Цели и задачи исследований. Цель исследований совершенствование технологии выращивания зеленых черенков крыжовника с закрытой корневой системой путем применения физиологически активных веществ.
Задачи исследований 1. Изучить влияние внекорневых обработок зеленых черенков крыжовника новыми препаратами с цитокининовой активностью цитодеф и кремнийорганических соединений крезацин, крезивал на их физиологическое состояние и развитие. 2. Подобрать оптимальные комбинации препаратов для сортов с разной корнеобразовательной способностью. 3. Определить влияние внекорневых обработок регуляторами роста на устойчивость укоренённых черенков к неблагоприятным факторам среды при перезимовке. 4. Изучить динамику изменения гормонального баланса черенков при обработке различными препаратами. 2.2 Объекты, условия и методика проведения опыта Исследования проводили в отделе ягодных культур лаборатории плодоводства и в лаборатории регуляторов роста и развития растений РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева в 2004-2005 годах. 2.2.1 Объекты Крыжовник обыкновенный отклоненный, европейский - Grossularia reclinata var. vulgare L. Mill. Сорта Садко сеянец 329-11ЧЛада. Сорт выведен во ВСТИСП г. Москва. Среднепозднего срока созревания.
Рано вступает в плодоношение.
Среднезимостойкий, устойчивый к мучнистой росе и пятнистости. Высокоурожайный до 6 кг с куста. Куст среднерослый, мощный, слабо раскидистый, иногда сжатый, с высокой побегообразовательной способностью.
Побеги прямые, очень длинные, средней толщины. Сорт слабошиповатый шипы редкие, короткие, слабые, верхушки побегов без шипов. На многолетних ветвях шипов нет. Листья среднего размера, ярко-зелённые, осенью красноватого цвета.
Листовая пластинка слабо морщинистая, выпуклая. Зубчики тупые, крупные, подогнутые. Основание прямое. Ягоды 3,4-4,5 г до 7 г округлой или округло-овальной формы, светло-красные, красивые, выровненные, с густым восковым налётом, чётким жилкованием, хорошего столового вкуса, с высоким содержанием пектиновых веществ. Вкус приятный. Дегустационная оценка 4,2 балла. Ягоды отличаются высокими товарными качествами. Транспортабельность высокая. Назначение универсальное.
В компотах ягоды не растрескиваются и не обесцвечиваются. Рекомендуется для выращивания в средней полосе России. Зеленые черенки характеризуются средней укореняемостью. Велюр 929-164 . Происхождение сорта неизвестно. Выведен во ВСТИСП г. Москвы. Среднепозднего срока созревания. Рано вступает в плодоношение. Зимостойкий, устойчивый к мучнистой росе и септориозу. Высокоурожайный до 5 кг с куста. Куст среднерослый, слабо раскидистый, со средней побегообразовательной способностью, бесшипный.
Побеги прямые, тонкие. Листья среднего размера. Листовая пластинка слабо морщинистая. Зубчики тупые, средние. Основание прямое. Ягоды 3,5-5,5 г округлой или округло-овальной формы, красные, выровненные, хорошего столового вкуса, с высоким содержанием пектиновых веществ. Вкус приятный. Дегустационная оценка равна 4,0 баллам. Транспортабельность хорошая. Назначение универсальное. Рекомендуется для выращивания в средней полосе России. Зеленые черенки характеризуются низкой укореняемостью. 2.2.2 Условия Исследования проводили в отделе ягодных культур лаборатории плодоводства на опытной плодовой станции МСХА им. К.А. Тимирязева в условиях открытого и защищенного грунта летние необогреваемые пленочные теплицы, пленочные теплицы, оборудованные автоматизированными туманообразующими установками, ТОУ рис. 1 , а также в лаборатории регуляторов роста и развития сельскохозяйственных растений МСХА. Рисунок 1. Пленочная теплица, оборудованная ТОУ. 2.2.3 Методика Технология выращивания и уход за маточниками общепринятые. Схема посадки в открытом грунте - 1Ч3 м, в защищенном грунте - 0,5Ч1,5 м. В маточных насаждениях отбирали растения умеренной силы роста, без признаков повреждения болезнями, вредителями, низкими температурами, засухой.
Нарезку черенков проводили по общепринятой методике Тарасенко М.Т 1991 . Типы черенков зеленые - однородные по расположению в кроне и на побеге верхушечные - из верхней части побега В качестве регуляторов роста использовали синтетические физиологически активные вещества 6-бензиламинопурин 6-БАП , цитодеф, крезацин, крезивал смесь крезацин мивал 1 1 . За 5-7 дней до черенкования маточники обрабатывали раствором Pix 0,4 мл л. Черенки высаживали в день черенкования на укоренение в теплицу с туманообразующей установкой по вариантам в пластиковые кассеты диаметром 5 см рис. 2 . Субстрат для укоренения - торф перлит 1 1. Черенки укореняли в теплице с ТОУ распыливание в течение 10-15 секунд, через каждые 5-15 минут и более, в зависимости от погодных условий. Рисунок 2. Пластиковая кассета с зелеными черенками крыжовника.
