Способи зберігання спермії поза організмом засновані на створенні умов, за яких спермії впадають в стан анабіозу.
Зберігання сперми при температурі від 0 до 20°. При цих температурах використовують спеціальні синтетичні середовища, при яких спермії переходять до стану анабіозу. Найлегше спермії переходять в стан анабіозу під дією двоокису вуглецю (ССь). Але унаслідок нестійкого ефекту цей метод широкого розповсюдження не одержав.
Задовільні результати збереження сперми бика при температурі 5° за рахунок холодової дії досягаються і розбавленням її глюкозо-цитратно-жовтковим середовищем. Але термін зберігання тільки 36-48 годин. Сперму барана, розбавлену глюкозо-цитратно-жовтковим середовищем, зберігають при температурі від 10 до 18 ° не більше, ніж шість годин, а сперму жеребця - не більше двох годин.Для сперми кнура при зберіганні її при температурі близько 16-20° застосовують глюкозо-хеяато-цитратне середовище.
Термін зберігання сперми - до трьох діб. При зберіганні сперми при температурі 8-Ю ° в середовище потрібно додати 3-4 г жовтка курячого яйця.
При зберіганні розбавленої сперми при вказаних температурах користуються посудом з темного скла в затіненому прохолодному місці (погріб та ін.).
Випускають розріджувачі у вигляді порошку або пігулок. Сухі розріджувачі розчиняють перед використанням в прокип'яченій дистильованій воді, кип'ятять і охолоджують до 45°С, після цього додають жовток і спермосан-3.
При зберіганні сперми плідників при 0-5°С застосовують і молочні розріджувачі. Розроблено ще багато інших рецептів розріджувачів. Наприклад, фруктозо- або лактозо-цитратно-жовтковий розріджувач.
При зберіганні сперми в холодильнику необхідно перевірити, щоб температура в ньому дорівнювала 0-5°С.
Зберігання сперми в замороженому стані. Під час зберігання обмінні процеси в спермі при кислотному анабіозі, а також при температурі 0-5° хоча і значно знижені, але всі протікають на досить помітному рівні.
Глибший анабіоз з майже повним припиненням обмінних процесів досягається заморожуванням сперми при низьких температурах (-79°, -196°).
Успішні роботи з глибокого охолоджування сперми плідників провів в 1946-1950 рр. І.В. Смирнов. Він заморожував сперму в рідкому кисні і твердому двоокисі вуглецю (сухий лід) і одержав кроликів, а потім ягнят і телят від самок, запліднених розмороженою спермою.
Надалі над вдосконаленням методу заморожування сперми биків працювали багато учених. Для розбавлення сперми перед заморожуванням застосовували середовища, що містять гліцерин.
Техніка заморожування, сперми. В даний час спосіб повільного заморожування сперми биків поступився більш продуктивному швидкому заморожуванню, при якому глибоке охолоджування сперми до температури рідкого азоту (-196°) досягається протягом декількох хвилин. У результаті вдається краще зберігати структуру сперміїв, одержувати відносно високу активність сперми після розморожування.
Рекомендується заморожувати сперму бика в ампулах або капілярах (пайеттах - полістирольні або пропіленові трубочки завдовжки 140 мм, з внутрішнім діаметром 2 мм і зовнішнім - 5 мм) в струмі холодного газоподібного азоту. В цьому випадку пакети з ампулами або капілярами після охолоджування до +5, + 2° опускають на підставці в посудину Дьюара з рідким азотом'до зіткнення з його поверхнею на 3 хвилини, де відбувається заморожування сперми в холодному газі до температури мінус 80-100°, потім переносять на зберігання у верхню секцію сховища над рідким азотом. Необхідно
стежити, щоб у сховищі був рідкий азот; кількість його потрібно періодично контролювати за допомогою мірної лінійки і у міру випаровування поповнювати не менше ніж до '/5 загального об'єму.
Після заморожування розморожують декілька ампул, капілярів або гранул і перевіряють активність сперми. Для подальшого зберігання в замороженому стані допускають сперму, що має активність не нижче 4 балів.
Сперму різних биків з урахуванням їх породності зберігають в стаціонарному сховищі в окремих для них секціях.
Заходи особистої безпеки. Особливо необхідно уникати зіткнення відкритих ділянок тіла з металевими предметами, витягнутими з рідкого азоту: вони можуть викликати обмороження. При попаданні рідкого азоту на незахишені ділянки тіла його слід негайно обмити водою.
Заливати рідкий азот в теплу посудину Дьюара (що має температуру усередині судини, рівну температурі навколишнього повітря) треба поволі. В процесі заливки теплої посудини категорично забороняється заглядати в горловину посудини для визначення висоти рівня рідини.
Приміщення, у яких знаходяться посудини Дьюара (у тому числі і стаціонарні сховища сперми) з рідким азотом, повинні бути обладнані лриточно-витяжною природною або примусовою вентиляцією.
Поряд з приміщенням, де можливий підвищений вміст в повітрі азоту, повинні знаходитися справні ізолюючі або шлангові протигази.
Категорично забороняється залишати на відігрівання після випробувань посудини Дьюара, що втратили вакуум, у приміщенні, де можуть знаходитися (або проходити) люди.
Не можна щільно закривати горловину посудини Дьюара, а слід закривати кришками, призначеними тільки для них.
При транспортуванні посудин Дьюара з рідким азотом необхідно надійно закріплювати їх, щоб уникнути падінь.
Механічне очищення посудин Дьюара проводять на станціях, для цього використовують теплу піну господарського мила або інші речовини, що легко відмивають поверхню. Потім посудину споліскують теплою водою і сушать; пральні порошки використовувати небажано.
У посудини Дьюара, що виготовляються для сільського господарства, не можна заливати рідке повітря і рідкий кисень, оскільки як адсорбент застосовують активоване вугілля. На станції
відповідальний працівник повинен постійно стежити по сертифікатах за чистотою одержуваного азоту. Сертифікати потрібно зберігати окремо від інших документів.