Принципы электрофореза. Методы электрофореза.

Электрофорез – метод разделения веществ, основанный на явлении миграции заряженных микрочастиц в жидкой среде под действием электрического поля.

Аналитический Э. – разделение смеси веществ с целью их качественного и количественного анализа.

Препаративный Э. – разделение с последующим выделением фракций для их участия в конкретных биохимических процессах.

Электрофоретические методы

1. зональный

2. изофокусирование

3. изотахофорез

Зональный электрофорез:

1. в свободном потоке

2. на носителях

Носители: бумага, тонкий слой, гель.

Электрофорез осуществляется в присутствии буферного раствора.

Принципы электрофореза

В результате различий в величине заряда, размера или формы макромолекул смесь различных компонентов в эл. поле разделяется на различные зоны с частицами, имеющими сходные свойства.

Процедура анализа:

1. в камере деления между электродами образуется электропроводящая среда

2. в эту среду вводится раствор пробы

3. электроды подсоединяют к источнику питания

4. под действием эл. поля частицы перемещаются в сторону соответствующего электрода.

5. при необходимости используется термостатирование и охлаждение

6. оценка результатов

Обнаружение зон на поверхности носителя – физико-химическими, химическими, биохимическими методами

Количественная оценка – по интенсивности окрашивания разделённых зон.