1. В стеклянной посуде готовят серию разбавлений тестируемой воды, согласно табл. 3.
2. В колбы наливают по 100 мл разбавляющей, тестируемой воды и приготовленных растворов. В качестве разбавляющей воды используется водопроводная, отстоянная и обогащённая кислородом, а в качестве тестируемой воды используются кислый или щелочной стоки, сточная вода, содержащая тяжелые металлы или нефтепродукты.
2. В каждую опытную и контрольную колбу помещают по 10 дафний. Их переносят стеклянной трубкой, погрузив её в воду.
3. Наблюдать в течение занятия за состоянием рачков. Учет выживших дафний проводят через 1, 24, 48, 72, 96 ч. Особей считают выжившими, если они свободно передвигаются в толще воды или всплывают со дна сосуда не позднее 15 с после его легкого покачивания.
4. Рассчитать процент погибших дафний в каждом из вариантов по формуле:
где – количество дафний, выживших в контроле; – количество дафний, выживших в тестируемой воде.
Если полученное значение А ≥ 50 %, то это позволяет сделать вывод о том, что данный модельный сток оказывает токсическое действие на дафний.
Для определения степени острого токсического действия анализируемых сточных вод рассчитать графическим методом кратность разбавления воды (ЛКр50 - 96 ч), при которой гибнет 50 % дафний за 96 ч и минимальную кратность разбавления (ЛКр0 - 96 ч), при которой дафнии не гибнут. Пример графического расчета степени токсичного действия показан на рис. 11.
|
На оси абсцисс откладывают логарифмы величин кратности разбавления тестируемой воды, а на оси ординат - величины выживаемости дафний в процентах к контролю. Полученные точки соединяют прямой. От точек на оси ординат, соответствующих 50 и 100 %-ной выживаемости, проводят линии, параллельные оси абсцисс. Из точек пересечения этих линий с экспериментальной прямой опускают перпендикуляры на ось абсцисс и находят логарифмы величин кратности разбавления, которые (кратности) будут соответствовать искомым величинам ЛКр50 и ЛКр0. Чем больше величины ЛKp50 и ЛКр0, тем токсичнее сточная вода, а значит, тем опаснее для окружающей среды ее воздействие.
Степень токсичности можно также установить, рассчитав среднее время гибели 50 % дафний в тестируемой воде (ЛТ50). Для этого строят график, откладывая на оси абсцисс время наблюдения, а на оси ординат – выживаемость в процентах к контролю. Чем меньше ЛТ50, тем токсичнее тестируемая вода
Таблица 7
Зависимость «% погибших дафний – время»
Время, мин | |||||||
Количество выживших дафний, шт. | контроль | ||||||
сточн. вода | |||||||
разбавл. 1 | |||||||
разбавл… | |||||||
Среднее количество выживших дафний, шт. | |||||||
Выживаемость, % |