Принцип метода. Кальций в щелочной среде образует окрашенный ком-плекс с о-крезолфталеин комплексоном. Интенсивность окраски пропорцио-нальна концентрации кальция в пробе.
Ход работы. Осуществляется в соответствии с таблицей 1.
Таблица 1
РЕАКТИВЫ | Опытная проба, мл | Калибровочная проба, мл |
Сыворотка крови | 0,05 | - |
Реагент № 1 | 1,0 | 1,0 |
Реагент № 2 | 1,0 | 1,0 |
Калибратор | - | 0,05 |
Реакционную смесь тщательно перемешивают и инкубируют 5 минут при комнатной температуре. Измеряют оптическую плотность опытной и калиб-ровочной проб на ФЭКе против дистиллированной воды в кюветах с длиной оптического пути 5 мм при длине волны 540 – 590 нм.
Расчет концентрации кальция (С) в сыворотке крови проводят по форму-лам:
C = Еоп / Екал • 2,5 [ммоль/л]
или
С = Еоп / Екал • 10 [мг/100мл]
где: Еоп – экстинкция опытной пробы; Екал – экстинкция калибровочной пробы.
Примечание: Окраска стабильна не менее часа. Если концентрация кальция превышает 3,75 ммоль/л (15 мг/100 мл) разведите образец в 2 раза дистилли-рованной водой, повторите анализ и умножьте результат на 2.
Норма. 2,02 – 2,60 ммоль/л (8,10 – 10,4 мг/100 мл)
Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагностическую оценку.
_________________________________________________________________
_________________________________________________________________
_________________________________________________________________
Л а б о р а т о р н а я р а б о т а № 2 . Определение кальция в моче по мето-