К+ - - - - -
C. pseudo-diphtheriticum - - - - + - - -

Антигенная структура

К-антиген, О-антиген. Недостатком метода серотипирования являются частые реакции спонтанной агглютинации или полиагглютинабельность, в том числе и у нетоксигенных штаммов.

Эпидемиология, патогенез и клиника заболевания (особенности) Источник инфекции — больной человек, носитель. Чаще болеют дети, однако в последнее время наблюдался рост заболеваемости и среди взрослых.

Механизм передачи — воздушно-капельный, реже контактный. Патогенез (особенности): локализация микроорганизма у входных ворот инфекции — размножение — выделение экзотоксина — токсемия — некроз клеток надпочечников, миокарда, нервных клеток. Существуют токсигенные и нетоксигенные штаммы C. diphtheriae. Экзотоксин синтезируется лизогенными культурами в виде неактивного предшественника. Активация происходит под действием собственной протеазы, которая разрезает его на 2 пептида А и В. Пептид В выполняет акцепторную функцию, пепдит А реализует биологическую активность токсина.

Выявление токсина — методы:

• заражение клеточных культур (цитопатическое действие);

• ИФА с меченым антитоксином;

• реакция преципитации по Оухтерлони.

Клинические формы: дифтерия зева, гортани, трахеи, носа, уха, половых органов и др. Возможно микробоносительство.

Наиболее часты формы дифтерия зева, которая может протекать как локализованная, распространенная, токсическая и гипертоксическая формы.

Лабораторная диагностика Цели:

• диагностика острых воспалительных процессов зева, носа, носоглотки;

• по эпидпоказаниям на микробоносительство;

• лиц, впервые поступивших в детские дома, ясли, сады, школы-интернаты на выявление микробоносителей.

Исследуемый материал: слизь из зева, носоглотки, других очагов поражения (берется ватным тампоном).

I. Бактериоскопический метод.

Микроскопия мазков, окрашенных по Леффлеру, Нейссеру,

люминесцентная микроскопия. При люминесцентной микроскопии для

зерен волютина характерно коричнево-красное свечение.

Дифтероиды — нормальные обитатели слизистых оболочек,

морфологически сходные с возбудителями дифтерии.

Отличие дифтероидов от C. diphtheriae:

• дифтероиды более грубые палочки;

• дифтероиды имеют большее количество волютиновых зерен, расположенных не полярно, а по всему телу;

• в мазках дифтероиды располагаются не под углом, а параллельными рядами — «частоколом».

II. Бактериологический метод.
Этапы метода:

1. Посев на неселективные (роста нет); селективные сывороточные среды (рост в виде «шагреневой кожи»); дифференциально-диагностические среды: Клауберга (серо-черные колонии R- и S-типа); Бучина (темносиние колонии); Тинсдаля-Садыковой (колонии с коричневым ободком).

2. Идентификация выделенной чистой культуры, определение биовара.

3. Определение токсигенности.


Постановка реакции преципитации в агаровом геле - при встречной диффузии в геле токсина и антитоксина в месте их взаимодействия образуется четкая линия преципитации.

Иммунитет

Антитоксический и антимикробный. Напряженность антитоксического иммунитета ранее определялась в реакции Шика (внутрикожное введением дифтерийного токсина — 1/40 Dlm для морской свинки). При наличии иммунитета проба Шика отрицательная, при отсутствии — местная воспалительная реакция. В настоящее время для определения титра антитоксических антител используются РНГА и ИФА. Специфическая профилактика

Активная иммунизация проводится вакциной АКДС или АДС (АДС-М) . Дифтерийный компонент — анатоксин. Вакцинация плановая в 3, 4 и 5 месяцев. Ревакцинации в 18 месяцев, в 6, 11 и 16 лет, а в последующем каждые 10 лет до 66 лет.

Лечение

Серотерапия, антибиотики. Серотерапия дифтерии эффективна только в ранний период болезни. Проводится противодифтерийной антитоксической сывороткой.


Лекция 19

Анаэробные бактерии

 

Анаэробные бактерии - это сборная группа микроорганизмов разных таксономических групп, объединенная по одному признаку - по типу дыхания.

К анаэробным бактериям относятся:

1. Гр+ спорообразующие палочки — род Clostridium;

2. Гр- неспорообразующие бактерии — род Bacteroides и род Fusobacterium;

3. Гр+ неспорообразующие палочки родов Propionobacterium и Eubacterium;

4. Гр- неспорообразующие шаровидные бактерии — род Veillonella

и др.;

5. Семейство Spirillaceae род Campilobacter;

6. Семейство Streptococcaceae (энтерококки);

7. Некоторые актиномицеты (Actinomyces israelii);

8. Некоторые спирохеты.

 

КЛОСТРИДИИ

Бактерии рода Clostridium представляют собой крупные Гр+ палочки, имеющие терминальную, субтерминальную или центральную спору; диаметр споры превышает диаметр клетки, поэтому палочка со спорой имеет сходство с веретеном, отсюда и название рода («clostrum» — веретено).

Естественной средой их обитания служит кишечник травоядных животных и человека, а также почва, куда они поступают с испражнениями и могут там длительно сохраняться и размножаться при благоприятных условиях. Принимают участие в круговороте веществ в природе. C. perfringens является санитарно-показательным микроорганизмом, используется для оценки фекального загрязнения окружающей среды (perfringens - титр и индекс в почве). Многие виды клостридий при определенных условиях продуцируют сильные экзотоксины (основной фактор патогенности) и вызывают инфекции - клостридиозы.

 

Таксономия

Царство Procaryota, отдел Firmicutes, семейство Bacillaceae, род Clostridium Виды: C. tetani — возбудитель столбняка

C. botulinum — возбудитель ботулизма

C. perfringens, C. novyi, C. septicum, C. histolyticum (возбудители газовой гангрены)

C. difficile — вызывает псевдомембранозный колит

Классификация патогенных клостридий основана на следующих принципах:

1. По морфологии (по форме и расположению спор) выделяют 3
группы:

• палочки с круглой терминально расположенной спорой — в виде барабанной палочки C. tetani;

• палочки с овальной субтерминально расположенной спорой — в виде теннисной ракетки C. botulinum;

• с овальной субтерминально или центрально расположенной спорой

— в виде веретена — у возбудителей газовой гангрены.

2. По биохимической активности — 3 группы анаэробов:

• превалируют сахаролитические свойства - C. perfringens, C. novyi, C. septicum;

• преобладают протеолитические свойства - C. histolyticum, C. botulinum;

• биохимически инертный микроорганизм - у него практически отсутствуют гликозидазные и слабо выражены протеолитические свойства — C. tetani.

3. По характеру патологических процессов — 3 группы
клостридиальных инфекций:

1) энтеральные клостридиозы — это ПТИ и пищевые интоксикации:

• ботулизм - возбудитель C. botulinum;

• клостридиальный гастроэнтерит — C. perfringens (основные биовары

- A, C, D - вызывают заболевание у человека);

• клостридиальный энтероколит — C. perfringens, биовары A и F; заболевание встречается чаще среди новорожденных недоношенных, с малой массой тела; как ВБИ; наблюдается вздутие живота, кровянистый стул, перфорация кишечника, сепсис;

• псевдомембранозный колит — возбудитель C. difficile, продуцирует токсины:

- токсин А (энтеротоксин) — вызывает активацию гуанилатциклазы и нарушение транспорта электролитов в кишечнике, возникновение диареи;

- токсин В (цитотоксин) — нарушает функции мембран, ингибирует синтез белка. Заболевание часто возникает как следствие нерациональной антибиотикотерапии, особенно на фоне приема антибиотиков широкого спектра действия.

