Фотометрия. Спектрофотометрия. Колориметрия.

Колориметрия (400-750 нм)

Спектрофотометрия (200-2500)

Принцип фотометрии – зависимость светопоглощения от концентрации вещества.

Колориметрия – полихроматическое излучение (1…2), производится оценка интенсивности окраски окрашенных растворов.

Спектрофотометрия – монохроматическое излучение (=const), производится оценка интенсивности окраски как окрашенных растворов, так и бесцветных.

Спектрофотометрия позволяет просканировать пробу по всему спектру и определить качественный состав вещества.

В диапазоне определяемых концентраций растворы должны сохранять прозрачность.

Практически все био жидкости могут быть исследованы колориметрически (по окраске).

В основе принципа фотометрии лежит закон Бугера-Ламберта-Бера.

Экстинкция – оптическая плотность

– молярный коэффициент поглощения

b – толщина кюветы (см)

Сх – концентрация вещества (моль/л)

При V=1 моль, b=1см, А=