Экспресс-диагностика туляремии

Экспресс-диагностика туляремии. Возбудитель туляремии Туляре район Калифорнии Franciella tularensis относится к роду с невыясненным положением в систематике микробов.

Этиологическая природа туляремии была установлена в 1912 году Г.Мак-коем и Ш.Чепиным, а далее подробно изучена Э.Франсисом. Туляремия тяжелая кровяная зоонозная инфекция с природной очаговостью. Основные источники инфекции водяные крысы, ондатры, зайцы, крысы, мыши. Больной человек неконтагиозен и для возбудителя является биологическим тупиком. Передается трансмиссивным путем через клещей, а нередко и контактным, алиментарным или аспирационным путем.

Возбудитель содержит нуклеопротеидный О- и оболочечный белково-липидный Vi-антиген. У перенесших болезнь вырабатывается очень напряженный и длительный иммунитет. Материал для исследования кровь, гной, пунктат бубона, слизь из зева. Реакция агглютинации-рассеивания. Предложена простая, быстрая, высокочувствительная и специфичная реакция агглютинации-рассеивания, для постановки которой используется антительный диагностикум.

Это суспензия темно-коричневого цвета, представляющая собой комплексное соединение шаровидных крупнодисперсных НК-частиц Никитин и Котич и противотуляремийных иммуноглобулинов. Препарат хранят в холодильнике при 4С в течение 2 3 лет. По истечении 3 лет препарат можно ресенсибилизировать, так как НК-частицы высокостабильны. Для постановки реакции агглютинации-рассеивания на тщательно обезжиренное предметное стекло наносят слева каплю исследуемого материала опыт, справа каплю физиологического раствора или гетерологичного микроба контроль.

Затем к каплям добавляют по одной капле НК-антительного туляремийного диагностикума. Перемешивание капель производят путем вращательного движения предметного стекла по часовой стрелке и через 1 5 мин оценивают результаты реакции. Учет и оценка результатов производятся невооруженным глазом, а также с помощью лупы и микроскопа в течение 1 5 мин. При положительной реакции в случае наличия туляремийного микроба или его антигена в исследуемом материале в небольших количествах до 1 3 млн по стандарту ГКИ отмечается феномен рассеивания шаровидных НК-частиц по всей площади капли, что регистрируется под малым увеличением микроскопа, а при концентрации 3 5 млн и более феномен образования темно-коричневых зерен агглютината, видимых невооруженным глазом.

При отрицательной реакции формируется четко очерченное, темно-коричневое пятно или точка в центре капли. Предлагаемая реакция с использованием туляремийного НК-диагностикума предназначена для быстрого выявления специфического антигена при исследовании объектов внешней среды, пищевых продуктов, трупов павших грызунов, а также в тех случаях, когда из-за массивного пророста посторонней микрофлоры или гибели микроба выделение его посевом или через биологическую пробу не удается.

Реакция строго специфична и позволяет обнаруживать туляремийный микроб в небольших количествах 300 тыс. 1 млн. м.к.мл или его антиген. А также ТИФМ и др.