Методика выполнения работы
В колбу на 100 мл внести пипеткой 20 мл раствора крахмала и 8 мл буферных растворов для создания определенного значения рН. Количество вносимых буферов приведено в таблице 11.
Таблица 11. Количество вносимых буферов
| Растворы | Объем вносимых буферов, мл при рН | ||||
| 4,0 | 5,0 | 6,0 | 7,0 | 8,0 | |
| СН3СООН 1 М СН3СООNa 1 М Na2НРО4 1/15 М КН2РРО4 1/15 М | 6,9 1,1 – – | 2,7 5,3 – – | 0,4 7,6 – – | – – 4,8 3,2 | – – 7,6 0,4 |
Смесь крахмала с буфером поместить на водяную баню и нагревать при температуре 30о, 40о, 50о в течение 5 – 8 минут. Затем в колбу (не вынимая из бани) добавить 2 мл солодовой вытяжки или раствора фермента. Перемешать. Записать время внесения фермента (начало гидролиза).
Через 10, 20, 30, 45 минут отобрать по 1 мл гидролизной смеси, внести ее в пробирку с 5 мл йодного раствора, встряхнуть. Когда проба гидролизата дает винно–красную окраску с йодным раствором, гидролиз закончен.
Декстринирующую активность (А, ед/г) определяют по формуле:
А = 
; где
0,4 – навеска крахмала в 20 мл раствора;
60 – перевод минут в часы;
– объем раствора фермента или экстракта, взятый для гидролиза , мл;
– время декстринизации, мин;
– содержание фермента или солода в 1 мл раствора или экстракта, г.
Пример расчета. В качестве источника фермента α–амилазы был использован солод. Для экстракции была взята навеска 4 г и добавлено 100 мл дистиллированной воды, что соответствует содержанию солода в 1 мл экстракта 0,04 г. Объем экстракта для гидролиза крахмала составил 2 мл. время окончания гидролиза – 20 мин. Следовательно декстринирующая активность солода равна:
