рефераты конспекты курсовые дипломные лекции шпоры

Реферат Курсовая Конспект

Холера

Работа сделанна в 1998 году

Холера - Реферат, раздел Медицина, - 1998 год - Владивостокский Государственный Медицинский Университет Кафедра Микробиологии...

Владивостокский Государственный Медицинский Университет Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Р е ф е р а т Холера Выполнил Новак А.Л. 301 гр. лф Владивосток, 1998. Этиология Возбудитель холеры относится к роду Vibrio. Это изогнутая, грамотрицательная, не образующая споры палочка, имеющая один полярно расположенный жгутик. По чувствительности к специфическому фагу IV тип по Мукерджи различают два биотипа холерного вибриона классический возбудитель азиатской холеры и Эль-Тор. Каждый из них по 0-антигену подразделяется на 3 серологических типа Огава АВ, Инаба АС и редко встречающийся Гикошима АВС, который некоторые авторы рассматривают как вариант серотипа Огава. Н-антиген холерных вибрионов общий для всех серотипов. Холерные вибрионы образуют термолабильный экзотоксин холероген относительная молекулярная масса 82 84 кд. Он состоит из комплекса тяжелой субъединицы А, активирующей аденилатциклазу, и субъединицы В, представленной 4 6 легкими цепями и обеспечивающей связывание холеро-гена с рецепторами эпителиальных клеток тонкой кишки.

Биолого-патогенетические свойства возбудителя Миновав желудочный барьер, вибрионы попадают в тонкую кишку с благоприятной для них средой и заселяют колонизируют поверхность кишечного эпителия.

Процесс колонизации включает в себя хемотаксис вибрионов к слою слизи, покрывающему верхушки ворсинок тонкой кишки, проникновение через эту слизь, адгезию к рецепторам на исчерченной каемке кишечных эпителиоцитов и размножение на поверхности эпителия ворсинок и крипт.

У больных холерой возбудитель может быть обнаружен на всем протяжении желудочно-кишечного тракта. В желудке при рН не менее 5,5 вибрионы не обнаруживаются, в стуле их концентрация достигает 106 107 иногда Ю9. Размножившись до определенной концентрации, возбудитель вызывает заболевание посредством вырабатываемого им холерогена.Основную роль в развитии болезни играют вибрионы, которые находятся в тесной связи со слизистой оболочкой тонкой кишки, так как они выделяют холероген в непосредственной близости от его рецепторов на эпителиальных клетках ган-глиозида GM1. После прикрепления холерного токсина к ганглиозиду субъединица А проходит через мембраны внутрь эпителиальной клетки, где происходит высвобождение фрагмента А1. Последний энзиматически расщепляет НАД и передает его АДФ-рибозную половину на регуляторный протеин аденилатциклазного комплекса, находящегося на внутренней стороне мембраны эпителиоцита.

В результате происходит активация аденилатциклазы, приводящая к повышению содержания цАМФ одного из внутриклеточных стимуляторов кишечной секреции. Связывание холерного токсина с рецепторами на эпителиальных клетках происходит чрезвычайно быстро через 1 3 мин биохимические нзменения в клетке являются необратимыми.

Возникающее заболевание сопровождается потерей огромных количеств жидкости с низким содержанием белка и высокой концентрацией ионов натрия, калия, хлоридов, гидрокарбонатов.

Эта жидкость по составу отличается как от экссудата, так и от транссудата и ближе к составу кишечного секрета. Восприимчивость К холерному вибриону восприимчивы люди всех возрастов. Чаще и тяжелее болеют холерой лица, злоупотребляющие алкоголем или перенесшие резекцию желудка.Кислотность желудочного сока играет важную роль в определении минимальной инфицирующей дозы в опытах на добровольцах при нейтрализации желудочного сока гидрокарбонатом натрия количество вибрионов, необходимых для воспроизведения специфического процесса у человека, уменьшается с 10 до 10Ь микробных клеток. Клинические особенности Инкубационный период при холере длится от 1 до 5 дней. Клинические проявления холеры весьма варьируют, и тяжесть клинического течения определяется степенью обезвоживания.

Заболевание начинается обычно внезапно. Первым клинически выраженным признаком холеры является понос.Типичные холерные испражнения представляют собой водянистую, мутновато-беловатую жидкость с плавающими хлопьями, напоминают по внешнему виду рисовый отвар и не имеют запаха.