2) посттравматические и травматические клостридиозы (или раневые
инфекции):

• столбняк — C. tetani

• клостридиальная анаэробная инфекция (газовая гангрена) — возбудители C. perfringens, C. novyi, C. septicum, C. histolyticum;

3) генерализованные инфекции: сепсис, септицемия, целлюлиты.

 

Столбняк

Столбняк (tetanus) — раневая инфекция, вызываемая C. tetani, характеризующаяся поражением нервной системы, приступами тонических и клонических судорог.

Морфологические свойства.

Клостридии столбняка имеют форму палочек длиной 4-5 мкм, диаметр 0,5-1 мкм; образуют терминально расположенные круглые споры, придающие возбудителю вид барабанной палочки, капсулы не образует, перитрихи, Гр+.

Культуральные свойства.

Хемоорганотроф, строгий анаэроб, оптимальная температура роста 37°С. Для создания анаэробных условий используется анаэростат, газовые пакеты и другие методы.

Растет на всех питательных средах, которые используют для культивирования анаэробов:

• жидкие питательные среды — среда Китта-Тароцци, молоко по Тукаеву, тиогликолевая (рост с равномерным помутнением);

• плотные питательные среды — кровяной сахарный агар Цейсслера (дают округлые, плоские, с неровными краями, полупрозрачные сероватые колонии с шероховатой поверхностью, нередко в виде переплетающихся нитей, с зоной гемолиза вокруг; среда Вильсона-Блера.

• в столбике агара C. tetani образует колонии в виде пушинок. Биохимическая активность

Не расщепляет углеводов; обладает слабыми протеолитическими свойствами, медленно гидролизует желатин и свертывает молоко, восстанавливает нитраты в нитриты. Факторы патогенности

Главным фактором патогенности C. tetani, определяющим патогенез и клинику столбняка, является экзотоксин - состоит из двух фракций: тетаноспазмин и тетанолизин (тетаногемолизин).

Тетаноспазмин - влияет на процесс передачи нервных импульсов в головном и спинном мозге (тормозит освобождение таких медиаторов, как ацетилхолин, норадреналин, ГАМК), что ведет к спастическому сокращению поперечно-полосатых мышц, развитию тонических и клонических судорог.

Тетанолизин - вызывает гемолиз эритроцитов, подавляет фагоцитоз, что способствует распространению возбудителя в организме и продукции им токсинов.

Устойчивость.

Вегетативные формы C. tetani не обладают особой устойчивостью и при кипячении разрушаются в течение 5 мин. Споры отличаются исключительно высокой устойчивостью к различным физическим и химическим воздействиям.

Эпидемиология

Возбудитель столбняка обнаруживается в кишечнике животных и человека, откуда с испражнениями попадает в почву, где в виде спор может сохраняться годами, десятилетиями.

Механизм заражения, передачи - чрескожный, контактный. Инфекция возникает при наличии раневой травмы: уколы, порезы, ожоги, операционные раны, криминальные аборты; у новорожденных входные ворота инфекции - пуповина.

Факторы, способствующие развитию заболевания:

• контаминация ран почвой, содержащей споры клостридий;

• повреждение, ишемия, некроз ткани;

• рваные и колотые раны (с карманами, затеками);

• инородные тела в ране. Различают следующие формы заболевания:

• посттравматический,

• постабортный,

• послеродовый,

• послеоперационный столбняк,

• столбняк новорожденных.

При загрязнении ран почвой споры возбудителя в анаэробных условиях прорастают, микроорганизм вырабатывает экзотоксин, с которым связаны клинические признаки заболевания. Клиника

Клинику описал еще Гиппократ.

Инкубационный период составляет 6-20 дней. Заболевание характеризуется как нисходящий столбняк. Начинается в виде тянущих болей в области раны.

Затем появляется 3 классических симптома:

1) спазм жевательной мускулатуры (тризм) - пациент не может открыть рот;

2) спазм мимической мускулатуры (сардоническая улыбка);

3) выраженное напряжение затылочных мышц и мышц спины (больной принимает характерное положение - опистотонус, т.е. голова запрокинута назад, приподнята поясничная область, больной опирается на затылок и пятки (т.к. тоническое сокращение разгибательной мускулатуры спины выражено сильнее, чем сгибательных мышц живота). Больной находится в ясном сознании. Смерть наступает от паралича дыхательного и сердечно-сосудистого центров, либо от асфиксии вследствие поражения мышц гортани, межреберных мышц и диафрагмы. При столбняке новорожденных первым симптомом является отказ ребенка от груди (дисфагия - нарушение глотания за счет спазма мускулатуры глотки), сокращение челюстных мышц, появляется типичная «поза лягушонка» — ребенок лежит на спине с согнутыми и прижатыми к туловищу ножками. Смерть наступает от асфиксии. Лабораторная диагностика Диагностика в основном клиническая.

К микробиологической диагностике прибегают с целью:

1. подтверждения клинического диагноза;

2. исследование на стерильность (на наличие спор возбудителя) перевязочного, шовного (кетгут) материала, препаратов для парентерального введения;

3. при санитарно-биологическом исследовании почвы.

Исследуемый материал: кусочки тканей раны, перевязочный материал, отделяемое пуповины у новорожденных; выделения из вагины, матки при криминальных абортах; шовный материал.

1. Бактериоскопический метод: обнаруживают Гр+ палочки с терминальными спорами в виде барабанной палочки.

2. Бактериологический метод: посев на среду Китта-Тароцци (наблюдается помутнение); пересев на агар Цейсслера (образуются зоны гемолиза вокруг отростчатых колоний); создание анаэробных условий.

3. Биопроба на белых мышах, морских свинках. Одной группе мышей фильтрат материала или культуры вводят в корень хвоста, и при наличии экзотоксина через 1 -2 дня у них развивается восходящий столбняк (хвост мыши становится ригидным, задние конечности вытягиваются, туловище искривляется и животные погибают от паралича дыхательного центра). Другой группе мышей вводится фильтрат, обработанный противостолбнячной антитоксической сывороткой; животные при этом выживают.

4. С целью быстрого обнаружения экзотоксина в крови больного ставят РНГА с эритроцитарным антительным диагностикумом. Исследование перевязочного, шовного хирургического материала проводится по общей схеме выделения чистых культур анаэробных микроорганизмов.

Профилактика

Неспецифическая профилактика - первичная хирургическая обработка раны при травматизме.

Специфическая профилактика. Ведется в плановом порядке вакциной АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина) и АДС. Вакцинация в 3, 4 и 5 месяцев. Ревакцинация в 18 месяцев, 6, 16 лет, а в последующем каждые 10 лет до 66 лет.

Экстренная профилактика столбняка проводится при травмах с повреждением целостности кожных покровов и слизистых и, в зависимости от предшествующих прививок анатоксином, осуществляется в виде либо:

• пассивной иммунизации (вводят однократно 3000 МЕ антитоксической сыворотки);

• активно-пассивной иммунизации (вводят столбнячный анатоксин и сыворотку или противостолбнячный человеческий иммуноглобулин);

• экстренная ревакцинация стобнячным анатоксином. Если человек привитой, то ему вводят только 0,5 мл анатоксина.

