Современные иммунологические методы.

К наиболее современным иммунологическим методам диагностики туберкулеза относятся:

· T-spot test - диагностический тест, основанный на стимуляции Т-клеток пептидами моделирования ESAT-6 и CFP-10 антигенов, которые отсутствуют во всех штаммах БЦЖ и большинства не бактерий туберкулеза, кроме М. kansasii, М. szulgai и М. Marinum.

· QuantiFERON-TB Gold ( с 2005г.) - основан на количественном определении интерферона INF-γ, высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими АГ (ESAT-6, CFP-10, RD11) M.tuberculosis. Введен в обязательный комплекс фтизиатрического обследования в 78 странах мира.

· Diaskintest® (с 2009г.) - аллерген туберкулезный рекомбинантный. Основан на реакции гиперчувствительности замедленного типа к аллергену, представляющему собой два белка, соединенных вместе (ESAT6/CFP10), синтез которых кодируется в уникальной (отличной от других микобактерий) части генома m. Tuberculosis.

Диаскинтест – инновационный внутрикожный диагностический тест, в основе которого лежит комбинация из двух рекомбинантных белков (ESAT6/CFP10), которые отсутствуют у M. bovis, BCG и большинства НЕТУБЕРКУЛЕЗНЫХ микобактерий, за счет чего тест обладает высокой чувствительностью и специфичностью.

Техника постановки и учета результатов идентичны пробе Манту, что делает его использование удобным для медперсонала лечебных учреждений.

Инъекцию препарата для проведения Диаскинтеста проводят точно также как при пробе Манту: строго внутрикожно, в области средней трети предплечья, тонкой иглой. Нередко Диаскинтест и пробу Манту проводят одновременно (на разных руках), что позволяет выявить ложно положительные реакции Манту.

Результаты Диаскинтеста считывается через 72 ч с момента инъекции. Врач оценивает диаметр красного пятна (гиперемии) и уплотнения (папулы) которые образовались на месте инъекции. Результаты Диаскинтеста могут быть:

1. отрицательными – при отсутствии красного пятна или уплотнения на месте инъекции

2. сомнительными – при наличии на месте инъекции только красного пятна или небольшей припухлости диаметром менее 2-4 мм

3. положительными – при наличии на месте инъекции припухлости диаметром 5 мм и более;

4. гиперергическими: при образовании на месте инъекции уплотнения диаметром более 15 мм и более, а также в случае появления на месте инъекции пузырьков, изъязвлений или увеличения лимфатических узлов в локтевой ямке или в подмышечной впадине.

Все лица у которых была выявлена сомнительная, положительная или гиперэргическая реакция Диаскинтеста нуждаются в дополнительном обследовании на туберкулез.

Раствор для постановки Диаскинтеста содержит только синтетические белки ESAT6/CFP10 характерные исключительно для возбудителей туберкулеза.

В связи с различным составом результаты Диаскинтеста и проба Манту выявляют два разных аспекта состояния противотуберкулезного иммунитета: положительный результат пробы Манту означает, что организму обследуемого человека знаком туберкулин, что в свою очередь может значить, что обследуемый человек либо контактировал с туберкулезной инфекцией, либо недавно получил прививку БЦЖ, либо заражен непатогенными микобактериями, которые не могут вызвать болезни и следовательно не требуют никакого лечения. Последние две разновидности результата пробы Манту называются ложноположительными.
В отличие от пробы Манту, Диаскинтест дает положительный результат только в том случае, если организму обследуемого человека знакомы белки, которые можно встретить только в возбудителях туберкулеза. Другими словами, положительный результат Диаскинтеста с большой степенью точности указывает на то, что обследуемый человек либо заражен туберкулезом на данный момент, либо уже болеет им.

Таким образом, Диаскинтест по сравнению с пробой Манту:

· позволяет получить точный результат и отличить состояние заражения туберкулеза от ложно положительных реакций у людей привитых БЦЖ и лиц зараженных непатогенными микобактериями.

· обладает высокой чувствительностью: все больные зараженные туберкулезом и тубинфицированные лица, которые могут заболеть туберкулезом в ближайшее время дают положительную реакцию на Диаскинтест.

· дает возможность судить об эффективности лечения туберкулеза: у всех лиц выздоровевших после туберкулеза результат Диаскинтеста отрицательный.

Квантифероновый тест- золотой стандарт в диагностике латентного туберкулеза.

В настоящее время квантифероновый тест внесен в национальные рекомендации 17 крупнейших стран мира. Метод основан на определении интерферона IFN- γ (цитокин ФНО- γ), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими антигенами М.tuberculosis.

Использование квантиферонового теста рекомендуется для:

· диагностики латентной туберкулезной инфекции, особенно у детей и лиц со сниженным иммунитетом (при которых реакция Манту, как правило, отрицательная).

· подтверждения сомнительных результатов кожных тестов, т.к. он в 6 раз точнее реакции Манту;

· диагностики туберкулеза у ВИЧ-инфицированных больных.

· отбора пациентов на иммуносупрессивную терапию (обязателен перед назначением антицитокиновых препаратов).

· диагностики активного туберкулеза, в том числе внелегочного (но только в совокупности с рентгенологическим и другими клиническими и лабораторными исследованиями).

Преимущества квантиферонового теста:

1. У неинфицированных или прошедших БЦЖ-вакцинацию ответ будет отрицательным.

2. Тест лишен недостатков кожных тестов (реакция Манту) и превосходит их по чувствительности (89% против 76%) и специфичности (99,2% против 65,9%).

3. У пациентов с ВИЧ-инфекцией квантифероновый тест также отличается более высокой чувствительностью (77-85%) по сравнению с кожными пробами (15-46%).

Тест T-SPOT.TB. - диагностический тест, основанный на подсчёте Т-клеток, специфически активированных антигеном Mycobacterium tuberculosis (MTB). Основанный на передовой технологии T-SPOT, тест способен диагностировать как скрытое заражение туберкулёзом, так и активную фазу заболевания. Продукт был лицензирован в странах Европы в июле 2004 года и разрешён к реализации FDA в июле 2008 года, и, как ожидается, придет на замену существующей кожной пробе (реакция Манту), проводя эффективное тестирование туберкулёза во многих новых группах пациентов, для которых кожная проба давала слабые или ненадёжные результаты.