Мышечная слабость и судороги в икроножных мышцах ранние симптомы холеры. Вслед за жидким стулом появляется обильная повторная рвота, быстро приводящая к декомпенсированному эксикозу. Кожные покровы становятся цианотичными, холодными на ощупь, черты лица заостряются, глаза и щеки западают.Кожа кистей рук морщинистая руки прачки, голос сиплый, вплоть до афонии. У больных с тяжелой формой холеры отмечается гипо-термия.

Из-за ее постоянства терминальная форма холеры IV степень дегидратации получила название алгидная. Алгид декомпенсированное обезвоживание сопровождается нарушением деятельности основных систем организма сердечно-сосудистой, дыхательной, мочевыделительной.Иммунологическая диагностика Обнаружение антигена. Возбудитель холеры и его специфические антигены корпускулярный, растворимый, холероген выявляют в фекалиях, рвотных массах, крови, дуоденальном и кишечном содержимом, желчном пузыре, в объектах окружающей среды смывы с различных предметов, в воде открытых водоемов, сточных водах, гидробионтах и др. Из современных методов индикации антигенов холерного вибриона наибольшее распространение получила РНГА, чувствительность которой с антительными эритроцитарными диагностикумами составляет 105 101 бактерий в 1 мл или 0,04 мкгмл 0-антигена.

При клинически выраженных формах холеры, когда в испражнениях больных содержится огромное количество вибрионов 10 109 в 1 мл, прямое исследование фильтратов прогретых на водяной бане испражнений в РНГА с антительным диагностикумом позволяет дать ответ о наличии специфического антигена уже через 2- 3 ч. Рвотные массы больных, испражнения вибриононосителей и контактных лиц, содержащие меньшее количество вибрионов, целесообразно исследовать после предварительного 6-часового подращивания на 1 пептонной воде. При исследовании испражнений и рвотных масс оказалось, что лишь в 52 случаев диагноз холеры был подтвержден бактериологически у больных, в анамнезе значительной части которых имелось указание на употребление антибиотиков при появлении первых признаков заболевания.

С помощью РНГА заболевания холерой удалось дополнительно установить еще у 21 больных Поляков И. И. и др 1973. При исследовании испражнений, содержимого кишечника и желчного пузыря умерших от острых кишечных заболеваний, испражнений здоровых лиц и проб воды обычно в практических условиях наблюдали полное совпадение результатов серологического и бактериологического методов исследования, что позволяет считать РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом достаточно надежным экспресс-методом при массовом обследовании на холеру.

Некоторыми авторами при индикации специфических антигенов холерного вибриона отдается предпочтение РТНГА. Холерные диагностикумы для этой реакции готовят из бараньих или человеческих О I группы эритроцитов, сенсибилизированных холерными 0-антигенами.

Чувствительность метода 104 106 бактерий в 1 мл при исследовании нативных испражнений и 10 105 после предварительного подращивания.

Минимальное количество 0-антигена, выявляемого с помощью РТНГА, равно 0,04 0,16мкгмл.РТНГА дает положительные результаты у 91 больных холерой, у 40 ре-конвалесцентов и 12 контактировавших с больными, 0-антиген холерного вибриона может быть определен через 1 мес от начала заболевания в фекалиях у всех переболевших людей, а спустя 5 6 мес у половины обследованных, что, по-видимому, свидетельствует о более длительной экскреции специфического антигена в нежизнеспособной форме.

Совпадение результатов бактериологического метода и РТНГА, по различным данным, наблюдается в 63 100 случаев.Имеющиеся материалы дают основание считать целесообразным широкое испытание РТНГА. Положительную оценку при диагностике холеры получил МФА, позволяющий выявлять холерные вибрионы при содержании их не менее 10 в 1 мл. Использовать МФА целесообразно при исследовании нативного материала от больных и трупов.

У больных холерой положительные результаты с помощью МФА были получены в течение 2 ч в 70 90 наблюдений при полном совпадении с результатами бактериологического анализа. Применение МФА при исследовании воды и смывов возможно лишь после предварительного подращивания или концентрирования материала. Представляется перспективным использование иммунотушевой окраски холерных вибрионов.Для выявления антигенов холерного вибриона применяют агрегат гемаг-глютинационную пробу АГГ. В основе е лежит использование для агрегации и фиксирования белков иммунной сыворотки на эритроцитах химического вещества из группы диазосоединений в виде препарата диазоль черного С. Эритроциты, сенсибилизированные агрегированными белками холерной 0-сыворотки, обладают высокой специфичностью и чувствительностью.

