Бактериологический метод является основным при диагностике инфекционных заболеваний. Его сущность заключается в определении вида возбудителя инфекции, следовательно, можно поставить этиологический (окончательный) диагноз. Основной недостаток метода – длительность исследования – от 3х до 5ти суток, а в отдельных случаях и более.
Успех проведения бактериологического метода во многом зависит от предварительного этапа, включающего забор исследуемого материала и его транспортировку, оформление направления в бактериологическую лабораторию. При этом необходимо соблюдать ряд правил:
1. Забор исследуемого материала следует провести до начала антибактериальной терапии или через 8-10 часов после введения последней дозы антибиотика. Чтобы избежать загрязнения пробы микрофлорой окружающей среды, необходимо соблюдать строжайшую антисептику. Для этого используют стерильный материал: а) ватные тампоны для взятия материала из раны, со слизистых оболочек (глаз, зева, носа); б) проволочную петлю для взятия материала из влагалища, анального отверстия; в) шприц для взятия крови, гноя; г) стерильную посуду для непосредственного сбора в нее мочи, мокроты, испражнений.
2. Транспортировку полученного материала следует проводить в максимально короткие сроки (2-3 часа) в специальных биксах или пеналах.
3. Направление прилагают к клиническому образцу в качестве сопроводительного документа. Оно содержит основные сведения, необходимые для проведения микробиологического исследования:
- фамилия, имя, отчество, возраст пациента;
- предполагаемый диагноз заболевания;
- предшествующая антимикробная терапия;
- характер материала;
- дата и время взятия материала;
- цель исследования;
- название лечебного учреждения, номер отделения, палаты;
- подпись лечащего врача.
Бактериологический метод осуществляется в два этапа.
1. Выделение чистой культуры возбудителя (1-2 суток).
2. Идентификация чистой культуры (1-3 суток).
На первом этапе проводится посев исследуемого материала на твердую или жидкую питательную среду, оценка культуральных свойств, отбор подозрительных колоний и их отсев на скошенный агар. Этап идентификации включает обязательное изучение морфологии, биохимических свойств и антигенной структуры выделенной чистой культуры, а также проведение дополнительных исследований по определению антибиотикочувствительности, фагочувствительности, фаготипирования, изучение патогенности и персистентных свойств.
Схема бактериологического метода диагностики аэробных инфекций
1 этап
2 этап
| |||
а) е)*
| |||||||||
III
ж)
|
|
е)
в) д)
Реакция агглютинации
1. Забор и доставка исследуемого материала
2. Посев материала на питательные среды с целью получения изолированных колоний
3. Накопление чистой культуры на скошенной питательной среде
4. Идентификация выделенной чистой культуры
а) изучение морфологических и тинкториальных свойств
б) изучение культуральных свойств
в) изучение антигенной структуры возбудителя с помощью постановки реакции агглютинации на стекле с поливалентными и монорецепторными сыворотками
г) изучение биохимических свойств возбудителя по результатам посева на среды Гисса
д) определение чувствительности микробов к антибиотикам дискодиффузионным методом (метод бумажных дисков)
е) реакция фаголизабельности с диагностическими бактериофагами для выявления вида возбудителя (метод стекающей капли по Отто)
е)* реакция фаготипирования - проведение внутривидовой идентификации для выявления источников инфекции
ж) биопроба на лабораторных животных – изучают клинику и патогенез заболевания