рефераты конспекты курсовые дипломные лекции шпоры

Раздел Образование
/
Опыт 4. Определение степени денатурации белка

Реферат Курсовая Конспект

Выберите учебное заведение

Опыт 4. Определение степени денатурации белка

Опыт 4. Определение степени денатурации белка - раздел Образование, Большое практическое значение имеет влияние температуры и рН среды на стабильность амилаз В Пищевой Технологии Особое Практическое Значение Имеет Проце...

В пищевой технологии особое практическое значение имеет процессы гидролиза и денатурации белков. В основе денатурации белков лежит нарушение упорядоченного расположения полипептидных цепей во вторичной, третичной структуре молекулы в результате разрыва некоторых внутримолекулярных связей. При денатурации изменяются физические свойства белков, снижается их растворимость, способность к гидратации, агрегированию, утрачиваются биологические свойства.

В результате разрыва внутримолекулярных связей (водородных, солевых) пептидные цепи частично развертываются, в результате чего функциональные группы становятся более активными или более доступными для воздействия реагентов или ферментов. Для тепловой денатурации белков особенно характерно увеличение реактивности –SH– групп.

Денатурация белков происходит под воздействием тепла, начиная с 60 ºС, при механическом воздействии (давлении, растирании, встряхивании и т.д.) и под действием химических реагентов.

Приборы и реактивы: 0,5 М раствор хлорида калия; биуретовый реактив (1,5 г сульфата меди (CuSO₄·5H₂O) и 6,0 г виннокислого натрия-калия (NaKC₄H₄O₆·4H₂O) растворяют в 500 мл воды. К этому раствору при хорошем помешивании добавляют 300 мл 10 % раствора NaOH свободного от Na₂CO₃, и 2 г KI для предотвращения самопроизвольного восстановления. Раствор доводят до 2 мл и хранят в полиэтиленовой склянке).

Примечание. Биуретовую реакцию нельзя проводить в присутствии солей аммония в виду образования медноаммиачных комплексов.

Извлечение белков осуществляют одним из перечисленных ниже способов:

1) Раствор растительных белков. К 40 г пшеничной муки прибавляют 160 мл дистиллированной воды, перемешивают и колбу переносят в холодильник (1–2 °С) на сутки, затем снова перемешивают и фильтруют вначале через гигроскопическую вату, а потом через складчатый бумажный фильтр. Раствор содержит главным образом альбумины. Хранят в холодильнике.

2) Отвешивают 5 г муки, заливают 10 мл раствора хлорида калия (КСI) и ставят на встряхиватель на 5 минут. Полученную суспензию переносят в центрифужную пробирку на 50 мл и добавляют 35 мл раствора КСI. Пробирки закрывают резиновыми пробками и встряхивают 15 минут. Через 15 минут осадок отделяют на центрифуге при 5000 об/мин в течение 5 минут. Экстракт сливают в мерную колбу на 100 мл через воронку с ватным фильтром, который помещают в горлышко воронки. Извлечение раствором КСI повторяют еще три раза, но с 10 мл растворителя. При тщательном извлечении, в солевую вытяжку переходят не менее 30 % от общего количества азота. После добавления новой порции растворителя осадок в пробирке хорошо перемешивают палочкой. Экстракцию солевым раствором заканчивают промыванием осадка 20–30 мл дистиллированной воды, которую после перемешивания и центрифугирования сливают в мерную колбу с солевыми вытяжками и доводят до метки водой.

Развернуть

Открыть в широком формате

– Конец работы –

Эта тема принадлежит разделу:

Большое практическое значение имеет влияние температуры и рН среды на стабильность амилаз

Цель работы изучение некоторых свойств фермента... Общие сведения Ферменты биологические катализаторы белковой природы Они значительно повышают скорость химических реакций которые в отсутствие ферментов...

Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ: Опыт 4. Определение степени денатурации белка

Что будем делать с полученным материалом:

Если этот материал оказался полезным ля Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:

Все темы данного раздела:

Методика выполнения работы
В колбу на 100 мл внести пипеткой 20 мл раствора крахмала и 8 мл буферных растворов для создания определенного значения рН. Количество вносимых буферов приведено в таблице 11.

