Бактериологический.Посев биоптата на дифференциально-диагностическую среду. Требует 3–7 дней для получения чистой культуры бактерий. Выделение культуры Н.pylori in vitro важно при резистентности к эрадикационной терапии.
Морфологический– «золотой стандарт» диагностики Helicobacter pylori: окраска бактерий в гистологических препаратах слизистой оболочки желудка по Гимзе, толуидиновым синим, Вартину-Старри, Генте. При цитологическом методе окрашивания бактерии в мазках-отпечатках биоптатов слизистой оболочки желудка по Гимзе, Грамму.
Иногда морфологический метод даёт ложноотрицательные результаты диагностики Н. pylori по следующим причинам:
– наличие предшествующей антибактериальной терапии;
– изменение расселения Н. pylori при секреторной терапии;
– технологические особенности процесса изготовления препаратов.
В частности, ошибки могут быть при проведении исследования сразу же после лечения антибактериальными или антисекреторными препаратами, которые способствуют переходу бактерий в кокковую форму, трудно различимую при микроскопическом исследовании.
Дыхательный тест.Определение в выдыхаемом воздухе изотопов 14С или 13С, которые выделяются в результате расщепления в желудке больного меченой мочевины под воздействием уреазы бактерии Helicobacter pylori.
Иногда используется аэротест – определение концентрации аммиака калориметрическим методом в выделяемом воздухе пациента, однако точность метода недостаточно высока.
Уреазный тест.Определение уреазной активности в биоптате слизистой оболочки желудка путём помещения его в жидкую или гелеобразную среду, содержащую субстрат, буфер и индикатор. При наличии в исследуемом материале уреазы (продукта метаболизма H. pylori) мочевина гидролизуется до аммиака, который защелачивает среду. При этом индикатор меняет окраску от жёлтой до малиновой. Быстрый уреазный тест является методом выбора – дает возможность диагностировать H. pylori и назначать эрадикакационную терапию.
Иммунологические методы.Чаще используются для проведения скрининга и основаны на обнаружении специфических антихеликобактерных антител классов А и G в сыворотке плазмы и капиллярной крови обследуемых лиц. Наиболее изученными являются серологические методы:
– иммуноферментный анализ;
– экспресс-тесты на основе иммунопреципитации или иммуноцитохимии;
– метод полимеразной цепной реакции.