ОГЛАВЛЕНИЕ Введение .1. Принципы конструирования рекомбинантных противовирусных вакцин 4-1. Получение соответствующего фрагмента нуклеиновой кислоты .2. Выбор высокоактивной и хорошо изученной в иммунологическом отно- шении модели вектора-носителя и клонирование соответствующего гена 9-1. Получение рекомбинантных ДНК 2. Получение рекомбинантных РНК 11 1.2.3. Стратегия клонирования генов . 4. Разнообразие векторных молекул 3. Выбор системы экспрессии клонированного гена, способной обеспечить максимальный выход и функциональную полноценность продукта 4. Создание достаточно удобных и по возможности универсальных векторов для целевой доставки генов в клетки и ткани организма 2. Вакцина против лейкемии кошек, изготовленная с помощью генной инженерии . 24 Список литературы .26 ВВЕДЕНИЕ Существующие традиционные вакцины, несмотря на очевидный положительный эффект их широкого применения, обладают рядом недостатков.
К ним относятся наличие нежелательных биологически активных и балластных компонентов в препаратах, неполноценные иммунологические свойства самих антигенов.
Кроме того, существуют заболевания, не вызывающие иммунитета, вакцины против которых вообще отсутствуют и не могут быть сконструированы на основе классических принципов. Все это вызывает необходимость усовершенствования уже существующих вакцин и создания принципиально новых типов вакцин.
Одним из наиболее перспективных направлений в данной области является получение вакцинных препаратов на основе методов генной инженерии. Последним достижением генной инженерии и биотехнологии стало создание рекомбинантных противовирусных вакцин, содержащих гибридные молекулы нуклеиновых кислот. Данные вакцины обладают целым рядом преимуществ. Они характеризуются отсутствием или значительным снижением балластных компонентов, полной безвредностью, низкой стоимостью, которая связана с удешевлением промышленного производства вакцин.
Экспрессируемый в клетках вакцинированного животного белок имеет конформацию, близкую к нативной, и обладает высокой антигенной активностью. Таким образом, рекомбинантные противовирусные вакцины являются новейшим поколением вакцин. Их очевидное преимущество обуславливает широкое применение данного типа вакцин в медицине и ветеринарии для вакцинации населения и сельскохозяйственных животных. 1.
Важным условием получения эффективного вакцинного препарата является с... Для выделения мРНК из инфицированных клеток используют различные спосо... Получение препарата очищенной мРНК позволяет перейти к работам по синт... Расщепление полирибонуклеотидной цепи РНК может осуществляться в прису... Источником необходимых участков РНК может служить такой способ, как си...
Получение рекомбинантных ДНК. Существует три основных способа встраивания чужеродной ДНК в векторные... Рестриктазы характеризуются исключительно высокой специфичностью. Они ... Схема сшивания двух олигорибонуклеотидов с помощью Т4 РНК-лигазы. BrCN. Фрагмент РНК, в который производится встраивание, должен содержать нук...
Для этого встраивание чужеродной ДНК в вектор производится таким образ... . Наконец, это могут быть сами индивидуальные РНК, закодированные в данн... Эта группа подразделяется на подгруппы например, на 10 по 10 рекомбина... Так, например, если бактериальный вектор несет устойчивость к двум ант...
Разнообразие векторных молекул. В фаговую частицу ДНК включается в виде однотяжевой молекулы. ВЫБОР СИСТЕМЫ ЭКСПРЕССИИ КЛОНИРОВАННОГО ГЕНА, СПОСОБНОЙ ОБЕСПЕЧИТЬ МАК... coli. subtilis, секретирующих чужеродные белки из клеток. Однако данная бакт...
Список литературы 1. Грен Э. Я Пумпен П. П. Рекомбинантные вирусные капсиды - новое поколение иммуногенных белков и вакцин Журнал ВХО 1988 т. II, 5 с. 531-536. 2. Дмитриев Б. А. Проблемы и перспективы создания синтетических вакцин Иммунология 1986 1 с. 24-29. 3. Лебедев Л. Р Сизов А. А Масычева В. И Карпенко Л. И Рязанкин И. А. Молекулярный вектор для доставки генов в клетки-мишени Биотехнология 2001 1 с. 3-12. 4. Мертвецов Н. П Беклемишев А. Б Савич И. М. Современные подходы к конструированию молекулярных вакцин Новосибирск Наука, 1987, 210 с. 5. Сизов А. А Лебедев Л. Р Масычева В. И Кашперова Т. А Одегов А. М. Разработка вирус-подобной конструкции для рецептор-опосредованного транспорта гена чГ-КСФ в клетки костного мозга in vivo Биотехнология 2001 1 с. 13-18. 6. Шабарова З. А Богданов А. А Золотухин А. С. Химические основы генетической инженерии М. Изд-во МГУ, 1994, 224 с. 7. Щелкунов С. Н. Клонирование генов Новосибирск Наука, 1986, 232 с. 8. Юров Г. К Народицкий Б. С Юров К. П. Конструирование и использование ДНК-вакцин Ветеринария 1998 12 с. 25-27. 9. Hubscher U. Генная инженерия и ветеринария.
Вакцины, изготовленные с помощью генной инженерии, и анализ высоковариабельных участков ДНК. -Schweiz.
Arch. Tierheilk 1987, 129, 11, 553-564.