Оформление результатов опыта
Полученные результаты записывают в таблицу 12. Таблица 12. Температура гидролиза, оС Время декстринизации, мин Содер

Определение амилолитической активности солода
Необходимые реактивы и посуда: 1 М раствор NаОН, 1,0 М раствор йода, 1 М раствор серной кислоты, 0,1 М раствор тиосульфата натрия, 2 % буферный раствор крахмала, аце

Определение амилолитической способности (АС) ферментных препаратов
Необходимые реактивы и посуда: 0,1 М раствор уксусной кислоты, 0,1 М раствор ацетата натрия, ацетатный буферный раствор (смешивают равные объемы 0,1 М растворов уксу

Анализ результатов работы
Результаты сводят в таблице 6.2. и делают вывод о содержании железа в исследуемых объектах. Таблица 6.2 Содержание ферментов в исследуемых объектах

Опыт 1. Определение редуцирующих сахаров в продуктах растительного происхождения по Иссекутцу
Метод основан на том, что редуцирующие сахара (глюкоза, фруктоза) восстанавливают в щелочном растворе железосинеродистый калий в железистосинеродистый. Реакция может быть представлена в виде:

Методика выполнения работы
В качестве объекта для исследования берут свежие растительное сырье и продукт, полученный из этого сырья в результате тепловой обработки. Объект для исследования (яблоки свежие и яблочное

Оформление результатов опыта
Полученные результаты записывают в таблицу 6. Таблица 6. Образец Навеска

Опыт 2. Определение глюкозы по методу Вильштеттера и Шудля
В основе этого метода лежит способность молекулярного йода в щелочной среде окислять только альдегидоспирты, не влияя на кетоспирты. Реакция идет в 2 стадии: &n

Методика выполнения работы
В 2 колбы на 100 мл внести по 10 мл раствора йода. В одну из колб (опытный вариант) добавить 20 мл экстракта, приготовленного в опыте 2.3.1.1, в другую колбу (контрольный вариант) прилить 20 мл дис

Оформление результатов опыта
Полученные результаты записывают в таблицу 7. Таблица 7. Образец Навеска, мг

Методика выполнения работы
Отобрать 50 мл экстракта пипеткой в мерную колбу на 100 мл, добавить 5 мл раствора соляной кислоты, поместить в кипящую водяную баню на 30 минут для инверсии сахарозы. Затем колбу охладить, добавит

Методика выполнения работы
В пробирку прилить 2–3 мл раствора яичного белка и равный объем насыщенного раствора сульфата аммония. Содержимое пробирки тщательно перемешать и оставить на 10 минут. Выпадает хлопьевидный осадок

Опыт 3. Выделение казеина из молока
В молоке общее содержание белков находится, как правило, в пределах 2,9–4,0 %. Белки молока делят на две группы: казеиновые и сывороточные. Среди белков молока рассматривают : основных белков: казе

Методика выполнения работы
В стакан емкостью 100 мл налить 20 мл молока и прилить равный объем дистиллированной воды. К этой смесим осторожно, по стеклянной палочке прилить 10 % раствор уксусной кислоты до рН 4,6 (2–3 м

Количественное определение растворимых белков
Содержание водо- и солерастворимых белков определяют колориметрическим методом с биуретовым реактивом. Метод основан на определении интенсивности окраски, возникающей в результате взаимодействия бе

Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика 100 мг кристаллического альбумина растворяют в 10 мл физиологического раствора и делают следующие разведения: Раствор 1. 100 мг альбумина + 10 мл 0,85

Оформление результатов
Полученные результаты записать в таблицу 9. Таблица 9. Проба Масса пробы Оптическая плотность Испытуемо

Опыт 2. Определение перекисного числа масла.
Метод состоит в том, что в результате действия перекисей на KI, выделяется йод, который оттитровывается тиосульфатом натрия. Реакцию проводят в кислой среде, используя уксусную кислоту (как устойчи

Методика выполнения работы
В коническую колбу с притертой пробкой вносят навеску жира 0,8 г, взятую с точностью до 0,0001 г. Жир расплавляют на водяной бане и по стенке колбы, смывая следы жира. Вливают из мерного цилиндра 1

Оформление результатов
Полученные результаты записать в таблицу . Таблица 10. Образец Навеска, мг