Определение рН среды

Для исследования используют б/ж или водную вытяжку из б/м. Для получения водн вытяжки небольшое кол-во б/измельчают, встряхивают с небольшим колич-вом воды. Надосадочную жидкость сливают и исследуют.

Универсальные индикаторн бумажки:

- Красная лакмусовая бумажка (КЛБ)

- Синяя лакмусовая бумажка (СЛБ)

 

1) Если при исследовании б/ж СЛБ покраснела, то реакция среды кислая. Затем проводят исследования с красной бумажкой Конго. Если б.Конго синеет, о значит в объекте орг или минеральные кислоты введенные извне. Для определения хар-ра кислоты б/ж разбавляют в 5 раз и вновь наносят на б.Конго. При отравлении мин кислотой б.Конго Синеет, если орг к-та – цвет не изменяется.

2) Если при нанесении б/ж на КЛБ она синеет, то среда щелочная. Она м.б. обусловлена наличием едкой щелочи, карбонатной щелочи, аммиака.

- отличие едкой и карбонатной щелочи:

к 1мл б/ж + 1-2к р-ра ф/ф à роз окраш-е + по каплям BaCl2. При наличии едкой щелочи розовая окраска сохраняется: 2NaOH + BaCl2 à Ba(OH)2 + 2 NaCl

При наличии карбонатной щелочи окраска ф/ф исчезает и появляется осадок:

Na2CO3 + BaCl2 à 2NaCl + BaCO3↓

- определение аммиака:

часть б/ж после обработки BaCl2 наносят на КЛБ, бумажка синеет. Оставляют на воздухе на 20 минут. Если при этом бумажка приобрела розовое окрашивание – аммиак.
ЛЕТУЧИЕ ЯДЫ

1. Синильная кислота и ее соли. 2. Хлорированные углеводороды (CHCl3, CCl4, дихлорэтан). 3. Фенолы и крезолы. 4. Спирты: С1-С5.

5. Альдегиды и кетоны. 6. Карбоновые кислоты алифатического ряда.

7. Нитро и аминопроизводные алифатического ряда. 8. Гликоли (этиленгликоль).

Основной метод изолирования: метод дистилляции.

Для веществ, не смешивающихся с водой, для веществ, образующих азеотропную смесь, для веществ, смешивающихся с водой, для твердых веществ (хлорофос).

Температура кипения определяемого вещества всегда ниже, т.к. общее давление равняется сумме парциального давления определяемого вещества и воды.

Плюсы: Можно изолировать вещества органической и неорганической природы, одновременно с изолированием идет очистка органического вещества, можно использовать действующие вещества с высокой температурой плавления или те, которые при температуре разлагаются.

Минусы: Длительность, большой объем дистиллята, необходима аппаратура.

 

Способы дистилляции:

1) Макродистилляция. На анализ достаточно более 50,0 биологического объекта.

2) Макродистилляция с селективным уносчиком для получения азеотропной смеси. Для HCN используется N2, для этиленгликоля – бензол.

3) Микродистилляция. Если у нас имеется небольшое количество биологического объекта. Перегонка осуществляется с использованием дефлегматора (нет паровика).

4) Метод фракционной перегонки – происходит разделение яда по фракциям, которые анализируются отдельно.

5) метод паро-воздушной дистилляции. Для спиртов (метод Карандаева), для HCN (метод Герасимова).

К биологической жидкости добавляют K2CO3 чтобы из нее произошло высаливание спиртов. Бюкс помещают в термостат с 50-60°С. Спирт возгоняется, взаимодействует с реактивами – если есть зеленое окрашивание, значит, было отравление спиртом.

6) Суховоздушная дистилляция. Используют ГЖХ. Метод надежен, универсален, быстр. В пенициллиновый флакон помещают 1-2 мл биожидкости, закрывают пробкой, плотно укупоривая (алюминиевый колпачок), помещают в термостат. Шприцом отбирают газовую фазу и вводят в инжектор хроматографа.

7) Прямой ввод объекта в хроматограф с использованием предколонки, чтобы избавить от белков.

Условия дистилляции.

Четкий контроль рН среды. Чтобы провести дистилляцию, биоматериал подкисляют щавелевой или винно-каменной кислотой до рН=2.

Нельзя подкислять минеральными кислотами, т.к. можно потерять или переоткрыть яд.

HCN HCOONH4

Ph-OSO3H Ph-OH + H2SO4

Не подкисляем, когда определяем свободную уксусную кислоту (промывные воды желудка).

Подкисляем H2SO4 и H3PO4 при определении общей уксусной кислоты (свободной и связанной с белками).

Подщелачиваем для веществ основного характера (никотин, анабазин, пахикарпин).

Подкислять необходимо, чтобы разрушить связь ТВ с белками.