Моноклокальные антитела и ДНК-или РНК-пробы. - Лекция, раздел Медицина, ПРЕДМЕТ И ЗАДАЧИ МЕДИЦИНСКОЙ МИКРОБИОЛОГИИ И ЕЕ ЗНАЧЕНИЕ В ДЕЯТЕЛЬНОСТИ ВРАЧА Моноклональные Антитела — Продукты В-Гибридомных Клеток — Используют Для Диаг...
Моноклональные антитела — продукты В-гибридомных клеток — используют для диагностики различных заболеваний. Обладая высокой специфичностью действия, они обеспечивают идентификацию не только вида возбудителя, но и его серотипа. С помощью моноклональных антител можно тестировать различные гормоны, метаболиты, белковые факторы. Наиболее быстрый метод индикации основан на применении антител, иммобилизованных на мембранных электродах — аналогах ферментных биосенсоров. Они позволяют диагностировать беременность, выявлять предрасположенность к диабету, ревматоидному артриту (J. Col-lins et al., 1986), идентифицировать наследственные заболевания, сопровождающиеся утратой тех или иных ферментов и других белковых компонентов. Моноклональные антитела широко используют для диагностики рака и определения его форм.
Трудности связаны с тем, что специфических «раковых» антигенов, по-видимому, не бывает, и характерные для злокачественно переродившейся клетки детерминанты могут быть с некоторой, пусть небольшой, вероятностью обнаружены и в здоровых клетках. Перспективна диагностика рака при помощи моноклональ-ных антител к вырабатываемым злокачественной опухолью особым гормонам, аутокринам, ведущим к самостимуляции роста раковых клеток.
Моноклональные антитела имеют не только диагностическое, но и лечебное значение. При аутоиммунных заболеваниях, когда иммунные клетки «ополчаются» против собственных органов и тканей, моноклональные антитела соответствующей специфичности могут связывать антитела, наносящие вред организму больного. Для лечения рака предлагают использовать моноклональные антитела, конъюгированные с токсичными для раковых клеток соединениями. Моноклональные антитела доставляют яд точно по адресу, избегая поражения здоровых клеток. Поэтому к моноклональным антителам можно присоединять очень сильные токсины, например рицин — яд из клещевины, одной молекулы которого достаточно для поражения одной клетки. В современной фармацевтической промышленности моноклональные антитела используют для очистки лекарственных препаратов.
Диагностическое значение имеют короткие фрагменты ДНК и РНК, несущие радиоактивную или иную метку, так называемые ДНК/РНК-пробы. С их помощью можно установить наличие в организме определенных типов нуклеиновых кислот, соответствующих болезнетворным агентам, злокачественным опухолям, а также проверить геном пациента на наличие у него тех или иных генетических аномалий. Метод основан на комплементарном взаимодействии проб с участками ДНК или РНК, выделенными из исследуемых клеток и фиксированными на носителе. Взаимодействия нуклеотидных цепочек пробы с ДНК (РНК) из образца регистрируют по радиоактивной метке или иным способом.
Моноклональные антитела и ДНК/РНК-пробы используют для диагностики болезней животных и растений. В частности, с помощью этих проб проводят индикацию зараженности картофеля вирусом. Диагностические средства из арсенала биотехнологов предлагают применять для быстрого определения пола у цыплят.
Все темы данного раздела:
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В МИКРОБИОЛОГИИ
Объектомизучения микробиологии являются микроорганизмы (микробы) - мельчайшие невидимые одноклеточные и многоклеточные существа, которые по многообразию не уступают представителям животного или рас
Методы исследования в микробиологии
Различают следующие основные методы: микроскопический, микробиологический, экспериментальный, иммунологический.
1. Микроскопический - изучение микробов в окрашенном и неокрашенном (нативно
Световой микроскоп с иммерсионной системой
Для изучения микробов в микроскопе требуется увеличение примерно в 1000 раз. Поэтому используется микроскопы с иммерсионной системой ("иммерсио" – погружение) В состав иммерсионной систем
Фазово-контрастный микроскоп
Эта разновидность светового микроскопа позволяет изучать структуру живых неокрашенных микробов (прозрачных объектов). При прохождении света через неокрашенные микробные клетки, в отличии от окрашен
Люминесцентный микроскоп
Принцип работы этого микроскопа основан на явлении люминесценции. Для получения изображения объектов их обрабатывают флюорохромами, которые при возбуждающем облучении коротковолновой частью спектра
Приготовление препарата для микроскопического исследования
Окраска по Граму.
I этап - приготовление мазка.
Предметное стекло обжигают в пламени газовой горелки. Восковым карандашом отмечают пределы будущего мазка в виде окружности диаметр
Структура бактериальной клетки. Обязательные (постоянные) структурные элементы
Обязательными структурными элементами бактерий являются: цитоплазма с нуклеоидом и рибосомами, цитоплазматическая мембрана (ЦПМ), клеточная стенка.
Цитоплазма прокариотов в отличие
Необязательные (непостоянные) структурные элементы.
К ним относят: капсулу, спору, включения, жгутики, пили.
