В результате реакции креатинина и пикриновой кислоты в щелочной среде образуется окрашенное соединение (оранжево-красное) – таутомер пикрата креатинина. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации креатинина. Определение креатинина имеет большое значение для диагностики состояния печени и почек. Креатинин – это продукт дефосфорилирования и дегидратации креатина.
В настоящее время общепринятой методикой определения креатинина в организме человека является реакция его в щелочной среде с пикриновой кислотой, предложенная химиком Яффе в 1886 году. Для целей медицины эту реакцию внедрил в 1904 году Фолин.
Ход этой реакции следующий: в щелочной среде креатинин ионизируется, и анион креатинина взаимодействует с пикриновой кислотой по механизму нуклеофильного ароматического замещения:
Образующийся аддукт красно-оранжевого цвета, имеющий e = 104 при λ= 480 – 490 нм, в щелочной среде неустойчив, постепенно переходит в соединение:
Надо отметить, что конечно-точечный вариант определения креатинина не всегда эффективен, так как продукт разлагается во времени, и трудно выбрать время, когда необходимо анализировать. Кинетический же вариант дает хорошие результаты, и признан во всем мире.