ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ РАБОТЫ

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ РАБОТЫ. При выполнении экспериментальной части работы нами была предусмотрена следующая цель - изучить влияние регуляторов роста растений на скорость прорастания зернового мицелия Вешенки обыкновенной в субстрате соломы озимой пшеницы.

Необходимость изучения обуславливается следующими фактами уменьше ние сроков обрастания соломы мицелием, ускорение начала первого сбора урожая грибов. Это позволит производить дополнительное выращивание гри бов с той же площади культивационного помещения, что в нынешних сложных финансовых условиях, даст возможность получить с единицы площади боль ший объем продукции грибов Вешенки. А в задачи наших исследований входило - выяснение оптимальных форм регуляторов роста при выращивании гриба Вешенки.

Так к сегодняшнему дню человечеству известно большое количе ство форм регуляторов роста. Для наших исследований мы взяли 2 формы, которые являются исторически первыми изученными физиологами расте ний и полученные - гетероауксин и гибберелин. И три формы более моло дые в изучении - гумат натрия, гибберсиб - 2, парааминобензойная кислота. Так же одной из задач наших исследований является нахождение сравни тельно эффективного влияния выбранных нами форм регуляторов роста при выращивании гриба Вешенки обыкновенная, и найти наиболее эффектив ные формы регуляторов роста на скорость проростания зернового мицелия и на урожайность грибов Вешенки - проанализировать влияние регуляторов роста на урожайность гриба Вешен ки, и при этом нужно учитывать важность этих эксперимнтов для производ ства и экономической эффективности выращивания гриба Вешенки обыкно венной. 1.2 Методика выполнения работы Культивирование высших Базидиальных грибов предполагает 1 наличие чистой высокопродуктивной культуры 2 определение условий необходимых для роста грибов 3 подготовку стандартного посевного материала 4 выбор необходимых условий проведения, подготовку и стерилизацию пита тельных сред. Получение чистых культур высших базидиальных грибов.

Чистые культуру базидиомицетов могут быть выделены из плодовых тел ба зидиоспор, путем их проращивания из корней микоризиообразующих растений или же почвы, древесины и других субстратов, являющихся средой обитания этих грибов.

Наиболее простым и удобным способом получения желаемых культур высших базидиальных грибов является выделение культур из плодо вых тел или базидиоспор, если они легко прорастают.

Выделение культур из субстрата или миноризных окончаний корней, применяющиеся для специаль ных исследований, мало эффективно, и идентификация полученных культур представляет большие трудности Шемаханова, 1962 . Получение чистых культур из плодовых тел Для выделения следует выбирать молодые, не поврежденные плодовые тела, так как они меньше инфецированы микроорганизмами.

Выделение можно про водить в день сбора или хранить плодовые тела в течение двух-трех дней в хо лодильнике в полиэтиленовых мешочках. Обработка плодовых тел. Перед выделением плодовое тело следует осторожно очистить от прилипших растительных остатков, промыть в проточной и стерильной воде и положить на фильтровальную бумагу, чтобы оно обсохло. Промывать плодовые тела нужно быстро, чтобы они не напитались водой.

Плодовое тело можно простерилизо вать, обтирая 96-градусным спиртом или погружая на несколько секунд в 1 - ный раствор сулемы, 3 -ный раствор перекиси водорода, раствор формалина 1 300 , после чего тщательно отмыть в воде и дать обсохнуть. Плодовое тело можно так же быстро обжечь над пламенем горелки. Выделение инокулюма. Предварительно обработанная одним из описанных выше способов плодовое тело разламывают и переносят на спар кусочек ткани из середины стериль ным скальпелем, ланцетом или копьем.

Ни в коем случае не обжигать иноку люм в пламене горелки. Выделят инокулюм из разных частей плодового тела шляпки, ножки, место перехода шляпки в ножку, гимениального слоя. При вы боре участка ткани нужно исходить из размеров и строения плодового тела. Выделение лучше производить из самой толстой части плодового тела. Кусочки плодового тела помещают на питательную среду в чашки Петри, ча шечки для тканевых культур или пробирки.