С их помощью удается определить 0,01 0,005 мкгмл цельного растворенного антигена, приготовленного по методу Буавена, и 4000 480 000 клеток холерного вибриона в микробных взвесях.

Это позволяет считать АГГ одним из наиболее чувствительных иммунологических методов, который оправдал себя при обследовании людей. С помощью АГГ 0-антиген холерного вибриона обнаружен в 88,2 больных холерой и 78,3 вибриононосителей, причем в титрах 1 40 и выше 0-антиген определен у 76,1 больных и у 57,1 вибриононосителей. Серологически активный компонент эндотоксина обнаруживают в высоких титрах, чаще у тяжелых больных и в первые 3 5 дней болезни.В период реконвалесценции количество антигена в сыворотке крови снижается, но у 33 больных он сохраняется до 20 25 дней Покровский В. И Малеев В. В 1978. Для определения холерогена, помимо биопроб, используют и иммунологические методы РНГА и АГГ. В опытах с бесклеточными супернатантами культур холерных вибрионов порог чувствительности обоих методов составлял 0,01 0,005 мкгмл.

Антительный ответ. Инфицирование человека холерным вибрионом ведет к местному и системному ответу.Клинически выраженное заболевание холерой сопровождается ростом уровня сывороточных антимикробных агглютинирующих и вибриоцидных и токсиннейтрализующих антител, как правило, уже к концу 1-й недели после появления симптомов болезни.

Агглютинины к холерному вибриону к 4-му дню заболевания выявляют у 35,7 больных, на 8-й день практически у всех 98,6. Уровень агглютининов достигает максимума на 2-й неделе заболевания на 11 15-й день титры, равные 320 и выше, регистрируют у 71 больных, а затем резко падает.Титры вибриоцидных антител также увеличиваются к 8 10-му дню заболевания и после 3 нед иногда несколько раньше начинают снижаться, достигая первоначального уровня через 2 7 мес. У детей до 4 лет падение титра вибриоцидных антител происходит быстрее, чем в старшей возрастной группе 5 14 лет, достигая исходного уровня уже через 3 мес. Динамика титров токсиннейтрализующих антител имеет сходный характер появляясь в конце 1-й недели, они достигают максимума между 2-й и 3-й неделями, а с 21-го дня снижаются.

Содержание сывороточных IgM и I gG на протяжении болезни сопоставимо с аналогичными показателями в контрольной группе, хотя есть данные об увеличении уровня IgM в острой стадии и снижении его в период реконвалесценции.

Некоторые исследователи не установили разницы в содержании IgA при поступлении больных в стационар и в стадии реконвалесценции другие отмечают повышение его уровня у переболевших Покровский В. И Малеев В. В 1978 Адамов А. К 1981. Сказанное не дает достаточных оснований утверждать, что изменение уровня сывороточных иммуно- глобулинов при холере носит специфический характер.

Специфическая активность иммуноглобулинов различных классов зависит от формы и длительности инфекционного процесса при холере. Антитела в сыворотке крови переболевших относятся, преимущественно к IgM. У вибриононосителей продуцируются, наоборот, высокоактивные IgG-антитела. Активность IgA-антител в сыворотке крови вибриононосителей незначительно выше по сравнению с больными.Чем тяжелее протекает заболевание, тем выше активность продуцируемых антител, относящихся к иммуноглобули-нам класса М, и ниже активность IgG-антител.

Самым простым и легко воспроизводимым методом определения антимикробных антител является РА с живыми культурами холерного вибриона, но чувствительность этой реакции ограничена. Диагностические титры 1 40 и выше появляются, как правило, к концу 1-й недели заболевания, но лишь у 19,7 больных холерой.Исследование парных сывороток, полученных с интервалом 7 10 дней при наличии 4-кратного и более нарастания титров антител увеличивает частоту положительных результатов до 89,6 Гораздо большее значение придается в настоящее время выявлению виб-риоцидных антител.

Вибриоцидный тест ВТ является более чувствительным в сравнении с РА, давая высокие титры, особенно у реконвалесцентов холеры до 1 100 000. Нужно, однако, иметь в виду, что вибриоцидные антитела титры до 1 1000 могут обнаруживаться и в сыворотках невакцинированных здоровых людей, никогда не болевших холерой, и у лиц, инфицированных бруцеллами, Yersinia enterocolitica 09, цитробактером.