В период массового корнеобразования, через месяц после посадки, проводили внекорневые обработки по следующей схеме 1. контроль 2. 6-бензиламинопурин 6-БАП 20 мг л 3. цитодеф Ц 40 мг л 4. крезацин КЦ 20 мг л 5. крезивал KB 20 мг л 6. крезивал KB 40 мг л 7. 6-бензиламинопурин 6-БАП 20 мг л крезацин КЦ 20 мг л 8. цитодеф Ц 40 мг л крезацин КЦ 20 мг л 9. цитодеф Ц 40 мг л крезивал KB 20 мг л 10. цитодеф Ц 40 мг л крезивал KB 40 мг л. В начале сентября проводили учеты укореняемости и развития черенков. Определяли число и длину корней первого порядка, процент черенков со стандартной корневой сиситемой.
Фотосинтетическую активность определяли газметрическим методом на ИК-газоанализаторе ГИП-10 Аканов Э.Н 1987 . Затем черенки по вариантам высаживали в летнюю теплицу 10Ч50 на доращивание.
Подготовка почвы в питомнике включала внесение органических, комплексных минеральных удобрений, доломитовой муки и тщательное рыхление почвы. Весной следующего года проводили учет перезимовавших укоренившихся черенков.
В 2005 году черенки были отобраны для определения эндогенных фитогормонов в августе, в день внекорневой обработки, через 3 суток и через 7 суток после обработки.
Содержание эндогенных фитогормонов АБК - абсцизовая кислота, ЦТК - цитокинины, ИУК - индолилуксусная кислота определяли в одной навеске. Навеску растительного материала заливали охлажденным 80 -ным водным метанолом в соотношении 1 20 и оставляли при 4 С в холодильнике на две недели.
Затем растительную массу отфильтровывали и метанольный раствор упаривали до водного остатка, который затем подкисляли 1 -ным раствором HCl до рН 2-3. Подкисленный водный остаток очищали 3-кратной экстракцией гексаном в соотношении 1 1. Гексановые экстракты отбрасывали и к водному остатку добавляли 1 -ный раствор антиоксиданта неозон Д - 1 мл на пробу. Все пробы доводили до одного объема дистиллированной водой.
Затем эти растворы трижды экстрагировали на качалке этилацетатом в соотношении 1 1 30 мин при 200 об мин. Этилацетатные вытяжки объединяли, упаривали досуха и оставляли для определения абсцизовой и индолилуксусной кислот. Оставшийся после экстракции водный остаток доводили 20 -ным раствором КОН до рН 8 и два раза экстрагировали бутанолом, насыщенным водой 30 мин при 200 об мин. Бутанольную фракцию упаривали досуха и оставляли для определения цитокининов. Для определения ИУК и АБК сухой этилацетатный остаток растворяли в 2 мл фосфатного буфера рН 8 и добавляли 0,51 г поливинилпирролидона Polyclar AT, Serva, помещали на сутки в холодильник температура 4 С , затем фильтровали.
Элюировали фосфатным буфером и собирали во фракции 1-5 АБК и во фракции 6-10 ИУК объемом 2 мл каждая. Фракции подкисляли 1 -ным раствором HCl до рН 2-3 и два раза экстрагировали диэтиловым эфиром 30 мин при 200 об мин. Полученные пробы анализировали методом ВЭЖХ. Условия хроматографирования для определения ИУК детектор флюоресцентный, Ex 280 нм, Em 350 нм, колонка Микросорб 42Ч50 RP18, время удерживания 5 мин, скорость потока 0,5 мл мин. Условия хроматографирования для определения АБК детектор флюоресцентный, длина волны 254 нм, колонка Микросорб 42Ч50 RP18, время удерживания 6 мин, скорость потока 0,5 мл мин. Для определения цитокининов сухой бутанольный остаток растворяли в 2 мл 80 -ного метанола.
В метанольный экстракт добавляли 0,51 г поливинилпирролидона Polyclar AT, Serva, помещали на сутки в холодильник температура 4 С , затем фильтровали.
Цитокинины элюировали 80 -ным раствором метанола с добавлением концентрированного аммиака и упаривали досуха. Полученные пробы анализировали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии ВЭЖХ , Условия хроматографирования при работе приборов фирмы Biotronic детектор флюоресцентный, длина волны 268 нм, колонка Микросорб 42Ч50 RP18, время удерживания 13 мин, скорость потока 0,6 мл мин. Статистическую обработку всех экспериментальных данных проводили методом дисперсионного анализа по Б.А. Доспехову 1972 . 2.3