рефераты конспекты курсовые дипломные лекции шпоры

Раздел Образование
/
Ход определения.

Реферат Курсовая Конспект

Выберите учебное заведение

Ход определения.

Ход определения. - раздел Образование, Фракции остаточного азота 1.осаждение Белков. Центрифужную Пробирку С Внесенными В Нее 0,5 Мл Сыворотки...

1.Осаждение белков. Центрифужную пробирку с внесенными в нее 0,5 мл сыворотки и 0,5 мл СН₃СООН прикрывают пробкой и помещают в холодную водяную баню, воду в которой доводят до кипения. Пробы прогревают в течение 5 мин (время отмечают с момента закипания воды). Затем пробирки охлаждают и приступают к фильтрованию смеси.

2.Фильтрование. К содержимому пробирок добавляют по 1 мл дистиллированной воды и после перемешивания растворов тонкой стеклянной палочкой производят их фильтрование через гладкий бумажный фильтр. Пробирку и осадок на фильтре промывают еще 2 раза, каждый раз используя для этого по 1 мл воды, после чего основной фильтрат и обе порции промывных вод объединяют в одну пробирку с меткой 10 мл.

3.Цветная реакция с нингидрином. К полученному фильтрату добавляют 0,5 мл раствора нингидрина, содержимое пробы перемешивают и на 20 мин помещают пробирку в кипящую водяную баню. По истечении срока прогревания пробирку охлаждают в токе водопроводной воды, оставляют стоять 5 мин при комнатной температуре и доводят дистиллированной водой до 10 мл (по метке на пробирке).

4.Колометрия. Оптическую плотность измеряют на ФЭКе при зеленом светофильтре (длина волны – 536 нм) в кювете с толщиной слоя 5 мм. В качестве контрольной пробы используют дистиллированную воду.

5.Расчет производят по формуле путем сравнения показания экстинкций опытной и стандартной проб.

С_оп. = (Е_оп.• С_ст.) / Е_ст., где

Е_оп и Е_ст – оптическая плотность опытной и стандартной проб; С_ст – содержание мкг N в 0,5 мл стандартного раствора аланина.

6.Приготовление стандартного раствора аланина. 12,86 мг аланина растворяют в 100 мл воды (готовят перед применением).

Стандартный раствор в концентрации 12,86/100 мл содержит 0,128 мг аланина в 1 мл, или 0,064 мг (64 мкг) в 0,5 мл.

Молекулярная масса аланина – 90 Д, а в одной молекуле аминокислоты находится 1 атом N (14 Д), то исходя из соотношения молекулярной и атомной масс 90/14 = 6,4 можно определить, что 64 мкг аланина будут содержать 10 мкг N.

0,5 мл приготовленного стандартного раствора аланина обрабатывают точно так же, как 0,5 ил сыворотки крови.

Формула, используемая для расчета:

N г/л = С_оп.• 0,002, где

N г/л – содержание аминоазота в сыворотке крови (г/л); С_оп.– содержание аминоазота в стандартной пробе.

В норме концентрация аминного азота в сыворотке крови составляет 0,020 – 0,050 г/л.

Развернуть

Открыть в широком формате

– Конец работы –

Эта тема принадлежит разделу:

Фракции остаточного азота

Влияющие факторы... in vivo увеличение нефротоксичные препараты кортикостероиды избыток... in vitro снижение метод с уреазой цитрат натрия...

Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ: Ход определения.