Если человек непривитой, то ему вводят 1мл анатоксина и 250 МЕ противостолбнячного человеческого иммуноглобулина (или 3 тыс. МЕ противостолбнячной сыворотки). Лечение

Для специфического терапии столбняка применяют противостолбнячную антитоксическую сыворотку в дозе 350 МЕ/кг веса больного; противостолбнячный человеческий иммуноглобулин. Введение противостолбнячной сыворотки по методу Безредко:

• Вначале внутрикожно в ладонную поверхность предплечья вводят 0,1 мл разведенной в 100 раз сыворотки и наблюдают 20-30 мин.

• Если на месте введения нет никакой реакции или появляется только папула до 1 см, то проба считается отрицательной.

• Далее вводят подкожно 0,1 мл неразведенной сыворотки.

• При отсутствии реакции на эту пробу через 30 мин. внутримышечно вводят полную дозу сыворотки.

Таким способом вводят антитоксическую сыворотку с целью профилактики развития аллергической реакции (анафилактический шок, сывороточная болезнь).

 

Ботулизм

Ботулизм — энтеральный клостридиоз, одна из форм пищевых отравлений — это тяжелая пищевая токсикоинфекция и интоксикация, возникающая в результате употребления в пищу продуктов, содержащих возбудителя

C. botulinum и его экзотоксины. Характеризуется преимущественным поражением ЦНС.

Морфологические свойства.

C. botulinum — крупная палочка с приконечной (субтерминальной) овальной спорой, напоминающая теннисную ракетку, перитрих, бескапсульный, Гр+ микроорганизм.

Культуральные свойства.

Соответсвуют анаэробам (хемоорганотроф, строгий анаэроб; питательные среды для культивирования — Китта-Тароцци, агар Цейсслера и другие). Антигенные свойства.

Возбудитель имеет О- и Н- антигены и выделяет экзотоксин. В зависимости от антигенной структуры экзотоксина различают 8 (7) сероваров возбудителя: A, B, C1, C2, D, E, F, G. У человека вызывают заболевание серовары A, B, С, E, реже — другие.

Ботулинический экзотоксин является основным фактором патогенности C. botulinum. Это нейротоксин. Его особенности:

• самый сильный из всех биологических ядов; смертельная доза для человека составляет 0,1 нг/кг веса человека;

• устойчив к нагреванию — при 100°С сохраняется в течение 10-15 мин.;

• устойчив к кислой среде, к замораживанию, к пищеварительным ферментам.

Ботулотоксин синтезируется в виде неактивного предшественника (протоксина). Способность возбудителя ботулизма продуцировать протеолитические ферменты играют важную роль в токсинообразовании. Протеолитическая группа возбудителей (к которой относятся все штаммы типа А и часть штаммов В и F) обеспечивают активацию протоксинов своими собственными эндогенными протеазами; а у непротеолитической (относят все штаммы типа Е и некоторые штаммы типов В и F) — протоксины активируются под действием пищеварительных ферментов (протеаз) желудочно-кишечного тракта. Возбудители типов C и D занимают промежуточное положение между этими группами. Особенности эпидемиологии, патогенеза и клиники:

C. botulinum обитают в кишечнике лошадей, рогатого скота, свиней, кур и других животных, с испражнениями попадают в почву. Заболевание наступает при употреблении пищи, содержащей возбудителя и его токсины. Поскольку C. botulinum — строгий анаэроб, наилучшие условия для его размножения и продукции токсина создаются в консервированных продуктах, куда споры могут попасть с частичками почвы и могут выдерживать термическую обработку консервов. Источником отравления могут быть мясные, рыбные, грибные консервы, колбаса. Заболевание носит спорадический характер.

Попадая в пищеварительный тракт, ботулинический токсин быстро всасывается в желудке и кишечнике, проникает в кровь и обуславливает длительную токсинемию, избирательно действует на ядра продолговатого мозга и ганглиозные клетки спинного мозга, на нервно-мышечную передачу импульсов (нервно-мышечные синапсы).

Инкубационный период составляет от 2 часов до 10 дней (чаще 1 сутки). В клинике превалируют нарушения со стороны ЦНС, симптомы связаны с поражением черепно-мозговых нервов:

• поражение языко-глоточного нерва — дисфагия (нарушение глотания),

• в результате паралича мышц гортани — афония (осиплость голоса),

• поражение глазодвигательных нервов — опущение века (птоз), косоглазие, двоение в глазах (диплопия), расстройство аккомодации, расширение зрачка (мидриаз),

• за счет нарушения нервно-мышечной передачи развивается паралич мышц шеи, туловища, конечностей, парез кишечника,

• может наступить паралич дыхания и сердца. Заболевание протекает на фоне сильной интоксикации. Лабораторная диагностика

Материал для исследования: рвотные массы, промывные воды желудка, кровь, испражнения, пищевые продукты. Исследование ведется в 2-х направлениях:

1) Индикация токсина в исследуемом материале;

2) Выделение чистой культуры, ее идентификация и определение токсигенности.

Обнаружение экзотоксина в исследуемом материале.

Биологическая проба на белых мышах (реакция нейтрализации токсина антитоксической сывороткой in vivo) Опыт 1

Надосадок исследуемого материала внутрибрюшинно вводят 2 группам белых мышей:

1-я группа - материал + поливалентная противоботулиническая сыворотка

А, В, С, Е.

2-я группа — материал без сыворотки.

Выживает 1-я группа мышей, которой была введена смесь материала с антитоксической сывороткой, нейтрализовавшей действие токсина, а 2-я — погибает. Далее ставится развернутая реакция нейтрализации с каждой типовой сывороткой в отдельности (А, В, С, Е) для определения типа экзотоксина. Опыт 2

Надосадок исследуемого материала внутрибрюшинно вводят 4 группам белых мышей:

1-я группа - материал + типоспецифическая противоботулиническая сыворотка типа А.

2-я группа - материал + типоспецифическая противоботулиническая сыворотка типа В.

3-я группа - материал + типоспецифическая противоботулиническая сыворотка типа С.

4-я группа - материал + типоспецифическая противоботулиническая сыворотка типа Е.

Выживает группа мышей, которой была введена смесь материала с антитоксической сывороткой, нейтрализовавшей действие гомологичного токсина. Животные, не защищенные сыворотками, погибают при явлениях общей слабости, одышки, парезов и параличей конечностей, западения мышц живота («осиная талия»).

Постановка РНГА с эритроцитарным антительным антитоксическим диагностикумом с целью быстрого обнаружения экзотоксина в крови больного.

Бактериологический метод.

По общим принципам выделят чистую культуру: посев исследуемого материала на питательную среду Китта-Тароцци, пересев на плотную среду Цейсслера для получения изолированных колоний, создание анаэробных условий при культивировании клостридий; идентификация культуры по морфологическим, культуральным, биохимическим свойствам; определение токсигенности в реакции нейтрализации на белых мышах.

Профилактика.

