ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ

Цитогенетика – отрасль биологии, которая изучает явления в связи с цитологическими особенностями организмов, то есть изучает те структуры клеток, которые исполняют роль материальных носителей наследственности, обеспечивая преемственность свойств клеток и организмов.

Цитогенетический метод позволяет изучать структуру и функционирование хромосом, обнаруживать аномалии, связанные с нарушением и изменениями в их строении и количестве.

Цитогенетические исследования хромосом соматической клетки организма животных проводят в такой последовательности:

1. Изготовление препаратов хромосом

2. Их окрашивание и фиксация

3. Рассмотрение препаратов под микроскопом

4. Фотографирование отдельных метафазных пластинок.

5. Морфометрический анализ хромосом

Анализ особенностей хромосом в клетках животных и растений разных видов дает возможность выяснить целый ряд общих закономерностей, которые имеют важное значение при изучении явлений наследственности и изменчивости.

Количество хромосом, их форма и размеры в клетках одного вида животных одинаковые. Совокупность количественных и структурных особенностей диплоидного набора хромосом определенного вида животных называется - КАРИОТИПОМ.

В кариотипе заложена генетическая информация особи, изменение которой влечет изменение признаков и функций организма данной особи или ее потомков. Своевременное выявление таких генетических нарушений дает возможность предотвратить последующее их распространение в популяции.

Каждая отдельная хромосома имеет свое индивидуальное строение, вместе с тем все хромосомы имеют общие морфологические признаки. Конечные участки хромосом называются – ТЕЛOМЕРАМИ. Они предотвращают слипание хромосом друг с другом и имеют особенную структуру. Хромосомы состоят из двух нитей - ХРОМАТИД, которые размещены параллельно и соединены между собой в одной точке, которая называется ЦЕНTPOMЕPOЙ. Центромера разделяет хромосому на две части, которые называются ПЛЕЧАМИ ХРОМОСОМ. Схема строения спирализованной хромосомы приведена на рисунке 1

 
 
Рис.1 Схема строения хромосом (хроматиды)
 
 


p –короткое плечо 1. –теломера 3. -эухроматин

q - длинное плечо2. -гетерохроматин4. -центромера|

 

Хромосомы распределяются на типы в зависимости от соотношения длины плеч хромосом. Тип хромосом определяют за плечевым индексом.

За его помощью хромосомы классифицируют на следующие морфометрические типы:

Рис. 2 Типа хромосом.

а. Метацентрические ІВ=1....1,7

б. Субметацентрические ІВ=1,8....3,0

в. Субтелоцентрические ІВ=3,1...7,0

г. Телоцентрические ІВ>7,0

 

Идентификацию хромосом проводят путем определения следующих показателей:

1. Абсолютная длина каждой хромосомы - L

 

2. Относительная длина каждой хромосомы - LК,%

3. Плечевой индекс - ІВ

 

4.Центромерный индекс - ІС,%

Морфометрический анализ позволяет провести идентификацию хромосом, определить их типы, выяснить наличие аномалий в кариотипе.

Для верности морфометрического анализа делают несколько фотографий из разных метафазных пластинок одного мазка и определяют индекс спирaлизации (І).

Исследуют метафазные пластинки с одинаковым индексом спирализации.

Для проведения морфометрического анализа используют микрофотографии метафазных пластинок (их ксерокопии). Объектив – микрометром микроскопа измеряют фактическую длину наиболее примечательной хромосомы (хромосома – тестер обозначенная на рис.3).


Рис. 3. Метафазная пластинка кариотипа свиньи

1.Xpoмocoмa-тестер,

q - длинное плечо

р - короткое плечо.

 


На фотографии метафазной пластинки эта же хромосома - тестер измеряется линейкой. Потом делается расчет ее увеличения по отношению к фактической длине. Фактическую длину других хромосом устанавливают путем перерасчета с использованием величины их увеличения.