Что будем делать с полученным материалом:

Если этот материал оказался полезным ля Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:

Все темы данного раздела:

Фракции остаточного азота
Низкомолекулярные азотистые вещества представлены, главным образом, продуктами обмена белков и нуклеиновых кислот. Эти вещества остаются в надосадочной жидкости или фильтрате после осаждения крупно

Методы определения мочевины
Основные группы методов определения содержания мочевины подразделяют на: 1.Ксантгидроловые: гетероциклический спирт ксантгидрол вступает в реакцию с мочевиной и образует н

Определение мочевины в сыворотке крови по цветной реакции с диацетилмонооксимом.
Принцип метода.Мочевина образует с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбазида и солей железа в кислой среде окрашенные соединения, интенсивность окраски которых пропорциона

Реактивы.
1.Раствор трихлоруксусной кислоты – 10 г/100 мл. 2.Водный раствор диацетилмонооксима - 2,5 г/100 мл. Реактив стоек. 3.Водный раствор тиосемикарбази

Ход определения.
1.В центрифужную пробирку вносят 0,8 мл дистиллированной воды, 0,2 мл сыворотки крови и 1,0 мл раствора 10% ТХУ, содержимое ее смешивают. Через 15 – 20 мин смесь центрифугируют при 3000 об/мин.

Стандартная кривая зависимости концентрации мочевины от показателей экстинкции.
Приготовление стандартного 1% раствора мочевины 1) 1 г мочевины растворить в 100 мл Н2О. Из этого основного раствора готовят рабочий раствор разведением основного в 10 раз (1 мл

Нормальные величины
Сыворотка (по реакции с диацетилмонооксимом) новорожденные 1,4‑4,3 ммоль/л дети

Сыворотка
Уровень мочевины зависит от скорости ее синтеза в печени и выделения через почки, а также от величины белкового катаболизма. Повышение уровня мочевины может наблюдаться пр

Методы определения мочевой кислоты.
Существующие методы определения концентрации мочевой кислоты можно разделить на несколько групп: 1. Колориметрические — все эти методы недостаточно специфичны и основаны на:

Реактив Фолина.
2.Трихлоруксусная кислота – 20 г/100 мл 3. Стандартный раствор мочевой кислоты. 100 мг мочевой кислоты помещают в колбу на 500 мл. Затем в нее добавляют 25 мл раст

Ход определения.
1.0,3 мл сыворотки вносят в обычную химическую пробирку, которую затем погружают в кипящую водяную баню на 2 мин.После охлаждения в нее добавляют 3 мл дистиллированной воды и сгусток экстрагируют п

Нормальные величины
Сыворотка (указанный метод) дети 0,12‑0,32 ммоль/л мужчины 0,24‑0,50 ммоль/л

Сыворотка
В крови выделяют два типа повышения содержания мочевой кислоты (гиперурикемии): первичную и вторичную. Первичная гиперурикемия отмечается в связи с подагрой, связанной с у

Методы определения креатинина
Креатинин Существующие методы определения концентрации креатинина делятся на следующие группы. 1. Колориметрические: основанные на р

Определение концентрации креатинина в сыворотке крови методом Поппера
В результате реакции креатинина и пикриновой кислоты в щелочной среде образуется окрашенное соединение (оранжево-красное) – таутомер пикрата креатинина. Интенсивность окраски пропорциональна концен

Нормальные величины
Сыворотка дети 27‑62 мкмоль/л подростки 44‑88 мкмоль/л

Методы определения молекул средней массы
Молекулы средней массы (МСМ) или среднемолекулярные пептиды (СМП) в основной своей части представлены пептидами с молекулярной массой 300-5000 Д. Эта фракция включает в себя гормоны, нейропептиды,

Ход определения
1.В центрифужную пробирку помещают 0,5 мл плазмы (сыворотки) крови, добавляют 0,5 мл раствора хлорной кислоты (реактив 1), тщательно перемешивают встряхиванием, оставляют при комнатной температуре

Клинико-диагностическое значение.
Уровень МСМ в плазме (сыворотке) крови значительно увеличивается при ряде патологических состояний: онкологических заболеваниях, хронической почечной недостаточности, язвенной болезни желудка, пора

Методы определения аминного азота
Свободный аминный азот (аминоазот) представляет собой азот аминокислот, содержащихся в сыворотке (плазме) крови (в отличие от общего аминного азота, включающего также азот сложных полипептидов и бе