Строгое соблюдение санитарно-гигиенического режима при обработке продуктов на предприятиях пищевой промышленности, особенно связанных с изготовлением консервов, ветчины, колбас, а также при копчении, солении рыбы. Клостридии, сохранившиеся в консервах, вызывают бомбаж (вздутие) банок, а содержимое их издает запах прогорклого мяса. Такие консервы подлежат изъятию и тщательному бактериологическому исследованию. Лечение

Наиболее эффективным методом лечения ботулизма является раннее применение антитоксических сывороток. Пока не установлен тип токсина, вызвавшего ботулизм, больному вводят внутримышечно по 10 тыс. МЕ антитоксической сыворотки типов А, С и Е и 5 тыс. МЕ сыворотки типа В. После установления типа токсина вводят типоспецифическую сыворотку. С целью стимулирования выработки активного иммунитета больному вводят также анатоксины типов А, В, С, Е, а после определения типа токсина — только гомологичный анатоксин. Для скорейшего удаления токсина и возбудителя из кишечника промывают желудок и дают слабительное средство. Серотерапию дополняют антибиотикотерапией, симптоматическим и общеукрепляющим лечением.

 

Газовая гангрена

Газовая гангрена — полимикробная раневая инфекция, характеризующаяся выраженной интоксикацией, быстрым омертвлением тканей (некрозом) с газообразованием и развитием отека в них. Возбудители: C. perfringens, C. novyi (C. oedematiens), C. septicum, C. histolyticum.

Морфологические свойства

Возбудители — Гр+ палочки, имеют субтерминальную или центральную спору; C. perfringens — неподвижен, остальные — подвижны; C. perfringens — образует капсулу в организме, остальные - нет.

Культуральные свойства.

Все возбудители газовой гангрены — строгие анаэробы.

C. perfringens

• на жидких питательных средах — диффузное помутнение и интенсивное газообразование, быстрое бурное створаживание молока с образованием рыхлого сгустка;

• на пластинчатом кровяном агаре — круглые колонии с зоной гемолиза, на среде Вильсона-Блера — черного цвета колонии и разрыв среды за счет газообразования.

C. novyi

• на жидких средах — легкое помутнение, умеренное газообразование; молоко свертывает медленно;

• на кровяном агаре — серые бугристые шероховатые колонии с зоной гемолиза.

C. septicum

• на жидких средах — помутнение, умеренное газообразование; молоко свертывает медленно;

• на кровяном агаре — колонии с тонкими отростками с зоной гемолиза.

C. histolyticum

• на жидких средах — диффузное помутнение, без газа; молоко быстро пептонизирует;

• на кровяном агаре — колонии мелкие, гладкие, прозрачные с узкой зоной гемолиза;

• в столбике агара — компактные, мохнатые колонии. Патогенез и клиника

Газовая гангрена возникает при наличии следующих условий:

1) наличие глубокой рваной раны с карманами, затеками, некротизированными тканями, в глубине которых создаются анаэробные условия;

2) инфицирование раны почвой с фекалиями, содержащими клостридии;

3) наличие в ране не одного микроорганизма, а микробных ассоциаций этих микробов друг с другом, с гноеродными кокками или гнилостными микроорганизмами;

4) снижение реактивности организма в результате переохлаждения, кровопотери.

При этих условиях споры прорастают, вегетативные формы микроорганизмов выделяют экзотоксины и ферменты, приводящие к нарушению кровообращения, распространению некроза, распаду тканей, тяжелой интоксикации.

Газовая гангрена дает различные клинические проявления в зависимости от места локализации: может быть анаэробная инфекция мягких тканей конечностей и туловища, анаэробная инфекция мозга, брюшной полости, грудной клетки, анаэробный остеомиелит, послеродовая или послеабортная анаэробная инфекция.

Из-за цитолитических свойств экзотоксина с участием эстераз разрушается цитоплазматическая мембрана, что приводит к высвобождению содержимого клетки и последующему ее лизису. Это обеспечивает свободное прохождение экзотоксина в организме. За счет увеличения проницаемости тканей и стенок сосудов в ткани выпотевает жидкость, что приводит к развитию отека. За счет сахаролитических ферментов расщепляется гликоген мышечной ткани (который является хорошей питательной средой для анаэробов) и другие углеводы, что приводит к скоплению газа в подкожной клетчатке. Газообразование — результат ферментативной активности клостридий, а некроз — это результат действия токсинов и ферментов, и к этой интоксикации присоединяется отравление продуктами тканевого разложения. Инкубационный период длится от нескольких часов до 5 дней. 4 клинические формы газовой гангрены:

1. Эмфизематозная — характеризуются обильным газообразованием в ране, чаще вызывает C. perfringens.

2. Токсическая — характеризуется быстрым развитием отека с резким побледнением кожи.

3. Смешанная — отличается отеком, газообразованием; чаще вызывается ассоциацией микробов.

4. Флегмонозная — сопровождается отеком без тенденции к распространению. Отделяемое гнойное, т.к. присоединяется вторичная флора.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования: раневое отделяемое, некротизированная ткань, кровь.

Микроскопический метод: из материала готовят препараты с окраской по Граму и по Бурри-Гинсу для выявления капсулы. Можно поставить пробу на подвижность (раздавленная капля). Возбудители газовой гангрены подвижные (кроме C. perfringens), не имеют капсулы (кроме C. perfringens).

Бактериологический метод:

1-й этап: материал засевают на питательные среды (Китта-Тароцци, обезжиренное молоко, Вильсона-Блера, агар Цейсслера). Жидкие среды регенерируют (кипятят) и заливают вазелиновым маслом. Чашки выращивают в анаэростате.

2-й этап — изучение роста возбудителей газовой гангрены на средах; наиболее характерны изменения сред при росте C. perfringens. На среде Китта-Тароцци — помутнение и образование пузырьков газа; молоко свертывается; на среде Вильсона-Блера - почернение с разрывами среды; на агаре Цейсслера — серые крупные дисковидные колонии с зоной гемолиза. Из отдельных колоний делают мазки по Граму и их отсевают на среду Китта-Тароцци (для накопления чистой культуры). 3-й этап — определение ферментативных свойств возбудителей; реакция нейтрализации на белых мышах для определения типа экзотоксина; антибиотикограмма.

Биологический метод: заражают подкожно морских свинок суспензией материала. Животные погибают при картине экспериментальной газовой гангрены (местный отек с газообразованием, расплавление подкожно-жировой клетчатки). Посевом органов выделяют чистую культуру. Профилактика

Правильная хирургическая обработка ран, соблюдение асептики и антисептики при операциях.

Для активной иммунизации применяют анатоксины против газовой гангрены в составе секстанатоксина.

Лечение

Лечение хирургическое: иссечение всех омертвевших тканей. После операции используют антибиотики широкого спектра действия. Для специфической терапии применяют противогангренозную антитоксическую сыворотку.

 

АСПОРОГЕННЫЕ АНАЭРОБЫ Бактероиды, их роль в патологии человека

Типовой вид - Bacteroides fragilis. Входит в состав микробиоценоза толстой кишки и гениталий. Условно-патогенный микроб, вызывающий перитонит, аппендицит, абсцессы органов брюшной полости, плевропневмонии, эндометриты и другие гнойно-воспалительные заболевания.

Фузобактерии, их роль в патологии человека

Условно-патогенные бактерии. Основные виды: Fusobacteruim nucleatum, F.necrophorum. Обитают во рту (десневые карманы), в кишечнике и в гениталиях женщин; способны поражать верхние дыхательные пути и урогенитальный тракт. Вызывают гнойно-воспалительные заболевания челюстно-лицевой области, тонзиллит, абсцессы легкого, мозга, внутрибрюшной полости, аспирационную пневмонию, эмпиему, эндокардит и др.

