Работа 2. Подсчет эритроцитов пробирочным методом
Ход работы. Берут кровь из вены или из капилляра пальца. К счетной камере притирают покровное стекло до появления ньютоновских колец и рассматривают сетку под микроскопом. В центрифужную пробирку набирают 4 мл 3% раствора NaCl. Пипеткой от гемометра Сали или другой берут 20 мм3 крови и, обтерев кончик ее ватой, быстро выдувают кровь в пробирку. Не вынимая пипетки из раствора, споласкивают ее раствором. После этого содержимое пробирки перемешивают. Затем разбавленной кровью заполняют подготовленную счетную камеру. Заполнив камеру, ставят ее под микроскоп и считают эритроциты в 5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких, по диагонали (слева сверху, вправо вниз). Подсчет ведут в затемненном поле зрения (окуляр ´ 7, объектив ´ 40). Подсчитывают все эритроциты внутри квадрата и на верхней и левой его сторонах (правило Егорова).
Затем определяют количество эритроцитов в 1 мкл по формуле:
, где
X – искомое число эритроцитов;
Э – число эритроцитов в 5 больших квадратах;
200 – разведение крови;
4000 – учитывая, что объем камеры над одним маленьким квадратом равен 1/4000 мм3, для определения числа эритроцитов в 1 мкл умножают найденное число на 4000;
80 – число маленьких квадратов в 5 больших.
Эта формула после сокращения упрощается доХ=Э
1010/л.
Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите число эритроцитов в 1 мкл и 1 л исследуемой крови, а также определите пределы колебаний и средние показатели числа эритроцитов для юношей и девушек. В анализе сравните их с нормальными показателями.