Связывание Ig с антигеном представляет собой физиологический процесс, приводящий к образованию иммунных комплексов (ИК), направленный на элиминацию антигена из организма. Однако при определенных условиях ИК могут фиксироваться на стенках сосудов, синовиальных оболочках, базальных мембранах почек и вызывать воспалительную реакцию. Формирование и биологическая активность патогенных ИК зависит от многих факторов, в том числе от природы антигена и антител, а также от их соотношения. Важной характеристикой ИК является их величина. ИК, образующиеся при избытке антител, имеют большие размеры, нерастворимы, быстро фагоцитируются и обладают ограниченной патогенностью. Комплексы небольшого размера, неспособные активировать комплемент, частично удаляются селезенкой или фиксируются в клубочках почек, легочной ткани, стенках кровеносных сосудов или сосудистых сплетений с последующей элиминацией тканевыми макрофагами.
Наибольшим патологическим потенциалом обладают растворимые ИК средних размеров, сформированные при некотором избытке антигена, способные активировать комплемент и клетки, несущие рецепторы к Fc Ig и С3 (клетки крови, эпителиоциты, эндотелиоциты, гепатоциты, фибробласты, мезангиальные клетки и др.). В последние годы установлено большое число заболеваний, ассоциированных с образованием ИК (аутоиммунные, опухоли, некоторые инфекции), при которых определение в биологических жидкостях патогенных ИК имеет диагностическое значение. В настоящее время предложено более 30 различных методов определения патогенных ИК, которые можно разделить на две группы:
1) антигеннеспецифические методы, предназначенные для обнаружения ИК вне зависимости от природы присутствующего в них антигена (турбидиметрия, нефелометрия);
2) антигенспецифические методы, позволяющие идентифицировать антиген в составе ИК (иммунофлюоресцентный анализ).
В настоящее время разработано около 40 вариантов постановок реакций для выявления патогенных ЦИК. Наибольшее распространение получил физико-химический метод осаждения ЦИК 3,5% раствором полиэтиленгликоля (ПЭГ). Различные концентрации ПЭГ (2,5; 3,5; 7 и даже 10%) вызывают преципитацию различных по молекулярной массе и размерам иммунных комплексов. Низкие концентрации осаждают комплексы крупных размеров, высокие концентрации вызывают преципитацию низкомолекулярных соединений. 3,5% ПЭГ флоккулирует наиболее распространенные «промежуточные» комплексы средних размеров.
Для проведения исследования готовят разведение 1:20 сыворотки больного, которое используется для дальнейшей постановки реакции. В пробирке 200 млк сыворотки смешивают с 1,8 мл раствора ПЭГ. В контроле сыворотка заменяется боратным буфером. Смеси инкубируют в течение часа при комнатной температуре. Учет результатов проводят с использованием ФЭК при длине волны 450 нм, определяя коэффициент светопропускания в опыте по сравнению с контрольной пробой. В норме показатель составляет 90-95% Т.