Порфиромонады, их роль в патологии человека

В этот род сравнительно недавно выделены пигментообразующие, инертные к углеводам бактероиды. Типовой вид - Porphyromonas asaccharolytica. Обитатели ротовой полости млекопитающих. При снижении резистентности вызывают, как правило, в ассоциации с другими бактериями, заболевания ротовой полости, поражения мягких тканей головы и шеи.

Превотеллы, их роль в патологии человека

В этот род выделены бактероиды, ферментирующие углеводы. Типовой вид — Prevotella melaninogenica. Преимущественное место обитания -полость рта, толстый кишечник и мочеполовой тракт. Вызывают гнойно-воспалительные заболевания челюстно-лицевой области, органов брюшной полости и мочеполового тракта.

Пептококки, их роль в патологии человека

Типовой вид — Peptococcus niger. Обитают в слизистых полости рта, кишечника, мочеполовых путей. По частоте выявляемости вместе с пептострептококками занимают второе место среди анаэробов (после бактероидов). При снижении резистентности (в составе микробных ассоциаций с другими бактериями) вызывают эндогенные инфекции: плевропневмонии, внутрибрюшинные абсцессы гинекологические поражения, инфекции кожи и мягких тканей, остеомиелиты. Пептострептококки, их роль в патологии человека Типовой вид — Peptostreptococcus anaerobius. Роль в патологии человека аналогична пептококкам.

Принципы микробиологической диагностики

Используют бактериоскопический метод как ориентировочный и культуральный, аналогичный выделению клостридий.

Необходимо учитывать, что многие из неспорообразующих анаэробов погибают при малейшем контакте с воздухом и учитывать это при взятии патологического материала (гнойное отделяемое, кровь, аспираты суставных жидкостей, абсцессов.

Лекция 20

Изогнутые бактерии. Спирохеты и другие спиральные бактерии. Микробиологическая диагностика возвратного тифа, возвратной клещевой лихорадки, лайм-боррелиоза и лептоспироза. Методы лабораторной диагностики сифилиса.

 

Спирохеты — прокариоты, наделенные чертами сходства с простейшими.

Это извитые, тонкие, обладающие активной подвижностью

микроорганизмы.

Таксономия спирохет

Царство: Procaryotae

Отдел: Gracilicutes

Порядок: Spirochetales

Семейство: 1. Spirochaetaceae Род: Treponema

Род: Borrelia
2. Leptospiraceae Род: Leptospira

Морфология спирохет

Спирохеты состоят из цитоплазматического цилиндра, отграниченные цитоплазматической мембраной от тонкой и эластичной клеточной стенки (КС), которая состоит из наружной мембраны и пептидогликанового слоя. Между ЦМ и цитоплазматическим цилиндром спирохет расположены фибриллы, состоящие, так же как и жгутики бактерий, из белка флагеллина. Фибриллы прикреплены к блефаропластам - дисковидным образованиям на обоих концах цилиндра. Фибриллы обеспечивают разные типы движения спирохет:

• поступательное,

• вращательное,

• сгибательное.

Спирохеты, особенно трепонемы, плохо воспринимают анилиновые красители.

 

БОРРЕЛИИ

Эпидемический возвратный тиф — антропонозное, трансмиссивное заболевание с чередованием периодов лихорадки и апирексии, сопровождающееся увеличением печени и селезенки.

Лайм-боррелиоз — системная природно-очаговая трансмиссивная инфекция, характеризующаяся эритемой, лихорадкой, поражением центральной и периферической нервной системы, сердца и крупных сосудов.

Таксономия боррелий

Borrelia recurrentis — возбудитель эпидемического возвратного тифа. Borrelia duttoni, Borrelia caucasica, Borrelia persica, Borrelia hispanica, Borrelia parkeri — возбудители эндемического возвратного тифа. Borrelia burgdorferi — возбудитель лайм-боррелиоза.

Морфология боррелий

Крупные спиралевидные микроорганизмы, имеющие 3-8 неравномерных крупных завитков, не образуют спор, капсул. Очень подвижны, совершают сгибательные, вращательные, поступательные движения. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Грамотрицательны. По Романовскому-Гимзе — сине-фиолетового цвета. Культуральные свойства

Строгие анаэробы. Прихотливы к питательным средам и условиям культивирования. Оптимальная температура 28 °С. Растут на средах с сывороткой крови и кусочками тканей. Рост скудный, видимым становится через 4-7 суток.

Эпидемический возвратный тиф

Эпидемиология

Источник инфекции — больной человек. Переносчик — вши. Патогенез и клиника

Попавшие в организм бактерии захватываются фагоцитами и размножаются в их цитоплазме. К окончанию инкубационного периода боррелии в большом количестве оказываются в кровотоке, где разрушаются под действием антител и комплемента. Выделяется эндотоксин (ЛПС), под его действием повышается температура, появляется головная боль. Повреждаются клетки ЦНС, кровеносной системы, паренхиматозные органы. Часть боррелий в тканях изменяют антигенную структуру (ускользают от действия первично синтезированных антител) и повторно выходят в кровь. Запускается синтез нового пула антител. После нескольких приступов (2-3, иногда до 5) образуется пул гетерогенных антител, которые полностью уничтожают возбудитель.

Лихорадочный период продолжается 5-7 дней. Иммунные механизмы

удаляют боррелии из кровотока — приступ заканчивается.

Иммунитет гуморальный, нестойкий, не перекрестный с другими

боррелиозами.

Лабораторная диагностика

Включает бактериологический и серологический методы

Для бактериоскопии кровь необходимо брать в начале лихорадочного

периода (максимальная концентрация боррелий). Кровяные мазки

окрашивают по Романовскому-Гимзе или метиленовым синим.

Для выявления антигенов боррелий в исследуемом материале можно

использовать РИФ, ИФА.

Серологический метод. Используют реакцию иммобилизации боррелий (РИБ). Исследуемый материал — сыворотка больного, которую смешивают с музейной культурой Borrelia recurrentis. Если в сыворотке больного есть антитела, то через 18-20 часов после инкубации в термостате наступает обездвиживание боррелий. Учет результатов — микроскопирование препарата «висячая капля» в «темном» поле или фазовом контрасте. Если процент обездвиживания более 50%, реакция считается положительной. Для выявления антител также используют ИФА или непрямую РИФ.

Профилактика неспецифическая: уничтожение вшей. Лечение — антибиотикотерапия (пенициллины, тетрациклины).

 

Лайм-боррелиоз

Эпидемиология

Источник и резурвуар инфекции — мелкие и крупные грызуны, олени, птицы, кошки, собаки, овцы, крупный рогатый скот.

Путь передачи — трансмиссивный через укусы клещей (в России и Беларуси — через укусы Ixodes ricinus и Ixodes persulcatus). У клещей возможна трансовариальная передача возбудителя.

Патогенез и клинические проявления

От места укуса клеща боррелии проникают в кожу, где развивается пятно кольцевидной эритемы вокруг места укуса, которая постепенно увеличивается, образуется мигрирующая эритема более 5 см в диаметре. Возбудитель попадает в кровь и разносится во внутренние органы, вызывает там очаги деструкции. Выражены аутоиммунные процессы. Часто развиваются артриты. Поражается сердечно-сосудистая и нервная системы.

