В процесі життєдіяльності мікроорганізмів в цитоплазмі клітин можуть формуватися морфологічні утворення, що є або продуктами обміну клітини, або запасними поживними речовинами.
Включення є різними за своєю хімічною природою. Це можуть бути жироподібні речовини, полісахариди (глікоген, крохмаль, гранульоза), поліфосфати (волютин) і т. п.
► ХІД РОБОТИ: ◄
3-а. Забарвлення волютину.
На знежирене скло наносять тонкий мазок культури дріжджів, сушать його на повітрі, фіксують над полум'ям і забарвлюють карболовим фуксином Циля. Через 0,5 – 1 хв промивають препарат водою, обезбарвлюють 20 – 30с 1%-ним розчином Н2SO4, промивають, додатково 20 – 30с забарвлюють метиленовим синім Леффлера, промивають, промокають, наносять масло і мікроскопують з імерсійною системою. Гранули волютина забарвлені в червоний колір на тлі синьої цитоплазми.
3-б. Забарвлення глікогену.
На чисте предметне скло наносять невелику краплю| суспензії дріжджів і до неї додають таку ж краплю розчину Люголя. Зверху поміщають покривне скельце, надлишок рідини видаляють фільтрувальним папером. Препарат проглядають з масляною імерсією.
3-с. Забарвлення гранульози.
У невелику краплю суспензії маслянокислих бактерій додають краплю розчину Люголя, накривають покривним скельцем, видаляють надлишок рідини фільтрувальним папером і переглядають з масляною імерсією. Гранульоза забарвлюється в синьо-фіолетовий колір і локалізується на одному з кінців клітин, другий кінець клітини (зі спорою, що формується) залишається непофарбованим.
Результати спостережень схематично зарисовують.
► КОНТРОЛЬНІ ПИТАННЯ: ◄
1. Будова клітинної стінки грампозитивних бактерій.
2. Будова зовнішніх покривів клітин грамнегативних бактерій.
3. Техніка забарвлення мікроорганізмів за Грамом.
4. Чим пояснюється неоднакове відношення мікроорганізмів до забарвлення за Грамом?
5. Локалізація спор в бактерійній клітині.
6. Які речовини відносять до внутрішньоклітинних включень мікроорганізмів?
7. Чим розрізняються прості і диференційовані методи забарвлення клітин мікроорганізмів?
Лабораторна робота № 4.