1.0,3 мл сыворотки вносят в обычную химическую пробирку, которую затем погружают в кипящую водяную баню на 2 мин.После охлаждения в нее добавляют 3 мл дистиллированной воды и сгусток экстрагируют при 370С в течение часа. Весь объем жидкости вносят в кювету спектрофотометра и измеряют оптическую плотность при длине волны 289 нм.
2. Концентрацию мочевой кислоты находят с помощью калибровочной кривой, для построения которой из основного стандарта (200 мг/мл) делается промежуточное разведение (концентрации 100 мг/мл) путем разбавления основного раствора дистиллированной водой в 2 раза.
Полученный раствор мочевой кислоты используется для приготовления рабочих разведений по схеме.
Таблица. Данные для построения калибровочной кривой.
| № проб | Основной раствор 100 мг/л (мл) | Вод дистил-лированная (мл) | Содержание мочевой кислоты в растворах стандарта | |||
| Мг/мл | г/л | Моль/л | Мкмоль/л | |||
| 1. | 0,5 | 9,5 | 0,05 | 0,029 | 29,5 | |
| 2. | 1,0 | 9,0 | 0,10 | 0,059 | 59,0 | |
| 3. | 2,0 | 8,0 | 0,20 | 0,118 | 118,0 | |
| 4. | 3,0 | 7,0 | 0,30 | 0,177 | 177,0 | |
| 5. | 4,0 | 6,0 | 0,40 | 0,236 | 236,0 | |
| 6. | 5,0 | 5,0 | 0,50 | 0,295 | 295,0 | |
| 7. | 6,0 | 4,0 | 0,60 | 0,354 | 354,0 |
Из каждого рабочего разведения отбирают по 0,3 мл и вносят в пробирку, в которую согласно методике внося 3,0 мл дистиллированной воды. После перемешивания проб измеряют их оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 289 нм. Строят калибровочную кривую и рассчитывают результат.