Агглютинины относительно меньше чувствительны к такой неспецифической стимуляции. Как и РА, ВТ позволяет регистрировать подъем специфических антител 4-кратный и более у 90 95 больных с бактериологически подтвержденным диагнозом холеры Watanabe Y 1974. В качестве антигена в РА и ВТ используют холерные вибрионы обоих серотипов.При необходимости пользоваться одним предпочтение отдают серотипу Огава, который чаще, чем Инаба, вступает в перекрестные реакции с гетерологичным серотипом холерного вибриона и реже дает неспецифические реакции с микробами других семейств.

Хотя эти серологические реакции являются наиболее чувствительными, необходимость применения в них живых вибрионов создает определенные трудности при массовых обследованиях.Поэтому наибольшего внимания заслуживают антигенные эритроцитарные диагностикумы, которые позволили внедрить в практику РНГА и РТНГА. Эти реакции обладают достаточной чувствительностью и специфичностью, позволяя обнаруживать антитела у больных и переболевших холерой в титрах 1 640 1 1280. Наблюдаемые различия в титрах при параллельном использовании РНГА и ВТ обусловлены главным образом различиями в физико-химической природе выявляемых антител IgG-антитела более эффективно обнаруживают бактерицидным методом ВТ, IgM-антитела в РНГА. Для выявления антитоксинов в сыворотках применяют РН, результаты которой учитывают по отсутствию холерогенного эффекта в перевязанной петле тонкой кишки взрослых кроликов, в кишечнике крольчат-сосунков, на коже морских свинок кроликов в опытах in vivo и по отсутствию цитото-нического действия в культуре клеток СНО и Y-1 в опытах in vitro.

Наиболее стандартизованы кожная проба и модель перевязанной кишечной петли.

У 73 больных в эндемичном по холере районе с помощью кожной пробы выявлено диагностически значимое 9-кратное и большее увеличение титров токсиннейтрализующих антител.

Частота сероконверсии вибриоцидных антител и агглютининов в этой же группе больных была выше и составила 98 и 88 соответственно Watanabe Y 1974. Анализ титров антитоксических антител при диареях нехолерной этиологии показал, что в пробах сывороток, взятых в острой стадии болезни, они колебались от 10 до 270, но значимое нарастание титров в период рекон-валесценции было отмечено лишь у 2,5 больных.Обладая высокой специфичностью, метод определения токсиннейтрализующих антител несколько уступает по чувствительности методам определения вибриоцидных и агглютинирующих антител. Высокой разрешающей способностью обладают ИФМ и РИМ, использующие меченный энзимом или радиоактивным веществом антиген и позволяющие определять связывание 0,001 1 нг иммунного белка исследуемой сыворотки.

Титры антитоксических антител, регистрируемые ИФМ, выше титров, которые определяются с помощью внутрикожного теста, что обусловлено различиями в выявляемых классах иммуноглобулинов кожный тест документирует нейтрализующую активность только IgG-антител, вероятно, в силу их большей авидности, в то время как ИФМ регистрирует и уровень IgM-антител.

Таким образом, изучение титров и динамики нарастания циркулирующих антител в сыворотках крови больных при холере расширяет возможности ее лабораторной диагностики. Ретроспективный диагноз холеры с большей степенью вероятности может быть установлен в РА и ВТ, но лишь на основании изучения парных сывороток больных.Определение уровня антитоксина полезно в тех случаях, когда необходимо исключить предшествующую специфическую вакцинацию, так как антитела этого типа не индуцируются существующими холерными вакцинами и очень редко встречаются у здоровых людей.

Однако подъем антитоксических титров у больных на фоне диагностически значимой сероконверсии вибриоцидных и агглютинирующих антител повышает достоверность серологической диагностики холеры.Возникновение патологического процесса, вызванного холерными вибрионами, ведет к появлению антител к этим микроорганизмам и во внешних секретах пищеварительного тракта интестинальной жидкости ко-проантитела и слюне.

Отличительной чертой динамики копроантител является их раннее появление у 72 на 2 3-й день болезни, у 100 на 4-й день и быстрое исчезновение из кишечного содержимого.В интестинальной жидкости выздоравливающих от холеры людей антитела против вибрионов относятся к иммуноглобулинам A, G и М, но преобладающими являются SIgA-антитела, количество которых у больных холерой возрастает примерно в 30 раз, но составляет около 4 того, что наблюдается у больных диарейными заболеваниями нехолерной этиологии.

