Принцип метода. Гемоглобин под действием трансформирующего раство-ра превращается в окрашенный продукт – гемихром, интенсивность окраски
которого пропорциональна концентрации гемоглобина и измеряется фото-метрически при длине волны 540 нм.
Ход работы. Составляют реакционную смесь по схеме:
| РЕАГЕНТЫ | Опытная проба, мл. |
| Трансформирующий раствор | 5,00 |
| Кровь | 0,02 |
Перемешать, выдержать 5 минут при комнатной температуре и измерить оптическую плотность опытной пробы (А) против дистиллированной воды в кювете с толщиной поглощающего слоя 1 см при длине волны 540 нм. Окра-ска стабильна до 5 часов.
Расчет содержания гемоглобина (в г/л) производят по формуле:
Hb = (Еоп / Ест)С,
где Еоп – экстинкция опытной пробы; Ест – экстинкция стандартного раствора;
С – концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе, равная
138,0 г/л;
Норма: Содержание гемоглобина в крови по норме: у женщин – 120– 140 г/л; у мужчин – 130–160 г/л.
Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагности-ческую оценку.
_________________________________________________________________
_________________________________________________________________
_________________________________________________________________
Л а б о р а т о р н а я р а б о т а № 2 . Определение концентрации общего