Расход среды при посеве на чашки для тканевых культур диаметр 5-7 см. незначителен, в каждой такой чашке находится только один кусочек, что важно для предотвращения загрязнения. Кусочки плодового тела помещают сверху на спар или частично погружают в агаризованную среду. Инокулюм дереворазрушающих рекомендуется выде лять следующим образом Punaren, 1967 . Во влажную камеру помещают тща тельно отмытые, разрезанные плодовые тела или же кусочки древесины, прони занные мицелием гриба. Чашку с инокулюмом помещают в термостат при тем пературе 20-25 градусов С при температуре 26-28 градусов С и выше скорость выделения может замедляться. Желательно чтобы относительная влажность воздуха была не ниже 80 , для чего в термостат можно поставить сосуд с во дой. Выделение культур обычно производят на плотную среду суслоагар, солодо вый агар, картофельно-глюкозный агар и т.д. Если выделение идет плохо или мицелий не переходит с инокулюма на поверхность среды, в состав последней следует добавить дрожжевой автолизат, отвары коры, хвои или листьев различ ных высших растений обычно в количестве от 0.5 до 5 , экстраты из плодо вых тел грибов. В чашках Петри вместе с колониями базидиальных грибов мо гут расти колонии плесневых грибов, дрожжей, бактерий, что обычно легко за метить.

В таких случаях предполагаемые колонии базидиомицетов нужно по следовательно пересеять и избавиться от инфекций с помощью обычных мето дов микробиологической техники.

Но следует иметь в виду, что разные штаммы одного и того же вида могут значительно отличаться по скорости роста и требованию к питательной среде.

По разному происходит выделение из плодовых тел неодинакового возраста. 9 Остальные методы, т.е. из базидиоспор, субстратов, миноризных окончаний корней в наших исследованиях малоэффективны. Условия необходимые для роста грибов. Рост грибов происходит при определнных условиях наличие источников пи тания - углерода, азота, водорода, неорганических соединений, содержащих калий, натрий, фосфор, магний, кальций, серу и железо микроэлементов - мар ганца, цинка, молибдена, кобальта, меди, бора и др. стимуляторов роста, опти мальной температуры, степени аэрации, света и других факторов.

Все источники питания разделяются на природные естественные питатель ные субстраты и искусственные питательные среды, строго определенного со става, содержащие необходимые элементы в усвояемой форме. Из естественных питательных субстратов используют зерно в натуральном виде, настоек или отваров пивное сусло, кукурузный экстрат, добавляемых к искусственным питательным средам.

Питательные вещества могут усваиваться только при определенной кислот ности питательной среды, т.к. проницаемость оболочек грибов клеток изменя ется в зависимости от pH среды. Большинство грибов развиваются при pH сре ды 4.5-6.0. Реакция среды в процессе роста культуры грибов может значительно изменяться. Различают оптимальные условия pH среды для прорастания спор, для вегетативного развития мицелия, для спорообразования.

Смещение pH воз можно для одного и того же гриба как в сторону подкисления, так и в сторону подщелачивания в зависимости от источников питания Наумов, 1937 . Не меньшее значение для роста грибов имеет температура их выращивания. Температурный оптимум - 22-25 градусов С. Для хорошего развития мицелия гриба влажность воздуха в помещении должна поддерживаться в пределах 95-97 . Грибы растут при определенных условиях освещения. Освещение при обрас тании соломы мицелием не важно. Получение в культуре плодовых тел. Получение в культуре нормально развитых плодовых тел является наиболее надежным способом правильного определения культуры, а для получения пло довых тел хорошо плодоносящей Pleurotus ostreatus обычно используют тот же субстрат, на котором сохраняется в лаборатории культура гриба - сусловый агар, малый агар и т.д. Для вешенки может применяться среда Бэднона Бэд кок, 1941,1943 , состоящая из древесной муки с добавкой костной муки, карто фельного крахмала, сахара и древесной золы. Богатый питательными вещест вами субстрат, способствующий хорошему вегетативному росту мицелия, не всегда является оптимальным для образования плодовых тел. В некоторых слу чаях появление плодоношения стимулирует перенос гриба на бедную среду.

У Вешенки плодоношение стимулируется добавлением в питательную среду цел люлозы в виде фильтровальной бумаги или соломы.

Время появление плодовых тел различно в зависимости от вида и штамма гриба, условий выращивания и состояния культуры.

Свет является одним из наиболее важнейших условий для развития плодовых тел. На первых стадия развития зачатков плодовых тел достаточно незначи тельного освещения, а для образования плодовых тел вешенки необходимо ос вещение 2000-8000 лк в течение 14 часов. Температура, оптимальная для пло доношения часто не совпадает с оптимальной температурой для роста мицелия. Так максимум плодоношения у вешенки при температуре от 15 до 17 градусов С, а оптимум - 22 - 25 градусов С. Аэрация и влажность влияют на образование и формирование плодовых тел. Снабжение культур свежим воздухом с 95-97 относительной влажности бла гоприятно сказывается на развитии плодовых тел. При высоком содержании в среде CO2 наблюдается появление абортивных плодовых тел и задержка в раз витии шляпки, изменяются ее размеры и появляются морфологические измене ния. Если воздух не обновляется, то могут образовываться лишь зачатки плодо вых тел. 14 Выделяют два способа выращивания Вешенки обыкновенной экстенсивный и интенсивный.