Последнее связано с адсорбцией SIgA на холерных вибрионах, что приводит к стойкому снижению количества вибрионов в стуле больных и сокращает продолжительность их выделения из кишечника.Концентрация этого иммуноглобулина и время его появления в кишечном содержимом не связаны с сывороточным IgA. Количество IgG- и IgM-антител в кишечном содержимом реконвалесцентов холеры также увеличивается в 5 7 раз, но в фекалиях антитела класса IgM не обнаруживают. Для обнаружения антител в интестинальной жидкости и фекалиях больных могут быть использованы ВТ, РИМ с холерными антигенами, меченными радиоактивным йодом, непрямой флюоресцентно-серологический метод.

Нарастание специфических антител указывает на наличие заболевания холерой. Однако кишечно-копрологическая диагностика холеры еще недостаточно разработана.В слюне больных и вибриононосителей повышен уровень IgA и IgG. Одновременно появляются и специфические антитела агглютинины, содержание которых у больных холерой выше, чем у виброноносителей 30 АЕ и 14 АЕ соответственно.

Диагностический титр специфических агглютининов слюны может оказаться значительно ниже сывороточного. Определению состояния повышенной чувствительности при холере в реакции ГЗТ посвящены единичные работы.Описаны положительные аллергические реакции у 89 переболевших холерой и вибриононосителей при отсутствии их в контрольной группе в ответ на внутрикожное введение аллергена из убитых холерных вибрионов.

Однако имеющихся данных недостаточно, чтобы высказать суждение об аллергической перестройке организма при холере или о диагностической значимости применяемых тестов.Иммунитет После болезни у человека вырабатывается выраженный иммунитет, который сохраняется длительное время, поэтому случаи повторных заболеваний холерой крайне редки. Опыты на добровольцах показали, что в течение 3 лет срок наблюдения люди, переболевшие холерой в результате экспериментального заражения, оставались устойчивыми к повторному заражению холерными вибрионами Levine M. et al 1981. Основная роль в иммунитете к холере принадлежит антителам, продуцируемым местно в кишке, хотя определенный вклад в защиту вносят циркулирующие антитела при высоких их концентрациях, когда они проникают в просвет кишки из крови, что подтверждено экспериментами на животных. Более высокий уровень защиты наблюдается при синергическом действии антибактериальных и антитоксических антител в кишке.

Основная роль антибактериальных SIgA состоит в том, чтобы препятствовать хемотаксису вибрионов к эпителию и прилипанию их к поверхности слизистой оболочки кишечника в результате блокирующего действия на структуры для прилипания лиганды на поверхности бактериальных клеток.

Снижение колонизации и адгезии холерных вибрионов способствует более быстрому их выведению из кишечника при перистальтике и тем самым уменьшает возможность приживления возбудителя в кишечном тракте.

Действие кишечных IgA-антител против холерогена обусловлено главным образом блокадой его В-субъединицы, что препятствует связыванию токсина с ганглиозидом GM1 на поверхности эпителиоцитов.Антитела, блокирующие токсический сайт на А-субъединице холерогена, оказывают меньшее защитное действие. Список использованной литературы 1. Л.Б. Хазенсон, Н.А. Чайка Иммунологические основы диагностики и эпидемологического анализа кишечных инфекций.

Медицина,1987. 2. В.Д. Тимаков, В.С. Левашев, Л.Б.Борисов Микробиология. Медицина, 1983. 3. Лекция по теме. 4. Методическая разработка кафедры.

– Конец работы –

Используемые теги: Холера0.037

Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ: Холера

Что будем делать с полученным материалом:

Если этот материал оказался полезным для Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:

Еще рефераты, курсовые, дипломные работы на эту тему:

Холера
Спор и капсул не образует. Располагается параллельно, в мазке напоминает стаю рыб. Грамотрицательный, хорошо окрашивается анилиновыми красками.Аэроб… Разжижают желатину, образуют индол. Разлагают до кислот (без газа) сахарозу,… Вибрионы содержат термостабильные О-антигены (соматические) и термолабильные Н-антигены (жгутиковые). Последние…

0.026
Хотите получать на электронную почту самые свежие новости?
Education Insider Sample
Подпишитесь на Нашу рассылку
Наша политика приватности обеспечивает 100% безопасность и анонимность Ваших E-Mail
Реклама
Соответствующий теме материал
  • Похожее
  • По категориям
  • По работам