Диазореакция

Принцип метода. В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует сложное комплексное соединение оранжевого цвета.

Ход работы. К диазореактиву, состоящему из 5 капель 1 %-го раствора сульфаниловой кислоты и 5 капель 5 %-го раствора нитрата натрия добавля-ют 1–2 капли 5 %-го раствора тиамина и затем по стенке, наклонив пробирку, осторожно добавляют 5–7 капель 10 %-го раствора бикарбоната натрия. На границе двух жидкостей появляется кольцо оранжевого цвета.

Выводы по результатам работы.

_________________________________________________________________

Л а б о р а т о р н а я р а б о т а № 2 . Качественная реакция на витамин B₂

Рибофлавин состоит из изоаллоксазинового ядра и спирта рибитола:

Рибофлавин входит в состав простетической группы флавиновых фермен-тов (флавопротеидов – FP) в виде коферментов флавинадениндинуклеотида (FAD) и флавинаденинмонодинуклеоитда (FMN). Флавопротеиды катализи-

руют окислительно-восстановительные реакции. Они участвуют в окислении D-аминокислот, b-окислении жирных кислот, в работе дыхательных цепей митохондрий и микросом и др. Биологическое действие флавиновых фермен-тов связано с наличием окислительно-восстановительных свойств изоаллок-сазинового кольца.

При недостатке в организме В₂ возникают поражения слизистых в виде хейлита, глоссита и др.

Принцип метода. Окисленная форма витамина В₂ представляет собой жел-тое флюоресцирующее в ультрафиолетовых лучах вещество. Реакция на ви-тамин В₂ основана на способности его легко восстанавливаться, при этом раствор витамина В₂, обладающий желтой окраской, приобретает сначала ро-зовый цвет за счет образования промежуточных соединений, а затем обес-цвечивается, так как восстановленная форма витамина В₂ бесцветна.

Ход работы. В пробирку наливают 10 капель раствора витамина В₂, до-бавляют 5 капель концентрированной HCl, опускают зернышко металличес-кого цинка. Начинается выделение пузырьков водорода, восстанавливающе-го рибофлавин, жидкость при этом постепенно розовеет и обесцвечивается. Сравнивают обе формы витамина В₂ по флюоресценции, поместив каждую пробирку под освещение флюороскопа.

Выводы по результатам работы.

_________________________________________________________________

Л а б о р а т о р н а я р а б о т а № 3 . Качественная реакция на витамин В₆

Группа витамина В₆: пиридоксол, пиридоксаль, пиридоксамин – являются производными 3-оксипиридина, носят общее название пиридоксина и обла-

дают активностью витамина В₆.
	OH		O

HO	OH	HO
	OH


H₃C	N	H₃C	N
	Пиридоксол		Пиридоксаль

	NH₂
HO	OH
	Кофермент фосфопридоксаль

H₃C	N
	Пиридоксамин

В организме эти соединения подвергаются фосфорилированию при уча-стии АТФ с образованием коферментов фосфопиридоксаля, фосфопиридок-самина, которые входят в состав ферментов, участвующих в белковом обме-не, в реакциях трансаминирования, декарбоксилирования аминокислот, де-сульфинирования, дегидратирования аминокислот, в образовании витамина PP из триптофана и в некоторых других реакциях.

При недостатке витамина В₆ у животных прежде всего нарушается обмен белков, у человека недостаточность этого витамина встречается редко.

Принцип метода. Витамин В₆ при взаимодействии с раствором хлорного железа образует комплексную соль типа фенолята железа красного цвета.

Ход работы. К 5 каплям 1 %-го раствора витамина В₆ приливают равное количество 1 %-го раствора хлорного железа и перемешивают. Развивается красное окрашивание.

Выводы по результатам работы.

_________________________________________________________________

Л а б о р а т о р н а я р а б о т а № 4 . Качественная реакция на витамин E

Витамин E существует в виде нескольких изомеров: a, b и g-токоферолов, которые отличаются друг от друга порядком расположения метильных групп в бензольном кольце. Токоферолы – маслянистые жидкости, растворимые в растительных маслах и жировых растворителях.

Витамин E является мощным антиоксидантом. Некоторые производные витамина E участвуют в окислительно-восстановительных реакциях, связан-ных с окислительным фосфорилированием.

Витамин E может депонироваться в мышцах и поджелудочной железе. Принцип метода. Спиртовой раствор a-токоферола окисляется хлоридом

железа (Fe³⁺) в токоферилхинон красного цвета:

Ход работы. В сухую пробирку берут 4–5 капель 0,1 %-го спиртового рас-твора a-токоферола, прибавляют 0,5 мл 1 %-го раствора хлорида железа, тщательно перемешивают. Содержимое пробирки приобретает красное ок-рашивание.

Выводы по результатам работы.

_________________________________________________________________

Л а б о р а т о р н а я р а б о т а № 5 . Количественное определение витами-