Исследование проводится при помощи двух серий стандартных гемагглютинирующих сывороток на подписанной (фамилия больного) фарфоровой пластинке или тарелке. Соотношение объема исследованной крови и сыворотки должно быть 1:10. Исследование можно производить при температуре воздуха! от 15 до 25°С. Пластинку осторожно покачивают. По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 мин, в капли добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия. Результат читают через 5 мин:
1) I группа крови — агглютинации нет ни в одной капле;
2) // группа — стандартные сыворотки I и III групп агглютинируют эритроциты, а с сывороткой II группы агглютинация не наступает;
3) Ш группа — стандартные сыворотки I и II групп дают положительную реакцию, а сыворотка III группы — отрицательную;
4) IV группа — стандартные сыворотки всех трех групп вызывают агглютинацию. Однако для окончательного заключения необходимо провести контрольное исследование на специфичность реакции со стандартной гемагглютинирующей сывороткой IV группы.
При массовом заборе донорской крови допустимо применение экспресс-метода определения группы крови с последующей перепроверкой обычной методикой на станции переливания крови. Исследование проводят двумя моноклональными сыворотками: анти-А (розового цвета) и анти-В (бирюзового цвета). Реакция проводится на фарфоровой пластинке при обычном температурном режиме. Наблюдают при покачивании в течение 3 мин. Результат читается следующим образом:
1) с сывороткой анти-А агглютинации нет, а с анти-В есть — исследуемая кровь В (III);
2) в капле с сывороткой анти-А наступила агглютинация, с анти-В нет — исследуемая кровь А (II);
3) агглютинация наступила с обеими сыворотками — исследуемая кровь АВ (IV);
4) агглютинация не наступила в обеих каплях — кровь 0 (I);
Ошибки при определении группы крови по системе АВО могут быть связаны с:
1) слабой агглютинабельностью эритроцитов;
2) появлением неспецифической агглютинации эритроцитов;
3) нарушениями температурных условий реакции;
4) нарушением соотношения тестовых реактивов и исследуемой крови;
5) несоблюдением длительности наблюдения за реакцией;
6) появлением псевдоагглютинации эритроцитов;
7) выпадением фибрина в осадок;
8) особенностями крови у новорожденных;
9) кровяными химерами.