Специфическая диагностика гриппа.

Лабораторные диагностические методы предназначены для ранней (экстренной) или ретроспективной диагностики. Материалами для исследования являются мазки, смывы, аспират из дыхательных путей (определение вируса и его антигенов) и пробы крови (специфические антитела).

· Выделение вируса. Вирус гриппа может быть выделен из мазков горла и носоглотки в течение 3 дней после начала заболевания. Культурирование производится на 10–11 дневных куриных эмбрионах (в амниотической или аллантоисной жидкости) в течение 48 часов (для достижения необходимого для обнаружения количества вируса). Для определения типа вируса требуется 1–2 дня. Ввиду сложности и длительности процедуры, такая диагностика имеет смысл только для определения этиологии локальной эпидемии.

· Определение РНК вируса (полимеразная цепная реакция – ПЦР)

· Прямая и непрямая иммунофлуоресценция (экспресс–методом, позволяющим обнаружить антигены вируса через 2–3 ч от момента его взятия). При данном способе диагностики цитоплазматические вирусные включения –– антигены (в ядре и цитоплазме эпителиоцитов) обнаруживают в мазках цилиндрического эпителия слизистой оболочки ВДП.

· Серологические методы на наличие антигриппозных антител (ИФА, РСК, РТГА, прямое определение антигена). Образец сыворотки крови для диагностики острой фазы инфекции должен быть взят в течение 5–6 дней после начала заболевания, и образцы выздоравливающего берутся на 10–14 или 21-й день после начала инфекционного процесса. Достоверное увеличение титра –– в 4 раза. РСК позволяет выявить различия между S-антигенами и узнать тип вируса, вызвавшего инфекцию (А или В). РТГА позволяет определить различие между V-антиген (поверхностными белками) и, таким образом, установить подтип вируса. Реакция основана на том, что вирус гриппа способен агглютинировать человеческие или куриные эритроциты, а специфические антитела ингибируют этот процесс.

· Прямое определение антигена. В настоящее время были разработаны специальные тесты для быстрого определения антигена вируса гриппа А. Вирусные антигены выявляют в клетках верхних дыхательных путей после их взаимодействия со специфическими антителами. (Мазки-отпечатки с нижней носовой раковины; люминесцентная микроскопия с акридиновыми флюорохромами которые, связываясь с РНК, придают соединениям ярко-красную флюоресценцию).