Часто наблюдаются явные и реальные отклонения от закона Бугера -
Ламберта - Бера. Поэтому в сомнительных случаях необходимо
экспериментальное подтверждение закона. Рассеяние и отражение от
поверхности образца подобно поглощению также уменьшают интенсивность
света, поэтому свет в образце должен ослабевать только из-за поглощения, но
не отражения или рассеяния. Дальнейшие очевидные отклонения вызваны
участием поглощающего вещества в реакциях, конкурирующих с основной,
особенно с увеличением концентрации раствора (процессы ассоциации,
полимеризации, комплексообразования и т.д.); а также при уменьшении
концентрации раствора (процессы диссоциации, гидролиза, сольватации).
Пример: MnO4
– ионы в водных растворах реагируют с водой по схеме:
4MnO4− + 2H2O →4MnO2↓ + 3O2 ↑ +4OH−
С ростом концентрации KMnO4 каталитические процессы разложения
ускоряются, что сопровождается уменьшением концентрации MnO4-,
вследствие чего наблюдается отклонение от основного закона
светопоглощения. Поэтому при фотометрических измерениях применяют
только свежеприготовленные растворы KMnO4 невысоких концентраций.
Важно отметить, что часто наблюдаемое отклонение от закона Бугера -
Ламберта - Бера связано с так называемым эффектом сита. Он обусловлен
неоднородным распределением поглощающего вещества. В результате
негомогенного распределения измеряемых молекул в образце образуются
«дырки», через которые кванты света будут проходить без взаимодействия с
поглощающим веществом (как сквозь сито). Следовательно, закон не будет
выполняться.
Количественное определение вещества по светопоглощению основано на
применении закона Бугера - Ламберта - Бера. Концентрацию можно определить
пользуясь: методом градуировочного графика А = f(C), методом сравнения или
методом добавок.