Выращивание Вешенки обыкновенной экстенсивным способом.

Вешенка обыкновенная может произрастать на стволах многих лиственных деревьев, однако наилучшими субстратными растениями для нее является то поль, ива, граб, бук и дуб. Древесина должна быть здоровой, не пораженной другими грибами. Лучше всего использовать свежесрубленную древесину, со держащую достаточное количество воды, необходимой для развития гриба. Не следует брать стволы диаметром меньше 15 см поскольку урожайность грибов на них будет низкой.

Инокуляцию мицелием производят весной, когда в подва лах без специального подогрева поддерживается температура оптимальная для его развития. Перед инокуляцией мицелием стволы распиливают на бруски одинаковой длины 30-35 см следя за тем, чтобы не испачкать их почвой. По сле распиливание производят вакцинацию брусков. Затем их устанавливают в подвалах, вертикально друг от друга, инокулируя один конец мицелием.

На этот конец, инокулированный конец следующего бруска, а его противополож ный конец инокулируют. Высоту столба доводят до 2-2.5 м. Слой мицелия на брусках должен быть не менее 1 см. толщиной. На верхний брусок сверху по мещают доску толщиной 5-6 см. На нее наносят слой соломы и слой почвы вы сотой15 - 20 см. Это способствует поддержанию влажности и постоянной тем пературы субстрата, хорошему росту мицелия. Через такую покрышку бру ски получают достаточное количество воздуха. Относительная влажность воз духа должна быть выше 90 . Через 2-3 месяца мицелий хорошо развивается по всему бруску. 12 Затем бруски пронизанные мицелием следует перенести для плодоношения на лесные поляны, приусадебные участки, где достаточно много влаги но не грунтовой и нет прямых солнечных лучей.

Бруски вкапывают таким образом, чтобы их нижняя часть на несколько сантиметров была погружена в почву. Плодовые тела появляются через 1 - 3 недели после перенесения брусков. 11 Плодоношение длится 3 - 5 лет. Наибольший урожай вешенка обыкновенная дает на первом году плодоношения. В последующие годы бруски особого ухода не требуют.

Таким образом экстенсивный способ культивирования вешенки обыкновен ной прост, дешев, однако качество и количество урожая в большей мере зави сит от факторов внешней среды, поэтому регулировать этот процесс невоз можно. Указанные недостатки устраняются при интенсивных способах выра щивания. 16 Выращивание вешенки обыкновенной интенсивным способом. При интенсивном выращивании грибов вешенки одним из лучших субстратов является солома озимой пшеницы.

Перед проведением пастеризации солому необходимо измельчить от 30 - 80 мм до 14 мм. Для этих целей можно исполь зовать различные измельчители соломы. Если партия соломы небольшие, мож но ее измельчать секатором или садовыми ножницами. В качестве добавок к субстрату можно применять измельченные стержни по чатков кукурузы, а также подсолнечную шелуху до 15 - 20 от общего веса субстрата. В качестве органических добавок можно использовать отруби - от 2 до 5 общего веса субстрата.

Измельченную солому засыпают в емкость, где будет производиться стерили зация. Емкость заполняется субстратом до ј части объема, заливается водой, желательно, до 25 градусов С на 15-20 минут, перемешивается и затем грязная вода сливается. Субстрат снова заливают водой, можно горячей. Стерилизация протекает в запарке при температуре 100-110 градусов С в течение 2 часов. Поддерживают такую температуру либо пропусканием пара через запарник, либо подогревая воду электрическими тенами.

После стерилизации субстрата воду из запарника сливают и охлаждают суб страт до 25 градусов С, затем в субстрат добавляют органические добавки, предварительно также постерилизованные. После перемешивания субстрата с добавками в запарник можно вносить мицелий. Примерно на 100 кг субстрата нужно минимум 2 кг мицелия. Все опять тщательно перемешивается и вносится в полиэтиленовые мешки. Можно вносить мицелий непосредственно в процес се заполнения мешков субстрата - послойно.

Субстрат с добавками и мицелием переносят в полиэтиленовые мешки размером 40 - 45 см х 80 - 90 см. Жела тельно, чтобы в мешок помещалось до 10 - 15 кг стерилизованного субстрата. Предварительно в мешках пробойником делают отверстия диаметром 15 - 20 мм. На расстоянии 10 х 10 см по углам квадрата пробивают по одному отвер стию 10 . Мешки предварительно стерилизуют в двух процентном растворе хлорной извести или в 0,01 растворе марганцовки.