Иммунитет — антительный, неперекрестный с другими боррелиозами. Лабораторная диагностика

Основной метод — серологический. Выявляют антитела в непрямой РИФ или ИФА, начиная с 3-6 недели заболевания. До 4-6 недель находят антитела IgM, диагностический титр их 1:64, к 8-10 неделям определяют IgG, диагностический титр 1:28. В течение года после заболевания титр антител нарастает.

ПЦР выявляет в крови больных гены боррелий.

Профилактика неспецифическая: защита от укуса клещей при посещении леса, дачи.

Лечение — антибиотики (тетрациклины, цефалоспорины).

ЛЕПТОСПИРЫ

Лептоспироз — острое природно-очаговое зоонозное инфекционное заболевание, протекающее с интоксикацией, миалгией, поражением почек, печени, нервной и сосудистой систем.

Таксономия

Семейство Leptospiraceae включает два вида. Leptospira interrogans — возбудитель лептоспироза.

Вид включает в себя 38 серогрупп и более 200 сероваров, многие из которых имеют собственные названия. Основные серовары:

• L. icterohaemorragiae

• L. grippotyphosa

• L. canicola

• L. pomona Leptospira biflexa — сапрофит Морфология

Длинные извитые нити, много (12-20) равномерных плотно прилегающих друг к другу завитков. За счет вторичных изгибов имеют форму латинской буквы «S» или «С». Спор и капсул нет. Активная подвижность за счет аксиальных фибрилл (периплазматических жгутиков). Плохо окрашиваются анилиновыми красителями, поэтому лептоспиры лучше изучать в «темном» поле. По Романовскому-Гимзе окрашиваются в розовый цвет. Культуральные свойства

По типу дыхания аэробы, микроаэрофилы. Хорошо растут на среде с 30% кроличьей сыворотки (среда Уленгута) при температуре 28-30°С; растут медленно 5-7 суток. При росте нет помутнения среды. Оценивают рост при микроскопии жидкой среды в темном поле.

Антигены

Имеются группоспецифические антигены, по наличию которых все лептоспиры разделены на 38 серогрупп, и типоспецифические поверхностные липопротеиновые антигены, по которым лептоспиры разделены на 200 серовариантов. Их определяют в реакции микроагглютинации с монорецепторными сыворотками. Факторы патогенности:

• эндотоксин (ЛПС);

• экзотоксин;

 

• ферменты агрессии (гиалуронидаза, фибринолизин, плазмокоагулаза) - обеспечивают быстрое распространение и паразитизм возбудителя в организме больного;

• адгезины.

Эпидемиология

Источник и резервуар инфекции — животные, птицы. Лептоспиры

выделяются из их организма с мочой в воду, почву.

Пути передачи: водный, реже алиментарный и контактный.

Входные ворота — кожа и слизистые.

Патогенез

Возбудитель от входных ворот лимфогенным и гематогенным путем распространяется по организму. Вызывает поражение паренхиматозных органов (печени, почек и селезенки). Лептоспироз сопровождается геморрагическим синдромом, что связано с действием токсинов на эндотелий сосудов. В результате нарушается проницаемость сосудистой стенки, и появляются геморрагии. Начиная со 2-й недели заболевания возбудитель исчезает из крови и накапливается в извитых канальцах почек (возможно развитие острой почечной недостаточности). Иммунитет пожизненный, типоспецифический, гуморальный. Лабораторная диагностика

Материал для исследования зависит от стадии заболевания: кровь, моча, сыворотка.

Микроскопический метод. Исследуют кровь на наличие возбудителя до пятого дня заболевания, мочу на 2-3 неделе. Материал микроскопируют в фазово-контрастном или темнопольном микроскопах после приготовления препарата «висячая» или «раздавленная капля». Выявляют типичную морфологию и подвижность.

Бактериологический метод. Делают посев 5-10 мл крови и мочи в жидкие сывороточные среды, культивируют при 28°С. Через 5-7 дней микроскопируют среду в «темном» поле. Идентификацию возбудителя проводят в реакции агглютинации и лизиса, РИФ, реакции иммобилизации лептоспир антисывороткой, или используют генодиагностику (ПЦР и др.) Серологический метод. Исследуют антитела, начиная со 2-3 недели. Ставят РНГА, ИФА или реакцию микроагглютинации-лизиса.

 

Специфическая профилактика

Инактивированная жидкая лептоспирозная вакцина из штаммов четырех серологических групп. Вакцинируют работников животноводческих ферм и мясокомбинатов по эпидпоказаниям. Неспецифическая профилактика:

• ветеринарный надзор за здоровьем животных,

• санитарный контроль за чистотой водных источников,

• дератизация,

• запрет на купание в водоемах, в которых осуществляется водопой скота.

Лечение

Антибиотикотерапия (пенициллины, цефалоспорины, доксициклин). ТРЕПОНЕМЫ

Сифилис — хроническое венерическое заболевание с вариабельным циклическим течением, затрагивающее все органы и ткани. Патогенные виды трепонем: T.pallidum

• подвид pallidum (сифилис)

• подвид pertenue (тропическая гранулема, или фрамбезия)

• подвид endemicum (беджель, или эндемичный сифилис) T. carateum (возбудитель пинты)

T. vincentii (в сочетании с Fusobacterium nucleatum вызывает язвенно-некротическую ангину)

Морфология и тинкториальные свойства

Трепонемы имеют извитую форму, 8-12 равномерных мелких завитков. Подвижны. Спор и капсул не имеют, но могут в неблагоприятных условиях образовывать цисты (трепонема скручивается и покрывается плотной оболочкой), переходить в L-форму.

Трепонемы содержат около 40% липидов, поэтому плохо окрашиваются анилиновыми красителями. При окраске по Романовскому-Гимзе приобретают бледно-розовый цвет, поэтому и называются бледными трепонемами. Грамотрицательны.

Культуральные свойства

По типу дыхания анаэробы или микроаэрофилы, оптимум температуры роста — 35°С. На искусственных питательных средах растут плохо. Можно культивировать на сывороточных средах с добавлением кусочков яичек кролика или печеночной ткани. При этом возбудители теряют вирулентность и называются культуральными трепонемами. Бактериологический метод не используется для лабораторной диагностики сифилиса.

Лучше размножаются в яичке кролика или в курином эмбрионе, где вирулентность сохраняется, свойства возбудителя при этом не меняются, и такие трепонемы называют тканевыми.

Антигены

Выявлено 4 антигенных фракции: белковая термолабильная, полисахаридная термостабильная и 2 липидных фракции, одна из них — фосфолипидная, идентична кардиолипиновому антигену сердца быка и имеет диагностическое значение, т.к. вступает в реакцию с антителами, образовавшимися у больного при сифилисе (антигенная мимикрия). Факторы патогенности

• устойчивость к фагоцитозу,

• высокая инвазивная активность,

• эндотоксин,

• липопротеины (участвуют в развитии иммунопатологических процессов).

