а) Приготовление срезов
1. Взятие и фиксация материала | Для предотвращения аутолиза кусочки, вырезанные из органов, погружают в фиксатор (формалин, метанол и др.) |
2. Обезвоживание и уплотнение (заливка) материала | Образцы обезвоживают, проводя по батарее растворов этанола с возрастающей концентрацией, а также через смесь этанола с ксилолом и затем - через чистый ксилол. Образцы помещают в смесь ксилола с парафином и в чистый жидкий парафин. При охлаждении он затвердевает. |
3. Приготовление срезов | Из парафина вырезают блок с образцом. На микротоме с него срезают слои по 7-10 мкм и крепят к предметным стёклам |
4. Окрашивание срезов | Срезы переводят в водную среду (через батарею растворов этанола с убывающей концентрацией), красят и промывают. |
5. Заключение срезов в консервирующую среду | Наконец, срезы опять возвращают в гидрофобную среду – с помощью батареи р-ров этанола с возрастающей конц., капают на них консервирующую среду – напр., канадский бальзам -- и накрывают покровными стеклами. |
б) В случае приготовления мазков,отпечатков и тотальных, или плёночных, препаратов этапы 2 и 3 из перечисленных опускаются.