Мешки заполняются на 2 3 объема субстратом. При заполнении мешков субстрат не утрамбовывают, а укладыва ют плотной равномерной массой, без воздушных промежутков. Затем мешки не туго завязывают и переносят в проростное помещение. Проростное помещение перед внесением туда субстрата дезинфицируют. 1. Стены и пол промывают 1 раствором хлористой щелочи, затем проводят окуривание формальдегидом. На 100 м3 помещения необходимо 2 литра 40 формалина и 400 гр. хлорной извести. Равномерно по площади поме щения устанавливают емкости, желательно стеклянные, фарфоровые или эмалированные.

Равномерно в них насыпают хлорную известь и заливают формалином. Помещение на 2 - 3 суток закрывают, а затем в течение 3 - 4 суток проветривают. 2. Помещение опрыскивают 4 раствором хлорной извести. Приготавливают раствор, выдерживают его в течение 2-х часов, взбалтывают и опрыскива телем обрабатывают помещение. Закрывают помещение на двое суток, а затем интенсивно вентилируют в течение 5 - 7 дней. 3. Проводят опрыскивание помещения раствором формалина - раствор гото вится из расчета 250 мл 40 формалина на 10 л воды. Расход раствора на 100 м3 помещения примерно 20 л. Помещения обрабатывают опрыскивате лем, закрывают на двое суток, а затем в течение 4-х дней интенсивно про ветривают. 4. Обработку горящей серой проводят из расчета 500 гр серы на 100 кубиче ских метров помещения.

Серы медленно сжигают в емкостях, установлен ный на электрических печках в помещении. Через два дня помещения про ветривают в течение 3 - 4 дней. 5. В случае появления грибных мух, в культивационных помещениях прово дят окуривание в течение 2 - 4 часов препараторами монофоса, карбофоса или пагоса из расчета 800 гр на 100 кубических метров помещения.

Мешки в проростном помещении устанавливают друг на друга, не более чем в 2 - 3 ряда. Температура в проростном помещении должна составлять 22 - 25 градусов С, а в мешках с субстратом - не более 28 градусов С. Влажность воздуха поддерживается в пределах 95 - 97. Освещение при об растании соломы мицелием не нужно.

В случае появления в мешках инфицированных участков, они должны быть удалены и обработаны раствором поваренной соли из расчета 250 гр на 1 л. Соль лучше растворять в горячей воде. После зарастания субстрата мицелием мешки переносят в растительное по мещение и развешивают согласно принятой для каждого культивационного по мещения схеме. Температура в растительном помещении поддерживают в пределах от 15 до 17 градусов С. Влажность - 95 - 97 . Нежелательно попадание крупных капель на мешки с субстратом и сбор воды на полу. При росте плодовых тел в растительном помещении необходимо освещение в течение 12 часов в сутки.

Интенсивность освещения необходимого для нор мальной пигментации достаточно в пределах от 100 до 180 люксов. Допустимая концентрация в помещении углекислого газа - не более 1 . Для этого, в помещении необходимо включат вентиляцию 4 - 6 раз в течение свето вой части суток. 22 Грибы желательно срезать ножом так, чтобы на мешках не оставалось частей плодовых тел. В случаях реализации грибов в свежем виде их лучше сразу ук ладывать в полиэтиленовые пакеты весом до 500 гр. Затем укладывать пакеты в контейнеры и отправлять сразу в холодильник или на реализацию.

После сбора грибов, примерно через 2 недели начинается 2 волна урожая. В первую волну обычно собирают до 60 - 70 урожая, вторая волна дает 15 - 20 и третья около 10 . Обычно выращивают и убирают урожай первой и вто рой волны.

При соблюдении технологического процесса с 10 кг субстрата минимальный сбор грибов за 1 ротацию составляет около 3 кг. В одном культивационном по мещении за год проводится как минимум 3 ротации. Отработанный субстрат можно использовать в качестве добавок для скота. Он содержит много белковых веществ, в том числе почти все незаменимые амино кислоты. На его основе можно готовить жидкий корм для свиней, кур и других животных. 16 Урожай грибов по каждому из изучаемых вариантов опыта проводился, путем взвешивания каждого варианта с 10 кг субстрата.

Данные урожая грибов и скорости обрастания субстрата - соломы озимой пшеницы подвергались математической обработке методом дисперсионного анализа В. Н. Доспехов, 1987 с помощью ЭВМ. Экспериментальный материал изложен в двух главах. 1.3