Капсула представляет собой поверхностно расположенное слизистое образование, которое по химической природе чаще является пол
Химический состав бактериальной клетки.
(свободная и связанная), нуклеиновые кислоты ДНК и РНК), белки, углеводы, липиды и минеральные соли. Свободная вода, являясь универсальной дисперсионной средой, участвует в метаболизме, связанная в
АНТИБИОТИКИ . МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ХИМИОТЕРАПИИ
Химиотерапией называют лечение инфекционных, паразитарных заболеваний или опухолей химиотерапевтическими средствами /химиопрепаратами/. Химиотерапевтические препараты /ХТП/ - это химические веществ
ГЕНЕТИКА БАКТЕРИЙ
Микроорганизмы послужили удобной моделью для генетических исследований, приведших к важнейшим открытиям 20 века в биологии: показано, что материальным носителем (основой) наследстве
Организация генетического материала бактерий.
Геном бактерий (совокупность всех генов) представлен хромосомой, плазмидами и транспозируемыми элементами (транспозонами), причем обязательным генетическим элементом является только хромосома. Хром
Изменчивость микроорганизмов.
Различают генотипическую (наследуемую) изменчивость и фенотипическую (ненаследуемую, модификационную). Наследуемая изменчивость осуществляется в виде мутаций и рекомбинаций.
Мутаци
Роль микроба в инфекционном процессе.
Возбудитель инфекции должен быть патогенным или потенциально патогенный микробом. Патогенность /болезнетворность/ - генетически детерминированная потенциальная способность микробов данного вида при
Виды и Формы иммунитета.
Различают, иммунитет тканевой /обусловливает несовместимость тканей/ и антиинфекционный / противомикробный и противопаразитарный /.
Антиинфекционный иммунитет включает: естественную резист
Механизмы естественной резистентности
Главным фактором видовой невосприимчивости и невосприимчивости при генетических отклонениях является клеточная ареактивность. Клеточная, ареаятивноеть обусловлена отсутствием в организме клеток или
Общефизиологические факторы.
1. Общая реактивность организма /интегральный показатель, на который
оказывают влияние, например, интенсивность обмена веществ, гормональный фон процессы торможения и возбуждения участков
АНТИГЕНЫ АНТИТЕЛА
Специфические механизмы защиты /приобретенный иммунитет, иммунный ответ/ предполагают распознавание клетками иммунной системы генетически чужеродных субстанций /антигенов/ и специфическое реагирова
Реакции иммунитета
Реакциями иммунитета /серологическими реакциями/ называют действие между антигенами и антителами, ведущее к образованию иммунного комплекса /антиген-антитело/. Они протекают, как правило, в 2 фазы
АЛЛЕРГИЯ
Состояние повышенной чувствительности организма к различным веществам, возникающие в результате предшествующего контакта с ними называется аллергией (синонимы: сенсибилизация, гиперчувствительность
Анафилактический шок
Развивается при повторном введении сыворотки и других препаратов. Первое введение аллергена называют сенсибилизирующим. Через 1-3 недели после него в организме накапливаются анафилактические антите
Сывороточная болезнь
Развивается при первичном и при вторичном введении чужеродных сывороток. При первичном введении развивается через 10-14 дней. Чужеродная сыворотка сохраняется в организме до 3 недель. За это время
Атопии.
Это повышенная чувствительность к веществам пищевого, растительного и лекарственного происхождения, у лиц с наследственной предрасположенностью. Вещества, вызывающие атонии, обычно являются простым
Инфекционная аллергия.
При многих инфекционных заболеваниях развивается повышенная чувствительность к повторному внедрению в организм микробов того же вида. После первого попадания микробов в организме появляются и накап
Антибиотики.
Антибиотики — это специфические продукты жизнедеятельности, обладающие высокой физиологической активностью по отношению к определенным группам микроорганизмов и к злокачественным опухолям, избират
Гормоны.
Биотехнология предоставляет медицине новые пути получения ценных гормональных препаратов. Особенно большие сдвиги произошли в последние годы в направлении синтеза пеп-тидных гормонов.
Рань
Интерфероны, интерлейкины, факторы крови.
Интерфероны выделяются клетками человека и животных в ответ на инфици-рование вирусами. Они обладают антивирусной активностью. Механизм действия интерферонов до конца не выяснен. П
Рекомбинантные вакцины и вакцины-антигены.
Вакцинация — один из основных способов борьбы с инфекционными заболеваниями. Путем поголовной вакцинации ликвидирована натуральная оспа, резко ограничено распространение бешенства, полиомиелита
Ферменты медицинского назначения.
Многообразно применение ферментных препаратов в медицине. Их используют для растворения тромбов, лечения наследственных заболеваний (вместо отсутствующих эндогенных ферментов), удаления не-
ЭНТЕРОВИРУСЫ
Длительное сосуществование популяций человека и микроорганизмов в процессе эволюции привело к формированию больного количества видов микробов, способных вступать в паразитическое
Вирусы гриппа.
Возбудитель гриппа относится к РНК-содержащим вирусам, семейству ортомиксовирусов. Имеет средние размеры, шаровидную (иногда нитевидную) форму. Нуклеиновая кислота его однонитчатая, состоит из 3 ф
Вирус гепатита А.
Возбудитель гепатита А относится к семейству Пикорнавирусов, роду Энтеровирусов. Это РНК-содержащий мелкий вирус с кубическим типом симметрии, без суперкапсида. Hе обладает гемагглютинирующими свой
ВОЗБУДИТЕЛИ ВИЧ И ГЕРПЕСВИРУСЫ
Заболевание известно с 1981 г, когда в США у двух мужчин возникла пневмоцистная пневмония, характерная для больных с иммунодефицитами. При обследовании у них установлено практически полное отсутс
Стафилококки.
Стафилококки (Staphylococcus aureus, S. epidermidis) - потенциально-патогенные микробы, способные вызвать различные воспалительные, гнойно-септические, а также кишечные и респираторные заболеван
Стрептококки.
Возбудителями стрептококковой инфекции являются Streptococcus pyogenes - потенциально-патогенный микроорганизм, с которым связано возникновение гнойно-септических и ненагноительных заболеваний. Это
Синегнойная палочка.
Синегнойную инфекцию вызывает потенциально-патогенный микроб из рода псевдомонад - синегнойная палочка (Pseudomonas, aeruginosa) - Гр- аспорогенная подвижная палочка длиной 1,5 -
3,0 мкм.
Возбудитель туберкулёза.
Возбудители туберкулёза — микобактерии (Mycobacterium tuberculosis, Mucobacteriuin bovis) - Гр+ тонкие изогнутые палочки без спор, капсул и жгутиков, из-за особенностей химического состава (повыше
Возбудитель дифтерии.
Коринебактерии дифтерии (Corynebacterium diphtheriae) - Гр+ тонкие слегка изогнутые палочки, в препаратах располагающиеся под углом друг к другу. Спор и капсул нет. (в организме образуют микрокапсу
Возбудитель коклюша.
Коклюш вызывает бордетелла пертуссис (Bordetella pertussis) - Гр- полиморфная палочка без спор и жгутиков. В организме образует капсулу. На простых средах не растет; её выращивают на картофельно-г
ВОЗБУДИТЕЛИ КРИПТОСПОРИДИОЗА, КАМПИЛОБАКТЕРИОЗА
Кишечные инфекции, наряду с острыми респираторными заболеваниями, одна из главных причин инфекционной заболеваемости в мире. Кишечные инфекции – причина 1/3 всех случаев смерти дете
B) DNA-containing
- family Adenoviridae
genus Coronavirus
3. Protozoa:
species:
Entamoeba histolytica
Giardia intestinalis
Возбудители дизентерии.
Дизентерию вызывают шигеллы, энтеробактерии рода Shigella (S.dysenteriae, S. flexneri, S.sonnei, S.boydii) - Гр- неподвижные палочки длиной 2-3 мкм. Спор и капсул не образуют. Имеют фимбрии (адгез
Возбудители эшерихиозов.
Эшерихии - типичные представители семейства энтеробактерий (Enterobacteriaceae). Род Escherichia представлен 1 видом (E.coli). Эшерихиозы вызывают патогенные варианты E.coii - Гр-палочки длиной 2-6
Роль других эшерихий.
Условно-патогенные E.coli способны вызвать эндогенные и экзогенные гнойно-воспалительные процессы различной локализации, сепсис; они, как правило, возникают в результате ослабления иммунной систе
Возбудитель ботулизма.
Ботулизм вызывают клостридии (Clostridium botulinum) - крупные спорообразующие Гр+ палочки. Овальная спора придаёт клетке сходство с теннисной ракеткой. Подвижен (перитрих), капсулу не образует. О
Возбудители сальмонеллезов.
Сальмонеллёзы вызывают многочисленные представители рода Salmonella - S. typhimurium, S.enteritidis, S.choleraesuis, S.haifa, S.anatum, реже - другие. Они отличаются от возбудителей тифо-паратифозн
Возбудитель сифилиса.
Сифилис вызывает Treponema pallidum - бледная трепонема. Эта спирохета имеет 8-12 равномерных завитков и окрашивается по Романовскому-Гимза в бледно-розовый цвет. В окрашенных препаратах она неотл
Возбудитель гонореи.
Нейссерии гонореи, гонококки (Neisseria gonorrhoeae) - Гр-кокки, имеющие вид кофейного зерна, располагаются попарно (диплококки). Спор и жгутиков нет. Имеют пили, обеспечивающие адгезию. В организ
ПРОБЛЕМЫ ВНУТРИБОЛЬНИЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ
В настоящее время для медицины серьезной проблемой остаются внутрибольничные инфекции (ВБИ). Для обозначения инфекционных болезней (ИБ), возникающих в условиях стационара, используются различные те
Принципы клинической микробиологии.
Получив знания относительно методов микробиологической диагностики, лечения и профилактики основных инфекций человека, а также об их возбудителях, будущему врачу необходимо, используя эти знания, о
Новости и инфо для студентов