 

Эпидемиология

Источник инфекции — человек (в первичной и вторичной стадии). Основной механизм передачи — контактный (чаще — половой). Дополнительные механизмы передачи — трансплацентарный (начиная с 5 месяца беременности) и трансфузионный (после переливания крови). Входные ворота — поврежденные кожа и слизистые, откуда возбудитель попадает в лимфу, кровь, развивается генерализованный процесс, после чего поражаются внутренние органы и ЦНС. Заболевание протекает циклично. Патогенез

 

размножение трепонем в месте внедрения


 

твёрдый шанкр региональный лимфоаденит

 

 

кровь _ — — сыпь

 

 

диссеминация по органам — — ^ гранулемы


мозг — —

 

мозг— — — ^ нейросифилис


 

 

Рисунок 11 — патогенез сифилиса

 

Периоды заболевания:

• инкубационный,

• первичный сифилис,

• вторичный сифилис,

• третичный сифилис,

• нейросифилис (четвертичный сифилис).

 

Лабораторная диагностика Бактериоскопический метод


При первичном сифилисе исследуют экссудат (отделяемое) из язвы-шанкра, соскоб из элементов сыпи и пунктат из лимфоузлов на наличие возбудителя.

Из материала готовят препарат «висячая» или «раздавленная капля» и микроскопируют его в «темном» поле или в фазово-контрастном микроскопе.

Серологический метод включает в себя 2 группы реакций:

1) ускоренные (отборочные), с нетрепанематозными (кардиолипиновыми) антигенами;

2) подтверждающие, с трепонематозными антигенами.

Ускоренные отборочные реакции проводят для выявления антител при массовых обследования.

1. Реакция микропреципитации с сывороткой больного и
кардиолипиновым антигеном (жировая вытяжка из сердца быка),
холестерином и лецитином.

2. Реакция Вассермана (РСК) с кардиолипиновым антигеном.
Подтверждающие реакции.

1. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ). С этой целью используют сыворотку больного, живые тканевые трепонемы и комплемент. Реакцию ставят в стерильных пробирках и через 20 часов инкубации в термостате оценивают в темном поле результаты по проценту обездвиженных трепонем. Если обездвижены более 50% трепонем, реакция положительная, 10-50% — слабоположительная, меньше — отрицательная.

2. РНГА с трепонемным эритроцитарным диагностикумом.

3. ИФА с трепонемным антигеном.

Профилактика сифилиса — только неспецифическая. Выявление, изоляция и лечение больных, контроль за эффективностью лечения; обязательное выявление источника инфекции и контактных с ним лиц. Лечение — антибиотикотерапия. Пенициллины или цефалоспорины назначают курсом до полного излечения.

 

КАМПИЛОБАКТЕРИИ

Кампилобактериоз — острое инфекционное зоонозное заболевание, характеризующееся синдромом общей интоксикации, преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта и возможностью генерализации патологического процесса.

Таксономия

Царство Procaryotae, отдел Gracilicutes, семейство Spirillaceae.

Род Campylobacter.

Виды: C.jejuni, C.lari, C.coli, С. fetus

Род Helicobacter, вид: H.pylori

С. jejuni, С. coli, С. lari — термофилы (температурный оптимум 42 °С).

С. fetus — мезофил (температурный оптимум 37 °С).

Морфология

Тонкие, изогнутые в форме запятой (вибриона) или S-образные палочки длиной 0,5-5,0 мкм, диаметр 0,2-0,8 мкм. Могут напоминать крылья чайки при соединении двух клеток в короткую цепочку. Грамотрицательны. Спор и капсул не образуют. Имеют один или два полярно расположенных жгутика, обеспечивающих им высокую подвижность со стремительным, «штопорообразным» поступательным характером движения. Подвижность видна при темнопольной или фазовоконтрастной микроскопии. Биологические и культуральные свойства

Хемоорганотрофы. Термофилы, способны к росту при 37-44 °С, но не при 25 °С. Микроаэрофилы и капнофилы, т.е. требуют для культивирования пониженного содержания кислорода и повышенного — углекислого газа. Оптимальная атмосфера для культивирования патогенных видов кампилобактерии имеет следующий состав: О2 — 5%, СО2 — 10%, азот — 85%. Энергию кампилобактерии получают из аминокислот и трикарбоновых кислот, но не из углеводов, к окислению и ферментации которых не способны.

Кампилобактерий оксидазоположительны, каталазоположительны. Не гидролизуют желатин и мочевину.

Для культивирования кампилобактерий используют коммерческие питательные среды на основе железо-эритритного агара. В среды добавлены вещества, снижающие окислительно-восстановительный потенциал, и антибиотики.

Антигены

Кампилобактерии имеют общие антигены с возбудителями бруцеллеза и иерсиниоза.

Кампилобактерии имеют энтеротоксин (вызывает диарею) и цитотоксин, повреждающий слизистую оболочку толстой кишки.

Эпидемиология

Зооноз. Основным резервуаром кампилобактерий и источником инфекции для человека служат животные и птицы, преимущественно домашние и сельскохозяйственные (кролики, свиньи, коровы, козы, овцы, утки, могут быть собаки и кошки).

Передача кампилобактерий от человека к человеку происходит редко, в

случаях заражения детей раннего возраста от взрослых.

Механизм передачи фекально-оральный, путь — пищевой.

Заражение происходит при употреблении в пищу инфицированных мясных

и молочных продуктов без достаточной термической обработки, а также

овощей и фруктов. Возможен водный путь передачи инфекции.

Географическое распространение кампилобактериоза очень широко, он встречается на всех континентах, что связано с интенсификацией животноводства, возросшей международной торговлей животными, кормами, продуктами животного происхождения, ростом урбанизации.

Патогенез и клиника

Возбудитель попадает в организм человека через рот с инфицированными продуктами и водой. В желудочно-кишечном тракте, преимущественно в тонкой (тощей) кишке и реже в толстой, в месте входных ворот инфекции возникают воспалительные изменения слизистой оболочки. При большой инфицирующей дозе и сниженной резистентности макроорганизма развивается бактериемия с диссеминацией возбудителя в различные органы и ткани.

Кампилобактериоз протекает в основном в виде энтеритов и энтероколитов, Возможны заболевания внекишечной локализации: септицемия, эндокардит, перикардит, менингит. Методы лабораторной диагностики

Лабораторная диагностика включает бактериологический и серологический методы исследований.

Бактериологический метод. Материалом для исследования — фекалии, кровь, мокрота, гной, спинномозговая жидкость, объекты внешней среды (пищевые продукты, вода).

Материал засевают на одну из селективных питательных сред, посевы выращивают 72 ч при 37-42 °С в смеси 85 % азота, 10% углекислого газа и 5 % кислорода.

На жидких питательных средах кампилобактер через 48-72 ч инкубации образует равномерное помутнение с выраженным осадком, на полужидких растет в виде дисков, расположенных на глубине 1 -2 мм от поверхности питательной среды. На селективных плотных питательных средах обнаруживаются два типа колоний. Колонии первого типа негемолитические, сероватые, плоские, блестящие, прозрачные, влажные, как бы растекающиеся, похожие на капли водяных паров. Колонии второго типа также негемолитические, более плотные и оформленные, чем колонии первого типа, выпуклые.

Из подозрительных на кампилобактерии колоний готовят мазки, окрашивают по Граму. Обнаружение при микроскопировании мазков грамотрицательных изогнутых или спиралевидных палочек является основанием для пересева на кровяной агар с антибиотиками с целью выделения чистой культуры.

