При изучении лимфоцитов оценивают их количество в периферической крови и функциональную активность. Определение количества клеток проводят с учетом дифференцировочных антигенов на их поверхности. Идентификация клеток по экспрессии тех или иных CD-маркеров получила название иммунофенотипирования (ИФТ), в основе которой лежит идентификация CD-маркеров, расположенных на поверхности мембраны и/или внутри клетки с помощью меченных флуорохромами или ферментами моноклональных антител (МКАТ).
Объем проводимых исследований при ИФТ лимфоцитов определяется его задачами. Так, для оценки иммунного статуса необходимо определять только основные популяции и субпопуляции лимфоцитов: CD3, CD4, CD8, CD20, CD25, CD16, CD95, HLA-DR.
Для определения фенотипического профиля лимфопролиферативных заболеваний необходимо проводить обследование в расширенном объеме в зависимости от предполагаемого диагноза.
Используемые для ИФТ методы можно разделить на две группы в зависимости от способа учета результатов реакции: с автоматизированным учетом и с неавтоматизированным учетом.
В настоящее время «золотым стандартом» ИФТ является проточная цитометрия, которая представляет собой полностью автоматизированный метод проведения и учета результатов ИФТ с использованием моноклональных антител, меченных флуорохромами. К методам, использующим неавтоматизированный учет результатов ИФТ, относятся непрямая иммунофлуоресценция и иммуноцитохимия. При использовании последних двух методов необходимым этапом исследования является выделение из крови фракции мононуклеаров.