Родовая принадлежность выделенной чистой культуры кампилобактера определяется по результатам изучения морфологических свойств, на основании положительных результатов тестов на способность к продукции цитохромоксидазы и каталазы. Видовая принадлежность — по результатам


тестов на способность к быстрому гидролизу гиппурата натрия и резистентности к налидиксовой кислоте.

Серологический метод исследования играет важную роль при
эпидемиологических исследованиях. Используют РИФ,

иммуноферментный анализ (ИФА), иммуноэлектрофорез, реакцию агглютинации (РА), непрямой гемагглютинации (РНГА), микроагглютинации, латекс-агглютинации. Лечение

Антибиотикотерапия. Наиболее эффективными средствами этиотропной терапии являются эритромицин и гентамицин. Профилактика только неспецифическая.

 

Helicobacter pylori расценивается как возбудитель язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Н. pylori несколько крупнее других видов кампилобактерий. H. pylori — лофотрих или монотрих. Для роста требуются микроаэрофильные условия или атмосфера, обогащенная СО2. В аэробных или анаэробных условиях не растет.

Растет на средах для кампилобактерий, но предпочтение отдает «шоколадному» агару, образуя на нем колонии диаметром 0,5-1,0 мм. На 10%-ном кровяном агаре отмечается слабый гемолиз.

H. pylori оксидазо- и каталазопозитивен; сероводород не образует, имеет уреазу.

Факторами вирулентности H. pylori служат: подвижность; уреаза (нейтрализует HCl и повреждает эпителиоциты); протеиновый цитотоксин, вызывающий вакуолизацию эпителиальных клеток и повреждающий межклеточные мостики; липополисахарид; протеиназа; липаза; каталаза.


Лекция 21

Патогенные риккетсии и хламидии

 

Риккетсии — это прокариоты, наделенные чертами сходства с вирусами. С вирусами их роднит:

а) абсолютный внутриклеточный паразитизм;

б) невозможность культивирования на искусственных питательных средах.
Риккетсии — паразиты членистоногих и других хозяев. Человек в
эпидемиологической цепи паразит-среда-хозяин является случайным
звеном.

Паразитизм риккетсий обусловлен неспособностью их синтезу НАД, хотя они способны к аккумуляции энергии и синтезу АТФ.

Полагают, что у них редуцированы ферменты гликолитического ряда.

Риккетсии являются паразитами клетки: цитоплазматическими или

внутриядерными.

Таксономия риккетсий

Царство: Procaryotae

Отдел: Gracilicutes

Порядок: Rickettsiales

Семейство: Rickettsiaceae Семейство: Bartonellaceae

Роды: Rickettsia, Orientia Род: Bartonella

До недавнего времени к риккетсиям относили род Goxiella. В настоящее время коксиеллы выделены из семейства Rickettsiaceae в отдельную группу возбудителей.

Виды: Rickettsia prowazekii — возбудитель эпидемического сыпного Bartonella quintana — возбудитель волынской лихорадки Goxiella burnetii — возбудитель Q-лихорадки

Морфология

Риккетсии — полиморфные микроорганизмы. Жизненный цикл риккетсий зависит от клетки хозяина и состоит из двух стадий: вегетативной и покоящейся.

Вегетативная форма — палочки, размножающиеся бинарным делением и обладающие активной подвижностью, обусловленной жгутикоподобными структурами.

Покоящаяся стадия — клетки округлой формы, не способны к размножению. Диаметр покоящихся вегетативных форм 0,2-0,3 мкм. Длина вегетативных форм 0,8-1,5-3,0-10 мкм (короткие, длинные палочки, нитевидные структуры). Вегетативные формы могут содержат метахроматические зерна, которые в окрашенных препаратах выглядят более темными, чем цитоплазма клетки (зебровидная окраска). Спор и капсул риккетсии не имеют.

Размножение риккетсий происходит путем бинарного деления, поэтапного отшнуровывания или одномоментного дробления нити — фрагментации. Способы обнаружения:

1. Окраска по Граму — грамотрицательны.

2. Окраска по Романовскому-Гимзе. У сине-фиолетовых риккетсий цитоплазма голубая, а хроматиновые зерна красные. Они располагаются внутриклеточно.

3. Окраска по Здродовскому (облегченный способ Циля-Нельсона). Риккетсии относительно кислотоустойчивые микроорганизмы, поэтому в препаратах они выглядят рубиново-красными на голубом фоне цитоплазмы клетки хозяина.

Культивирование риккетсий

Риккетсии — облигатные паразиты, размножающиеся внутриклеточно. Не растут на питательных средах (исключение — Bartonella quintana, возбудитель волынской лихорадки, способна расти на синтетических питательных средах). Способы культивирования:

1. В организме белых мышей или морских свинок (самцов). Белых мышей заражают интраназально под легким эфирным наркозом. У животных при этом развивается риккетсиозная пневмония с летальным исходом. Самцов морских свинок заражают внутрибрюшинно, при этом при эндемических риккетсиозах развивается отек влагалищной оболочки яичка (скротальный феномен Штрауса), а при эпидемических риккетсиозах — периваскулиты сосудов головного мозга (феномен Давыдовского-Френкеля).

2. В желточном мешке развивающегося куриного эмбриона.

3. На клеточных культурах. В монослое клеточных культур образуются бляшки до 1 мл в дм, которые погашаются в присутствии специфической сыворотки (РН на клеточных культурах).

Антигенная структура. У риккетсий выделяют:

1. Корпускулярный видоспецифический термолабильный антиген.

2. Поверхностный растворимый группоспецифический антиген, обладает протективным действием, входит в состав вакцины ЖКСВЕ. Проявляет токсические и гемолитические свойства. К нему вырабатываются агглютинины, которые способны перекрестно агглютинировать штаммы Proteus vulgaris ОХ19-, ОХ2-, ОХК-. Реакции агглютинации со штаммами P.vulgaris (реакция Вейля-Феликса) ранее широко использовались в серодиагностике риккетсиозов.

3. Антигенными свойствами обладает токсин. Он не экскретируется во внешнюю среду, связан с микробной клеткой, но термолабилен и на него вырабатываются антитела.

– Конец работы –

Эта тема принадлежит разделу:

КУРС ЛЕКЦИЙ Пособие может быть использовано для закрепления материала, изученного в курсе микробиологии, вирусологии, иммунологии

УЧРЕЖДЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ ГОМЕЛЬСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ... КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ...

Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ: Дифференциальные признаки, отличающие C. diphtheriae от дифтероидов

Что будем делать с полученным материалом:

Если этот материал оказался полезным ля Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:

Все темы данного раздела:

Эндотоксины
• продукты жизнедеятельности живых клеток белки термолабильны высокотоксичны действуют спустя латентный период обладают строгой специфичностью действия (пора

Основные цитокины иммунного ответа
  ИЛ-1 Макрофаги, В-клетки, NK-клетки Т-клетки, В-клетки, макрофаги Активация лимфоцитов и макрофагов, гипертермия, ос

Дифференцировка видов стафилоккоков
Признак виды   S. aureus S. epidermidis S. saprophyticus Плазмокоагула

Хотите получать на электронную почту самые свежие новости?
Education Insider Sample
Подпишитесь на Нашу рассылку
Наша политика приватности обеспечивает 100% безопасность и анонимность Ваших E-Mail
Реклама
Соответствующий теме материал
  • Похожее
  • Популярное
  • Облако тегов
  • Здесь
  • Временно
  • Пусто
Теги